IL-6基因多態(tài)性與類風濕性關(guān)節(jié)炎易感性關(guān)系的系統(tǒng)評估

李 濤，楊 立，王志平，付生軍

（蘭州大學泌尿外科研究所／蘭州大學第二醫(yī)院泌尿外科／甘肅省泌尿系統(tǒng)疾病臨床醫(yī)學中心／甘肅省泌尿系統(tǒng)疾病研究重點實驗室，蘭州730030）

類風濕性關(guān)節(jié)炎（rheumatoid arthritis，RA）是一種慢性自身免疫性疾病，以對稱性多關(guān)節(jié)滑膜及其周圍組織的異常增生和關(guān)節(jié)進行性破壞為主要特點，嚴重影響健康。其中，滑膜細胞及組織中浸潤的炎性細胞產(chǎn)生的大量細胞因子［1-2］、抗原、抗體［3-4］及黏附分子［5］等參與RA病理過程。白細胞介素-6（interleukin-6，IL-6）是一種在免疫應答、急性期反應及造血功能的調(diào)節(jié)中均具有重要作用的多功能細胞因子，能夠誘導免疫細胞的增殖及調(diào)節(jié)分化。有研究表明，RA患者血清及關(guān)節(jié)液中IL-6 濃度升高［6-7］。IL-6 基因啟動子存在-174G／C和-572G／C單核苷酸多態(tài)性，與RA的易感性可能相關(guān)［8］。目前，國內(nèi)外關(guān)于IL-6 基因啟動子-174G／C 和-572G／C 單核苷酸多態(tài)性與RA關(guān)系的研究較少，且研究發(fā)現(xiàn)IL-6 基因多態(tài)性與RA易感性在不同人群中存在差異［8-11］。因此，有必要對國人RA患者中IL-6 基因多態(tài)性的特點進行系統(tǒng)分析，以期為RA的診斷及后期的臨床治療提供循證醫(yī)學的支持。

1 資料與方法

1.1 研究類型 獲取關(guān)于國人IL-6 基因-174C／G和-572C／G基因多態(tài)性與RA易感性關(guān)系的病例對照研究。

1.2 研究對象 病例組為符合美國風濕協(xié)會（ARA）1987 修訂標準診斷的RA患者；對照組為非RA診斷的健康人群，且不受年齡、性別、病程、體質(zhì)量的限制。

1.3 評價指標 等位基因的比較（Gvs.C）、純合型的比較（GGvs.CC）、隱性模型的比較（GGvs.GC ＋CC）和顯性模型（GG ＋GCvs.CC）的比較。

1.4 排除標準 排除基因型報告不完整，無法計算的文獻；排除患有其他疾病影響試驗不能順利完成的患者；排除不能獲取全文及詳細數(shù)據(jù)、重復發(fā)表的文獻。

1.5 文獻檢索 計算機檢索Pubmed、Cochrane library、Sciverse、CNKI、VIP、CBM及萬方數(shù)據(jù)庫。由2 位檢索者獨立檢索文獻，檢索時間均從建庫至2013年9月。中文檢索詞為：白細胞介素、基因多態(tài)性、類風濕性關(guān)節(jié)炎、IL-6；英文檢索式為：（interleukin-6 OR IL-6）AND polymorphism AND rheumatoid arthritis。

Pubmed 檢索策略：

1.6 資料提取 由2 名研究者按照納入、排除標準獨立進行文獻篩選和資料提取，按照資料提取表格，提取內(nèi)容：作者、樣本量、年齡、RA組和對照組基因型攜帶者的數(shù)量。最后交叉核對資料，如遇分歧通過協(xié)商討論解決。

1.7 質(zhì)量評價 采用Newcastle-Ottawa Scale 文獻質(zhì)量評價表對納入的病例對照研究進行質(zhì)量評價：（1）病例的定義是否充分；（2）病例的代表性；（3）對照的選擇是否合理；（4）對照的定義是否準確；（5）對照組與病例組是否具有可比性；（6）暴露的確定是否準確；（7）病例和對照的暴露是否采用了相同的確定方法；（8）無應答率情況。由2 名研究者根據(jù)質(zhì)量標準進行評估，如遇分歧通過協(xié)商解決。

1.8 資料分析 采用Cochrane 網(wǎng)提供的Revman 5.0 軟件進行Meta 分析。采用χ2檢驗分析各研究間的異質(zhì)性（P以0.05為基準）。若存在統(tǒng)計學異質(zhì)性（P＜0.05；I2＞50%），則采用隨機效應模型進行數(shù)據(jù)合并；如無統(tǒng)計學異質(zhì)性（P＞0.05；I2＜50%），則采用固定效應模型進行Meta 分析。應用Hardy-Weinberg 遺傳平衡定律對研究的敏感性進行分析，剔除不符合的研究后對合并效應量重新估計。計算各研究等位基因和基因頻率的OR值及95%CI，繪制漏斗圖，對發(fā)表偏倚進行描述。采用Stata 11.0軟件線性回歸分析模型，檢驗漏斗圖的對稱性，評估發(fā)表偏倚。

2 結(jié) 果

2.1 文獻檢索結(jié)果 初步檢索獲得99 篇文獻，剔除重復后獲得89 篇，閱讀文題和摘要，排除綜述及非病例對照研究等文獻后獲得26 篇文獻，剔除IL-6 與RA關(guān)聯(lián)但非多態(tài)性研究的21篇文獻，排除2 篇重復發(fā)表的文獻后，最終納入3 個病例對照研究，共計700例。

2.2 納入研究的基本特征及質(zhì)量評價 納入文獻的基本特征見表1，質(zhì)量評價見表2。

2.3 Meta 分析結(jié)果 見表3。

表1 納入研究的基本特征

表2 納入研究的質(zhì)量評價

表3 IL-6 基因-174G／C 和-572C／G多態(tài)性位點與類風濕性關(guān)節(jié)炎的Meta 分析結(jié)果

2.3.1 IL-6-174G／C基因 多態(tài)性與RA發(fā)病相關(guān)性的Meta分析 對納入的3 篇文獻IL-6-174多態(tài)性位點的G等位基因的數(shù)據(jù)合并后，異質(zhì)性檢驗顯示：I2＝0，P＝0.56。因此采用固定效應模型進行處理，結(jié)果表明等位基因G與國人RA易感性存在一定的關(guān)系（OR＝0.10，95%CI＝0.04～0.21，P＜0.01），見圖1。對IL-6-174G／C 基因多態(tài)性采用隱性模型（GGvs.GC ＋CC）和顯性模型（GG ＋GCvs.CC）進行分析，結(jié)果分別為：（OR＝0.08，95%CI＝0.04～0.18，P＜0.01）和（OR＝0.28，95%CI＝0.04～1.81，P＝0.18）。表明隱性模型與國人RA發(fā)病的易感性相關(guān)，而顯性模型不表現(xiàn)出此相關(guān)性（圖2）。純合型（GGvs.CC）中：OR＝0.24，95%CI＝0.04～1.52，P＝0.13），見表3。

圖1 IL-6-174G／C 基因多態(tài)性G等位基因的Meta 分析結(jié)果

圖2 IL-6-174G／C 基因多態(tài)性隱性模型的Me t a 分析結(jié)果

2.3.2 IL-6-572C／G基因 多態(tài)性與RA發(fā) 病 相 關(guān) 性 的Meta分析 對納入研究IL-6-572 基因多態(tài)性的G等位基因異質(zhì)性檢驗顯示存在較大異質(zhì)性（I2＝86%，P＝0.01），采用隨機效應模型合并數(shù)據(jù)后顯示等位基因G與R A發(fā)病無關(guān)聯(lián)（OR＝0.63，95%CI＝0.25～1.60，P＝0.33）。對IL-6-572G／C基因多態(tài)性采用隱性模型（GGvs.GC ＋CC）和顯性模型（GG ＋GCvs.CC）進行分析，異質(zhì)性檢驗發(fā)現(xiàn)存在較大異質(zhì)性（I2＝70%，P＝0.03；I2＝69%，P＝0.04），故采用隨機效應模型進行Meta 分析。數(shù)據(jù)合并處理后表明IL-6-572G／C基因位點與國人RA發(fā)病易感性無關(guān)（OR＝0.92，95%CI＝0.19～4.52，P＝0.92 和OR＝0.45，95%CI＝0.20～1.01，P＝0.05）。純合型（GGvs.CC）模型中：OR＝0.64，95%CI＝0.16～2.48，P＝0.52，見表3。

2.3.3 不同基因型RA患者IL-6 水平的分析 1 篇研究［12］對不同基因型RA患者與血清IL-6 相關(guān)性進行了報道，結(jié)果顯示：在IL-6-174G／C 中，位點GG型和GC＋CC型患者血清IL-6 水平分別為（7.6±2.9）ng／L和（6.7±2.7）ng／L，二者差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；IL-6-572C／G位點CC型與GC＋GG型比較，RA患者血清IL-6 水平分別為：（6.9±4.5）ng／L和（16.6±5.4）ng／L，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），表明GC＋GG型患者RA的病情較CC型嚴重；由此推測，IL-6-572C／G基因多態(tài)性與RA患者病情的嚴重程度相關(guān)。

2.4 發(fā)表偏倚檢測IL-6-174G／C 多態(tài)性位點G等位基因的Begg 漏斗圖顯示P＝0.296，Egger′s 法檢驗顯示P＝0.419（圖3A）；隱性模型的Begg 法檢驗顯示P＝1.000，漏斗圖散點分布均勻，基本對稱，且都在95%可信區(qū)間內(nèi)，Egger′s 法檢驗顯示P＝0.623（圖3B）。

圖3 發(fā)表偏倚分析

3 討 論

RA是具有進展性和骨關(guān)節(jié)破壞性的全身性自身免疫疾病，其發(fā)病機制復雜，至今仍未明確。已有報道顯示，RA患者血清IL-6 水平升高，并且IL-6水平能夠反映RA的病情變化［14］。IL-6位 于 染 色 體7p21上，基 因5′端-174 G／C和-572 C／G能夠在轉(zhuǎn)錄水平調(diào)節(jié)IL-6 的表達［15-16］，具有促進T、B 淋巴細胞的增殖及分泌［17］，引起急性期炎性分泌的作用，導致RA患者軟骨及骨質(zhì)的損害［18］。Pawlik 等［19］對波蘭人群的研究表明，IL-6-174 G／C 基因多態(tài)性與RA易感性密切相關(guān)，可作為RA病情活動的標志；然而，在Arman 等［15］的研究中，IL-6基因多態(tài)性（-174、-572、-597）與土耳其人群RA易感性并不表現(xiàn)出相關(guān)性。目前，關(guān)于國人IL-6 基因多態(tài)性與RA易感性的報道并不一致，尚無明確結(jié)論表明二者之間的關(guān)系，因此有必要應用循證醫(yī)學方法，對已公開發(fā)表的文獻進行合并，以期得出更為可靠的結(jié)論。

本Meta 分析中納入的3個試驗均對IL-6-174 和-572基因位點進行了研究報道。系統(tǒng)評價中發(fā)現(xiàn)IL-6-174 多態(tài)性位點等位基因G和隱性模型（GGv s.GC ＋CC）均與國人RA易感性相關(guān)（均P＜0.01）。在對IL-6-572 多態(tài)性位點研究中，有報道顯示IL-6-572基因多態(tài)性位點等位基因G的頻率顯著低于正常組，顯性模型（GG ＋GCvs.CC）則高于正常組［10，12］，但作者對納入的數(shù)據(jù)合并后檢驗發(fā)現(xiàn)，IL-6-572基因多態(tài)性位點與國人RA易感性并不存在相關(guān)性。同時，本研究表明，IL-6基因多態(tài)性對RA患者病情的嚴重程度具有影響，但由于報道文獻較少，尚需進一步研究。

Hardy-Weinberg 平衡定律是檢驗樣本代表性情況的基本遺傳定律。作者對納入的研究進行了Hardy-Weinberg 遺傳平衡檢驗，發(fā)現(xiàn)IL-6-174 和-572基因多態(tài)性位點均符合Hardy-Weinberg 平衡定律。同時，本研究采用Begg 法和Egger′s 法評估了發(fā)表偏倚，發(fā)現(xiàn)IL-6-174G／C多態(tài)性位點無顯著偏倚，說明結(jié)果較為可靠。

Meta 分析因受到許多未知條件的影響，存在一定的局限性［20-21］。本系統(tǒng)評價的局限性是：目前關(guān)于國人IL-6 基因多態(tài)性與RA發(fā)病易感性的病例對照研究較少，本文僅納入3篇；本系統(tǒng)評價與目前報道結(jié)果尚不一致，所以使用本結(jié)論時應慎重。尚需開展更多大樣本、多中心、高質(zhì)量的病例對照試驗，對IL-6-174G／C 和IL-6-572C／G基因多態(tài)性與RA易感性進一步深入的研究，為闡明易感基因在RA發(fā)病中的作用提供依據(jù)。

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