長蛸(Octopus minor)初孵幼體培育與生長研究*

薄其康 鄭小東① 王培亮 畢可智

(1.中國海洋大學水產(chǎn)學院 青島 266003;2.馬山集團有限公司 威海 264319;3.榮成市綠色食品辦公室 威海 264300)

長蛸(Octopus minor)又稱馬蛸、八腿蛸和八蛸等,隸屬頭足綱、八腕目、蛸科、蛸屬,廣泛分布于我國南北沿海、朝鮮半島和日本沿海(Yamamoto,1942;董正之,1988;錢耀森,2011),Octopus variabilis為同物異名(Luet al,2012)。長蛸個體較大,肉質(zhì)鮮美,可食率很高,其生鮮及加工食品在海內(nèi)外市場廣闊,是我國北方主要出口蛸類。近十幾年來,國內(nèi)外對長蛸研究主要涵蓋組織學和組織化學(Iwakoshiet al,2000;許星鴻等,2008)、生態(tài)學(吳常文等,1995)、繁殖生物學(錢耀森等,2013)、生理(Seolet al,2007)、遺傳(孫寶超等,2010;Zuoet al,2011;Chenget al,2012)、營養(yǎng)分析(錢耀森等,2010)以及養(yǎng)殖(邵楚等,2011;劉暢,2013;Zhenget al,2014)等方面。長蛸作為資源修復種備受關(guān)注,2012年農(nóng)業(yè)部批準建設(shè)山東榮成月湖長蛸國家級水產(chǎn)種質(zhì)資源保護區(qū),同時山東省級長蛸原種場也正在建設(shè)中。

長蛸以攝食甲殼類、貝類、環(huán)節(jié)動物等無脊椎動物、魚類為主,在各生長階段均體現(xiàn)出較強的攝食能力(Boletzkyet al,1983;董正之,1988)。光滑河藍蛤(Potamocorbula laevis)多生長在江河入海處,在我國南北沿岸均有廣泛的分布(張素萍,2008)。菲律賓蛤仔(Ruditapes philippinarum)是我國習見經(jīng)濟貝類(王如才等,2008)。幼體培育是增養(yǎng)殖和資源修復的前期工作和重要環(huán)節(jié),本研究使用這兩種價廉的經(jīng)濟雙殼貝類培育長蛸初孵幼體,分析幼體生長的基本指標、相關(guān)關(guān)系并描述幼體生長規(guī)律,旨在為養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)化提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù),同時為培育增殖和資源修復用幼體提供新途徑。

1 材料與方法

1.1 親蛸采捕繁育和孵化

2012年6—8月份在山東榮成月湖采捕長蛸親體916只,置于 5個室內(nèi)水泥池(5.7m×2.7m×1.5m)中暫養(yǎng),水深 0.5m,水溫 19.5—25.1°C,鹽度 28—31,遮光充氣,常流水,日換水量為總水體的 2倍,投放PVC管作為采卵器和遮蔽物。暫養(yǎng)49d后,親蛸陸續(xù)產(chǎn)卵。實驗所用幼體來自同一親蛸。將附著有受精卵的采卵器放在同樣的水泥池中流水孵化。孵化過程中有親體護卵。受精卵前期孵化是在3—18°C的自然水溫下進行,后期為11.8—13.4°C。

1.2 幼體培育

幼體培養(yǎng)在中國海洋大學養(yǎng)殖技術(shù)實驗室進行,采用 0.45m×0.35m×0.34m 玻璃缸培養(yǎng)幼體,水深0.25m,鹽度 28—31,pH 7.9—8.1,水溫(13±1)°C,自然光照。缸底鋪有 8mm左右厚的砂,投放足量的菲律賓蛤仔殼和脈紅螺殼作為幼體遮蔽物,砂和貝殼在使用前需清洗和消毒。放置遮蔽物時,蛤殼內(nèi)側(cè)、螺的殼口朝下。每天吸底1次,每10d全量換水1次。

1—15d幼體投喂的是光滑河藍蛤,之后投喂菲律賓蛤仔。將孵化出的幼體分為A、B組,將其余還未孵化的分為C組。A、C組使用菲律賓蛤仔殼作為遮蔽物,B組使用脈紅螺殼作為遮蔽物。投喂前用解剖刀將蛤左右分開,將蛤肉暴露,每個殼附帶有部分蛤肉。每天投餌1次,18:00進行投喂,次天早上8:00收殘餌。每份蛤肉可以重復使用3次。

1.3 數(shù)據(jù)分析

餌料溶失計算VW(%) =(Wf－Wi) /Wi×100%,Wi和Wf分別指未供幼體取食的餌料在溶水前后的重量。F=Wi/Wf,是用來計算攝食量的校正系數(shù)。

幼體培養(yǎng) 80d,每 10d取樣進行形態(tài)測量,包括鮮重(Wt)、全長(TL)、胴長(MLd)、胴背寬(MWd)、腕長(AL)以及吸盤數(shù)(SC)等。測量前先將幼體放在含有2%酒精海水中麻醉10min(Villanuevaet al,1997)。用吸水紙盡量吸干幼體表面和胴體腔中的海水,然后稱重;使用IMAGEJ軟件測量體長。用80%酒精固定24h,保存樣品。

培育期間,按照Koueta等(1999,2001)所描述的計算測定攝食量(FI)、攝食率(FR)、生長率(GR)、餌料效率(CER)、瞬時生長率(IGR)和成活率(SR)等,公式如下:

式中,W1和W2分別表示餌料被攝食前后質(zhì)量,Wt1和Wt2分別表示幼體上次稱量的鮮重與10d后再次稱量時的鮮重,所以GR為旬生長率;Nt1和Nt2分別表示上次取樣后與10d后再次取樣前蛸幼體只數(shù),SR為旬成活率。

采用SPSS 16.0統(tǒng)計分析。回歸分析顯著性運用F檢驗法檢驗。用單因素方差分析(ANOVA)比較同時期不同組生長狀況,并運用 Duncan’s多重極差檢驗方法進行多重比較。

2 實驗結(jié)果

2.1 初孵幼體

初孵幼體體表光滑,具極細的色素色斑,TL=(44.97±3.76)mm(40.7—47.8mm,n=3);胴體呈長卵圓形,MLd =(10.31±0.08)mm(10.3—10.8mm,n=3),為TL的 22.22%,是MWd的1.31倍(圖1a)。各腕長不等,第一對腕最長,約為胴長的 2.9倍;腕式 1 ＞2 ＞ 3 ＞ 4,吸盤兩列。

2.2 幼體攝食行為與成活率

幼體白天多躲避在遮蔽物下,時而將腕伸出遮蔽物四處視探,晚上取食。夜間能觀察到幼體趴伏在蛤肉上進行攝食(圖1b),白天收殘餌時會發(fā)現(xiàn)蛤軟體部僅剩外套膜(圖1c,圖1d)。若遇有光照刺激,幼體有噴墨現(xiàn)象。實驗中還觀察到幼體間的互殘現(xiàn)象(圖1e)。

由于各組培養(yǎng)幼體數(shù)量不同加之實驗定期采樣,B、C組分別培養(yǎng)了60d和35d,A組培養(yǎng)時間最長,為80d。幼體旬成活率比較穩(wěn)定且比較高,70d中幼體旬成活率約在72.7%以上,B組40—60d和C組20—30d階段幼體幾乎不死亡;幼體 30d總成活率 80.99%,50d為 65.61%,70d為54.65%,80d成活率迅速降低至18.70%。

2.3 幼體生長

三組幼體MLd/TL比隨時間增加,表明胴體的增長快于腕。以A組為例(圖2,圖3),0—80d的培育中,幼體MLd和TL分別由10.1mm和45.0mm增加到15.3mm和56.5mm,增長率分別為51.04%和25.53%,兩者比值由0.224增加到0.271;MLd/TL比前50d增加慢,平均比值為0.224,50—80d比值增加快,平均為 0.263。1—80d各腕吸盤數(shù)(SC)變化不顯著,各腕SC范圍分別為第一對腕 50—72,第二對腕 49—64,第三對腕 36—62,第四對腕 36—52;第三對腕與第四對腕SC相近。

2.4 幼體餌料效率、攝食率和生長率

幼體餌料效率(CER)、攝食率(FR)和生長率(GR)隨時間波動,幼體FR在0.90—3.38/10d,CER最高為29.29%。在前27d培養(yǎng)幼體平均生長率10.63%/10d,前50d幼體平均生長率7.86%/10d。在幼體培育的過程中,可明顯看出FR與CER、GR呈負相關(guān)關(guān)系(圖4,圖5)。CER與 GR呈極顯著線性回歸關(guān)系(P＜0.01),y= 1.452x－2.731(R2=0.865)(圖6)。經(jīng)過80d培養(yǎng),幼體最終生長率為 122.05%,平均生長率為9.97%/10d。

圖1 長蛸幼體80d培育Fig.1 The 80d hatching rearing of O.minor

圖2 A組長蛸幼體胴長及胴長/全長值變化Fig.2 The trends of MLd and MLd/TL of A group

圖3 A組長蛸幼體腕吸盤平均數(shù)Fig.3 The amount of SC in Group A

圖4 長蛸幼體攝食率與餌料效率Fig.4 The FR and CER of O.minor’s hatchings

圖5 長蛸幼體餌料效率與生長率的關(guān)系Fig.5 The relation between CER and GR of O.minor’s hatchings

2.5 幼體鮮重與培養(yǎng)天數(shù)的關(guān)系

初孵幼體平均鮮重(Wt)(0.322±0.006)g(0.316—0.327g,n=3)。幼體Wt隨培養(yǎng)時間(t)增加而增加,Wt與培養(yǎng)天數(shù)呈指數(shù)函數(shù)關(guān)系,A、C組Wt與培養(yǎng)天數(shù)關(guān)系Wt = 0.294e0.010t(R2=0.894,P＜0.01),B組平均鮮重與培養(yǎng)天數(shù)關(guān)系為 Wt = 0.316e0.010t(R2= 0.872,P＜0.01),幼體總體生長曲線為 Wt = 0.301e0.010t(R2=0.854,P＜0.01)。

2.6 遮蔽物的優(yōu)劣

在培養(yǎng)中,雖然B組中個體鮮重與A、C組無顯著差異,但其平均值均大于 A組(表1),表明螺殼作為遮蔽物有利于幼體培養(yǎng)。

圖6 長蛸幼體鮮重變化Fig.6 The trends of Wt of O.minor’s hatchings

表1 3組幼體平均鮮重的比較Tab.1 The comparison between the hatchings of O.minor at same stage from 3 groups

3 討論

3.1 幼體遮蔽物的選擇

長蛸喜陰暗和安靜環(huán)境,通常會隱蔽躲藏。錢耀森(2011)和劉暢(2013)分別使用蛤蜊殼、牡蠣殼、海藻以及空心陶瓷墜作為遮蔽物,錢耀森(2011)認為海藻不僅起到遮蔽物的效果,而且海藻中的小生物還能作為幼蛸餌料;劉暢(2013)認為由于蛤蜊殼內(nèi)常聚集多只幼體,易爭斗,影響幼體成活率,其效果不如陶瓷墜。本實驗所用菲律賓蛤仔殼和螺殼作遮蔽物,結(jié)果表明后者效果更好(表1)。

本文還在玻璃缸底鋪了砂,由于幼體的活動,殼下會形成凹陷的小砂坑,白天幼體就藏匿在砂坑與殼形成的空間中,并借殼邊緣留出的縫隙吸入和呼出海水,也起到了一定的遮蔽作用。

3.2 幼體生長與餌料選用

Octopus pallidus是一種底棲種類,體重、體長和生活史與長蛸相當,且其初孵幼體底棲,鮮重(0.230g)與長蛸初孵幼體相似。Leporati等(2007)和 André等(2008)在水溫14—16°C下培育O.pallidus,平均生長率(GR)分別得到13.8%/10d和14.3%/10d。本文使用光滑河藍蛤和菲律賓蛤仔作為長蛸幼體開口和后期餌料,在水溫 11.8—13.4°C 下,50d幼體的 GR 為7.86%/10d,較前者低,遠低于在培育水溫 21°C下使用蟹苗作開口餌料得到的 GR值 4.63%/d(劉暢,2013),但是幼體成活率(30d總成活率80.99%,50d總成活率65.61%)高于后者(47天的成活率45.4%)。

GR和FI是隨培育溫度升高而增加的(Segawaet al,2002;Semmenset al,2004),本作者認為使用光滑河藍蛤作為餌料,幼體平均生長率偏低可能與培育溫度有一定關(guān)系。此外,可能與餌料自身營養(yǎng)或長蛸幼體對食物喜好有關(guān)。

Smale等(1981)認為甲殼類和魚類的混合餌料對蛸類最合適。邵楚等(2011)指出投喂招潮蟹,長蛸攝食穩(wěn)定,生長快,特定生長率及餌料轉(zhuǎn)化率高,活動力強。長蛸幼體的后期培育仍然選用藍蛤和菲律賓蛤仔,結(jié)果顯示長蛸幼體能夠攝食兩種蛤,這兩種雙殼貝類能維持長蛸幼體的基本生長和能量所需。

錢耀森(2011)按 5—10個/mL鹵蟲無節(jié)幼體和1—2個/mL橈足類混合作為長蛸幼體的開口餌料,并在幼體13d以后逐漸增加橈足類和蟹苗的比例,效果較好。本實驗使用光滑河藍蛤和菲律賓蛤仔作為開口餌料,可以滿足幼體攝食需要。藍蛤可以讓初孵幼體度過開口期,比蝦、蟹幼體等活餌料低廉,易持續(xù)獲得,特別是在冬季培育幼體階段。但兩種貝類作為后期餌料,效果不是很理想。

3.3 幼體生長特征和互殘現(xiàn)象

長蛸初孵幼體的形態(tài)結(jié)構(gòu)與成體接近。幼體腕長(AL)約為胴長(MLd)的 2.9倍,而成體腕長約為胴長的 6—7倍(董正之,1988)。幼體胴長占全長的比(MLd/TL)是隨著培養(yǎng)天數(shù)增加的(圖2),幼體MLd增長率(51.04%)大于 TL增長率(25.53%),且幼體腕吸盤數(shù)無顯著變化(圖3),表明幼體初期生長主要集中在胴體生長,可能與幼體在此階段內(nèi)臟器官的發(fā)育有關(guān),如消化器官的發(fā)育(Moguelet al,2010)。也許幼體下一階段的生長中會集中在腕的生長,尚需進一步驗證。

長蛸幼體 Wt與培養(yǎng)天數(shù)(t)呈指數(shù)函數(shù)關(guān)系(圖6),與O.pallidus生長函數(shù)相似(Andréet al,2008),同時也發(fā)現(xiàn)了FR與CER的負相關(guān)關(guān)系(圖4)。André等(2008)認為頭足類的生長主要包括肌纖維的增生和增粗兩個過程,肌纖維增生耗能多,增重不明顯;而增粗耗能少,增重明顯。此外,劉暢(2013)在人工飼養(yǎng) 110d后,可根據(jù)有無莖化腕判斷長蛸性別。本實驗經(jīng)過80d的養(yǎng)殖,沒有觀察到莖化腕。

蛸類存在相互殘食現(xiàn)象。Promboon等(2011)在室內(nèi)研究砂蛸全生活史時發(fā)現(xiàn)在 0—70d容易發(fā)現(xiàn)幼體的互殘。王衛(wèi)軍等(2009)認為短蛸自身相殘的行為是遺傳行為,可能是由基因控制的,環(huán)境因素屬于次要原因,但是這些因素不良時可以加劇相殘行為。本文作者目睹一只活力強的幼體趴伏在活力弱的個體上進行咬食(圖1d),此外觀察到的殘缺眼睛或只剩部分頭的殘體也進一步證明存在互殘現(xiàn)象。本文認可由于餌料單一或營養(yǎng)缺乏引發(fā)幼體間相殘(錢耀森,2011)。相殘造成受傷幼體個體傷口感染,增加死亡率,此外,后期樣本量基數(shù)減小,稍有個體死亡便會引起高的死亡率,這是后期死亡率增加的直接原因。

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