兩種商品化降鈣素原定量檢測試劑盒方法學(xué)比對

楊 琴 張學(xué)東 張文星 (勝利油田中心醫(yī)院檢驗(yàn)科，山東 東營 257000)

降鈣素原(Procalcitonin，PCT)由位于11 號染色體(11p15.4)上的Calc-I 基因編碼，通過選擇性剪接(編碼1～4 外顯子)生成Calc-ImRNA，轉(zhuǎn)錄后在甲狀腺濾泡旁細(xì)胞粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)翻譯成降鈣素原前體。裂解生成的PCT 由116 個氨基酸組成，相對分子質(zhì)量為13 000［1，2］。它在細(xì)菌或真菌感染合并嚴(yán)重全身系統(tǒng)反應(yīng)或器官低灌注時顯著升高，而在病毒或局灶感染時水平正常或輕度升高。這個特性使得PCT 用來鑒別系統(tǒng)感染和非感染性炎癥或局灶感染，是具有高靈敏度、特異性的新指標(biāo)。此外，PCT 還可用來判斷治療的有效性、疾病的嚴(yán)重程度和預(yù)后［3］。

目前臨床上降鈣素原的試劑大多為進(jìn)口試劑盒，試劑和耗材價格昂貴，儀器維護(hù)成本高，隨著國內(nèi)全自動磁微?；瘜W(xué)發(fā)光技術(shù)的發(fā)展及國產(chǎn)試劑盒質(zhì)量的提高，有必要對國內(nèi)一些廠家的試劑性能進(jìn)行評估，本文選用臨床比對的方法對國產(chǎn)試劑盒質(zhì)量進(jìn)行評價，探討其臨床應(yīng)用價值。

1 材料與方法

1.1 材料 取材來自隨機(jī)選擇2014 年1～3 月間本院門診、急診和住院患者，檢驗(yàn)申請單目的為降鈣素原檢測，在進(jìn)口全自動檢測系統(tǒng)和國產(chǎn)全自動化學(xué)檢測系統(tǒng)平行檢測靜脈血采集的血清樣本。其中臨床比對樣本300 例，采用雙盲法。進(jìn)口儀器為羅氏e601，試劑為進(jìn)口配套化學(xué)發(fā)光試劑;國產(chǎn)全自動為鄭州安圖生物AutoLumo A2000，配套化學(xué)發(fā)光試劑為鄭州安圖生物(Autobio)生產(chǎn)提供。

1.2 方法 ①嚴(yán)格按照試劑盒說明書操作和判定結(jié)果。②進(jìn)口全自動化學(xué)發(fā)光系統(tǒng)和國產(chǎn)全自動化學(xué)發(fā)光系統(tǒng)平行檢測所選樣本的降鈣素原，并對兩種檢測結(jié)果結(jié)合臨床診斷進(jìn)行統(tǒng)計(jì)、分析、比對。③質(zhì)控均采用廠家提供的配套質(zhì)控品，采用L-J 法質(zhì)控方法判斷。④PCT 試劑盒對照和考核試劑盒檢測原理及結(jié)果解釋詳見表1。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS18.0 統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和統(tǒng)計(jì)分析［10］，陰陽性結(jié)果分析進(jìn)行χ2檢驗(yàn)分析，檢驗(yàn)水準(zhǔn)P ＞0.05，量值相關(guān)性統(tǒng)計(jì)分析采用線性回歸模式分析。

表1 兩種商品化試劑盒簡介Tab.1 Instruction of two commercial diagnostic kits

2 結(jié)果

兩種檢測系統(tǒng)檢測結(jié)果的總符合率為97.67%(詳見表2)，χ2=1.29，P=0.26，兩者差異不顯著(P ＞0.05);相關(guān)系數(shù)r=0.950 05(詳見圖1)，量值相關(guān)性分析有相關(guān)性。

不符樣本分析，以0.5 ng/ml 作為參考值分析，不符樣本7 例，其中6 例樣本為灰區(qū)樣本，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，1 例樣本為第三方進(jìn)口試劑和國產(chǎn)試劑檢測結(jié)果均大于0.5 ng/ml，而進(jìn)口試劑檢測檢測結(jié)果小于0.5 ng/ml，結(jié)合這份樣本其他檢測結(jié)果如肺炎支原體為陽性，C 反應(yīng)蛋白(CRP)為78.4 mg/ml，D-二聚體陽性，尿膽原陽性，需要多次抽血動態(tài)監(jiān)測標(biāo)志物濃度的動態(tài)變化，并結(jié)合臨床癥狀和體征等綜合分析。

表2 兩試劑盒檢測結(jié)果比對表Tab.2 Result comparison between two kits

圖1 兩試劑盒檢測結(jié)果量值相關(guān)性分析圖Fig.1 Result correlation between two kits

3 討論

臨床上細(xì)菌感染性疾病極為常見，而病原學(xué)診斷耗時長，在微生物培養(yǎng)結(jié)果出來之前臨床上已盲目地使用抗菌藥物，造成了抗菌藥物的濫用，也加重了患者經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。盡快找到快捷、有效的實(shí)驗(yàn)方法對細(xì)菌感染性疾病進(jìn)行診斷及鑒別診斷，并準(zhǔn)確評價細(xì)菌感染性疾病的發(fā)生、發(fā)展，有著非常重要的臨床應(yīng)用價值。降鈣素原(PCT)是近年來發(fā)現(xiàn)的一種新的細(xì)菌感染診斷與鑒別診斷的指標(biāo)，研究發(fā)現(xiàn)PCT 可用于疾病的早期診斷、細(xì)菌感染與非細(xì)菌感染的鑒別診斷，還可用于感染病情的監(jiān)測，反映炎癥活動情況及疾病嚴(yán)重程度，比傳統(tǒng)的炎性指標(biāo)有更高的敏感性和特異性［4］。

據(jù)調(diào)查，目前國內(nèi)三級甲等以上醫(yī)院的臨床實(shí)驗(yàn)室已經(jīng)普及了自動化儀器［5］，其中進(jìn)口設(shè)備以及試劑所占比例超過95%，基本上處于壟斷地位，國產(chǎn)全自動免疫系統(tǒng)處于發(fā)展期［6］。目前國內(nèi)綜合性醫(yī)院臨床實(shí)驗(yàn)室降鈣素原定量檢測大多為進(jìn)口儀器及配套進(jìn)口試劑，價格昂貴，檢驗(yàn)及儀器維護(hù)成本過高，依賴性強(qiáng)，增加病人經(jīng)濟(jì)及精神負(fù)擔(dān)。我們用國產(chǎn)磁微?；瘜W(xué)發(fā)光全自動降鈣素原定量檢測系統(tǒng)，與用進(jìn)口免疫檢測系統(tǒng)平行檢測300 例降鈣素原(PCT)樣本，并對兩種試劑檢測結(jié)果進(jìn)行比對分析，結(jié)果顯示國產(chǎn)磁微粒化學(xué)發(fā)光降鈣素原(PCT)定量檢測系統(tǒng)與羅氏降鈣素原定量檢測系統(tǒng)整體對比結(jié)果良好，且試劑及儀器維護(hù)成本降低，在一定程度上既滿足了臨床定量檢測的需求，同時在較大程度上降低了檢驗(yàn)費(fèi)用，減輕了患者經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)，有較大的臨床應(yīng)用價值。

本研究采用雙盲法，平行檢測了300 例PCT 樣本，比對結(jié)果顯示，其中7 例不符樣本，6 例樣本結(jié)果為0.5 ng/ml 上下偏差20%的樣本，1 例樣本為第三方進(jìn)口試劑和國產(chǎn)試劑檢測結(jié)果均大于0.5 ng/ml，而進(jìn)口試劑檢測檢測結(jié)果為＞0.5 ng/ml，結(jié)合這份樣本其他檢測結(jié)果如肺炎支原體為陽性，C反應(yīng)蛋白(CRP)為78.4 mg/ml，D-二聚體陽性，尿膽原陽性，因此筆者認(rèn)為對于該例標(biāo)本及類似樣本，需要多次抽血動態(tài)監(jiān)測標(biāo)志物濃度的動態(tài)變化，并結(jié)合臨床癥狀和體征等綜合分析。

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