黃淑媛等
[摘要] 目的 探討MP-DNA、MP-IgM及MP-IgG在兒童肺炎支原體感染中的動態(tài)變化情況,為患兒的診治提供依據(jù)。 方法 98例患兒均留取咽拭子和血清標本,采用實時熒光PCR檢測患兒咽拭子標本中的MP-DNA;采用顆粒凝集法檢測患兒血清中MP-IgM;采用ELISA檢測患兒血清中MP-IgG。MP-DNA陽性或MP-IgM陽性或兩者都是陽性者均確診為肺炎支原體感染病例,觀察分析確診病例在不同病程時MP-DNA、MP-IgM及MP-IgG的動態(tài)變化規(guī)律。 結(jié)果 98例患兒在就診當天MP-DAN的陽性率達76.53%,隨著病程的延長,MP-DNA陽性率逐漸下降;MP-IgM的陽性率在就診當天為36.73%,大約2周時達高峰,后緩慢下降;MP-IgG在就診當天的陽性率很低,只有3.06%,大約4周時達高峰,至第8周時仍持續(xù)高值,三者在不同病程時期的檢出陽性率差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01),且在就診當天、治療后1、2、4及8周時差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。 結(jié)論 在肺炎支原體感染患兒不同的病程時期應(yīng)動態(tài)監(jiān)測MP-DAN、MP-IgM及MP-IgG,并進行綜合分析,實現(xiàn)優(yōu)勢互補,以提高診斷的特異度和靈敏度,減少漏診和誤診,使患者得到早期正確的診斷及治療。
[關(guān)鍵詞] 肺炎支原體;兒童;動態(tài)變化
[中圖分類號] R375+.2 [文獻標識碼] A [文章編號] 1674-4721(2014)02(a)-0095-03
肺炎支原體(Mycoplasma pneumoniae,MP)是一種呼吸道感染的常見病原體,在兒童社區(qū)獲得性肺炎中,有近40%由MP引起[1-2]。隨著MP的變遷,MP已成為小兒肺炎的主要病原體,并且感染率呈上升趨勢[3-4],發(fā)病年齡也逐漸趨小。據(jù)臨床報道,應(yīng)用大環(huán)內(nèi)酯類抗生素治療MP感染的效果顯著,而β-內(nèi)酰胺類抗生素?zé)o效,故及時準確的診斷可以有效地控制病情,避免延誤MP感染的治療,避免濫用抗生素,并能降低嚴重感染患兒的死亡率,因此,早期診斷出MP感染尤為重要。本研究回顧性分析了本院收治的98例MP-DNA陽性或MP-IgM陽性或兩者均為陽性的門診及住院患兒的臨床資料,探討MP-DNA、MP-IgM及MP-IgG在兒童MP感染中的動態(tài)變化情況,為患兒的診治提供依據(jù)。
1 資料與方法
1.1 一般資料
選擇2009年1月~2013年3月以本福利中心及東莞市南城醫(yī)院98例MP-DNA陽性或MP-IgM陽性或兩者均陽性的門診及住院MP感染患兒為研究對象,年齡6個月~13歲,其中,男52,女46例。
1.2 方法
每例患兒均取就診當天、1周、2周、4周及8周的咽拭子檢測MP-DAN,并同時抽血進行MP-IgM及MP-IgG檢測;所有患兒均給予阿奇霉素(商品名:希舒美,輝瑞制藥有限公司,0.1 g/袋),10 mg/(kg·d),1次/d,用3 d停4 d,1周為1個療程,共治療4周。
1.2.1 MP-IgG的測定 采用ELISA方法,由晶美生物工程公司提供的MP-IgG抗體試劑盒,操作參照試劑盒內(nèi)說明書,標本OD值與陰性對照OD值比較,以O(shè)D值≥2.0為陽性。
1.2.2 MP-IgM的測定 采用顆粒凝集法,Sero-Dia-Myco Ⅱ試劑盒由日本Fujirebio Inc提供,血清抗體56℃滅活,操作方法按說明書進行,同時設(shè)立陽性與陰性對照孔,滴度≥80為陽性。
1.2.3 MP-DNA的測定 采用實時熒光PCR檢測患兒咽拭子標本中的MP-DNA,試劑由中山大學(xué)達安基因股份有限公司提供,儀器采用美國生物系統(tǒng)ABI-7500熒光定量PCR儀。
1.3 統(tǒng)計學(xué)方法
采用SPSS 20.0統(tǒng)計學(xué)軟件對相關(guān)數(shù)據(jù)進行分析,計數(shù)資料采用?字2檢驗,以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
2 結(jié)果
共有98例患兒入選,隨著病情的好轉(zhuǎn)及治愈,至第8周時只有75例患兒參與隨訪。就診當天患兒MP-DAN的陽性率最高,達76.53%,隨著病程的進展,MP-DNA的陽性率逐漸下降;MP-IgM的陽性率至第2周時達高峰,然后緩慢下降;MP-IgG在就診當天的陽性率很低,至第4周時達高峰,至第8周時仍持續(xù)高值。MP-DNA、MP-IgM及MP-IgG在不同病期檢出率差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01),故三者對MP感染的診斷價值高低因病程不同而異(表1,圖1)。
表1 患兒不同病程MP-DNA、MP-IgM及MP-IgG陽性率的比較[n(%)]
圖1 患兒不同病程MP-DNA、MP-IgM及MP-IgG陽性率的
動態(tài)變化情況直方圖
3 討論
MP感染在全球范圍內(nèi)均有發(fā)生,是繼細菌、病毒后,引起兒童呼吸道感染又一常見的病原,且MP感染的發(fā)病率有逐年上升趨勢,危害較大,嚴重者可引起全身炎癥反應(yīng)綜合征及心功能不全等肺外并發(fā)癥[5]。MP對β-內(nèi)酰胺酶類抗生素?zé)o效,對大環(huán)內(nèi)酯類抗生素療效顯著。因此,早期正確診斷及如何提高MP感染的診斷水平受到普遍關(guān)注。MP的分離培養(yǎng)雖然對診斷和鑒別有決定性意義,但是由于耗時較長,培養(yǎng)較困難,且檢出率低,故在臨床上很少應(yīng)用,血清特異性抗體測定是目前臨床診斷MP感染的最常用的實驗室證據(jù)[6-7]。
MP-IgM是機體受MP感染后最早出現(xiàn)的特異性抗體,于發(fā)病后1~2 d即可檢出,大部分患者在感染后1周內(nèi)出現(xiàn),少部分患兒在感染后7~10 d出現(xiàn),約2周時達到高峰,可以持續(xù)12~16周甚至更長的時間[8],IgM抗體陽性可作為早期或急性期感染的診斷指標。本研究提示,患兒MP-IgM在就診當天的陽性率為36.73%,至第2周時為79.59%,達到高峰,直至第8周時仍有較高的陽性率。MP-IgG的出現(xiàn)較晚,從病程第2周起陽性率開始增高,至第4周時達高峰,第8周時仍居高不下,基本與文獻報道一致。
國內(nèi)普遍認為,MP-IgM在感染3~7 d后出現(xiàn),比MP-IgG出現(xiàn)早,提示MP近期和當前感染,但MP-IgM陽性并不總是表示當前的感染狀態(tài),部分患者可達半年之久,在某些病例中,MP-IgM 在感染1年后仍然持續(xù)存在;另外,MP-IgM 在再次感染MP后含量極微,或者無法檢測到[9]。MP-IgM抗體的檢測受多種因素的影響。①年齡:嬰幼兒免疫系統(tǒng)尚處于發(fā)展期,發(fā)育還未完全,在MP感染后患兒抗體生成不足,影響抗體檢出陽性率;②病程:抗原刺激機體免疫應(yīng)答產(chǎn)生抗體需要一段時間,MP-IgM抗體發(fā)病1周左右時才開始上升,對于病程<1周的患兒,檢測MP-IgM抗體時容易造成漏診、誤診;③機體免疫狀態(tài):對于免疫功能低下的患兒,其免疫反應(yīng)低,IgM升高幅度很小,導(dǎo)致MP-IgM抗體的陽性率低。因此,血清MP-IgM抗體的檢測在臨床應(yīng)用中有一定的局限性[7,10],僅依賴于MP-IgM 的檢測,有可能造成誤診或漏診。而IgG較IgM出現(xiàn)晚,在體內(nèi)持續(xù)時間較長,可以作為回顧性診斷和亞急性感染狀態(tài)的指標,進行病原學(xué)追蹤。故需結(jié)合MP-DNA和MP-IgG以減少漏診和誤診,并進行病原學(xué)追蹤。
與MP-IgM相比,MP-DNA陽性率在發(fā)病初期就很高,且不受病程是否達到高峰及感染程度的影響,而產(chǎn)生抗體需要一定時間[11]。尚曉云[12]發(fā)現(xiàn),不少經(jīng)臨床及實時定量PCR確診的MP感染患兒,僅在出院前的最后1次MP-IgM檢測才出現(xiàn)陽性,有些病后1周MP-IgM為陰性的MP感染患兒,其病情可能較陽性者嚴重。如果研究者只選擇MP-IgM陽性的患兒,就有可能可能忽略了即將進展為重癥臨床表現(xiàn)的患兒[13]。因此,在發(fā)病初期MP-DNA對MP感染患兒具有很高的診斷價值,可以作為MP感染的早期診斷指標。MP-DNA在發(fā)病初期的陽性率較高,隨著治療和病情的轉(zhuǎn)歸,陽性率迅速下降轉(zhuǎn)陰,表明MP-DNA可以直觀地反映MP在體內(nèi)感染和復(fù)制的情況。通過觀察MP-DNA動態(tài)變化,可以為臨床動態(tài)觀察治療效果提供依據(jù)[14],故應(yīng)聯(lián)合動態(tài)監(jiān)測MP-DNA和MP-IgM來減少漏診和誤診的發(fā)生。本研究通過觀察MP-DNA在不同病程的動態(tài)變化,發(fā)現(xiàn)患兒的MP-DNA隨著病程的延長和康復(fù)好轉(zhuǎn)其陽性率逐漸下降,表明MP-DNA可以直觀地反映MP在體內(nèi)的感染和復(fù)制情況,可以為臨床動態(tài)觀察治療效果提供依據(jù),可用于患兒病情轉(zhuǎn)歸的預(yù)測評估。
綜上所述,臨床中遇到懷疑為MP感染的患兒時最好同時檢測MP-DNA、MP-IgM及MP-IgG,以提高診斷的特異度和靈敏度,減少漏診和誤診的發(fā)生,使患者得到早期正確的診斷及治療,而動態(tài)檢測MP-DNA、MP-IgM及MP-IgG,既可在診斷中優(yōu)勢互補,又可了解疾病的病程及轉(zhuǎn)歸情況,為臨床診斷治療提供參考。
[參考文獻]
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[11] 張曉波,陸愛珍.肺炎支原體熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)在肺炎支原體感染中的診斷評價[J].中華兒科雜志,2008, 46(6):442-444.
[12] 尚曉云.兒童肺炎支原體感染的相關(guān)臨床問題[J].中國小兒急救醫(yī)學(xué),2010,17(5):385-389.
[13] Lee KY.Pediatric Respiratory infections by Mycoplasm pneumoniae[J].Expea Rev Anti Infect Ther,2008,6(4):509-521.
[14] Kashyap B,Kumar S,Sethi GR,et al.Comparison of PCR,culture & serological tests for the diagnosis of Mycoplasma pneumoniae in counity acquired lower respiratory tract infections in children[J].Indian J Med Res,2008, 128(2):134-139.
(收稿日期:2013-11-26 本文編輯:袁 成)
國內(nèi)普遍認為,MP-IgM在感染3~7 d后出現(xiàn),比MP-IgG出現(xiàn)早,提示MP近期和當前感染,但MP-IgM陽性并不總是表示當前的感染狀態(tài),部分患者可達半年之久,在某些病例中,MP-IgM 在感染1年后仍然持續(xù)存在;另外,MP-IgM 在再次感染MP后含量極微,或者無法檢測到[9]。MP-IgM抗體的檢測受多種因素的影響。①年齡:嬰幼兒免疫系統(tǒng)尚處于發(fā)展期,發(fā)育還未完全,在MP感染后患兒抗體生成不足,影響抗體檢出陽性率;②病程:抗原刺激機體免疫應(yīng)答產(chǎn)生抗體需要一段時間,MP-IgM抗體發(fā)病1周左右時才開始上升,對于病程<1周的患兒,檢測MP-IgM抗體時容易造成漏診、誤診;③機體免疫狀態(tài):對于免疫功能低下的患兒,其免疫反應(yīng)低,IgM升高幅度很小,導(dǎo)致MP-IgM抗體的陽性率低。因此,血清MP-IgM抗體的檢測在臨床應(yīng)用中有一定的局限性[7,10],僅依賴于MP-IgM 的檢測,有可能造成誤診或漏診。而IgG較IgM出現(xiàn)晚,在體內(nèi)持續(xù)時間較長,可以作為回顧性診斷和亞急性感染狀態(tài)的指標,進行病原學(xué)追蹤。故需結(jié)合MP-DNA和MP-IgG以減少漏診和誤診,并進行病原學(xué)追蹤。
與MP-IgM相比,MP-DNA陽性率在發(fā)病初期就很高,且不受病程是否達到高峰及感染程度的影響,而產(chǎn)生抗體需要一定時間[11]。尚曉云[12]發(fā)現(xiàn),不少經(jīng)臨床及實時定量PCR確診的MP感染患兒,僅在出院前的最后1次MP-IgM檢測才出現(xiàn)陽性,有些病后1周MP-IgM為陰性的MP感染患兒,其病情可能較陽性者嚴重。如果研究者只選擇MP-IgM陽性的患兒,就有可能可能忽略了即將進展為重癥臨床表現(xiàn)的患兒[13]。因此,在發(fā)病初期MP-DNA對MP感染患兒具有很高的診斷價值,可以作為MP感染的早期診斷指標。MP-DNA在發(fā)病初期的陽性率較高,隨著治療和病情的轉(zhuǎn)歸,陽性率迅速下降轉(zhuǎn)陰,表明MP-DNA可以直觀地反映MP在體內(nèi)感染和復(fù)制的情況。通過觀察MP-DNA動態(tài)變化,可以為臨床動態(tài)觀察治療效果提供依據(jù)[14],故應(yīng)聯(lián)合動態(tài)監(jiān)測MP-DNA和MP-IgM來減少漏診和誤診的發(fā)生。本研究通過觀察MP-DNA在不同病程的動態(tài)變化,發(fā)現(xiàn)患兒的MP-DNA隨著病程的延長和康復(fù)好轉(zhuǎn)其陽性率逐漸下降,表明MP-DNA可以直觀地反映MP在體內(nèi)的感染和復(fù)制情況,可以為臨床動態(tài)觀察治療效果提供依據(jù),可用于患兒病情轉(zhuǎn)歸的預(yù)測評估。
綜上所述,臨床中遇到懷疑為MP感染的患兒時最好同時檢測MP-DNA、MP-IgM及MP-IgG,以提高診斷的特異度和靈敏度,減少漏診和誤診的發(fā)生,使患者得到早期正確的診斷及治療,而動態(tài)檢測MP-DNA、MP-IgM及MP-IgG,既可在診斷中優(yōu)勢互補,又可了解疾病的病程及轉(zhuǎn)歸情況,為臨床診斷治療提供參考。
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(收稿日期:2013-11-26 本文編輯:袁 成)
國內(nèi)普遍認為,MP-IgM在感染3~7 d后出現(xiàn),比MP-IgG出現(xiàn)早,提示MP近期和當前感染,但MP-IgM陽性并不總是表示當前的感染狀態(tài),部分患者可達半年之久,在某些病例中,MP-IgM 在感染1年后仍然持續(xù)存在;另外,MP-IgM 在再次感染MP后含量極微,或者無法檢測到[9]。MP-IgM抗體的檢測受多種因素的影響。①年齡:嬰幼兒免疫系統(tǒng)尚處于發(fā)展期,發(fā)育還未完全,在MP感染后患兒抗體生成不足,影響抗體檢出陽性率;②病程:抗原刺激機體免疫應(yīng)答產(chǎn)生抗體需要一段時間,MP-IgM抗體發(fā)病1周左右時才開始上升,對于病程<1周的患兒,檢測MP-IgM抗體時容易造成漏診、誤診;③機體免疫狀態(tài):對于免疫功能低下的患兒,其免疫反應(yīng)低,IgM升高幅度很小,導(dǎo)致MP-IgM抗體的陽性率低。因此,血清MP-IgM抗體的檢測在臨床應(yīng)用中有一定的局限性[7,10],僅依賴于MP-IgM 的檢測,有可能造成誤診或漏診。而IgG較IgM出現(xiàn)晚,在體內(nèi)持續(xù)時間較長,可以作為回顧性診斷和亞急性感染狀態(tài)的指標,進行病原學(xué)追蹤。故需結(jié)合MP-DNA和MP-IgG以減少漏診和誤診,并進行病原學(xué)追蹤。
與MP-IgM相比,MP-DNA陽性率在發(fā)病初期就很高,且不受病程是否達到高峰及感染程度的影響,而產(chǎn)生抗體需要一定時間[11]。尚曉云[12]發(fā)現(xiàn),不少經(jīng)臨床及實時定量PCR確診的MP感染患兒,僅在出院前的最后1次MP-IgM檢測才出現(xiàn)陽性,有些病后1周MP-IgM為陰性的MP感染患兒,其病情可能較陽性者嚴重。如果研究者只選擇MP-IgM陽性的患兒,就有可能可能忽略了即將進展為重癥臨床表現(xiàn)的患兒[13]。因此,在發(fā)病初期MP-DNA對MP感染患兒具有很高的診斷價值,可以作為MP感染的早期診斷指標。MP-DNA在發(fā)病初期的陽性率較高,隨著治療和病情的轉(zhuǎn)歸,陽性率迅速下降轉(zhuǎn)陰,表明MP-DNA可以直觀地反映MP在體內(nèi)感染和復(fù)制的情況。通過觀察MP-DNA動態(tài)變化,可以為臨床動態(tài)觀察治療效果提供依據(jù)[14],故應(yīng)聯(lián)合動態(tài)監(jiān)測MP-DNA和MP-IgM來減少漏診和誤診的發(fā)生。本研究通過觀察MP-DNA在不同病程的動態(tài)變化,發(fā)現(xiàn)患兒的MP-DNA隨著病程的延長和康復(fù)好轉(zhuǎn)其陽性率逐漸下降,表明MP-DNA可以直觀地反映MP在體內(nèi)的感染和復(fù)制情況,可以為臨床動態(tài)觀察治療效果提供依據(jù),可用于患兒病情轉(zhuǎn)歸的預(yù)測評估。
綜上所述,臨床中遇到懷疑為MP感染的患兒時最好同時檢測MP-DNA、MP-IgM及MP-IgG,以提高診斷的特異度和靈敏度,減少漏診和誤診的發(fā)生,使患者得到早期正確的診斷及治療,而動態(tài)檢測MP-DNA、MP-IgM及MP-IgG,既可在診斷中優(yōu)勢互補,又可了解疾病的病程及轉(zhuǎn)歸情況,為臨床診斷治療提供參考。
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(收稿日期:2013-11-26 本文編輯:袁 成)