雙花露純天然植物飲料成分分析

唐 清，王森弘，李燕君，楊 盛，徐曉玉

（西南大學(xué)藥學(xué)院/中醫(yī)藥學(xué)院，西南大學(xué)中藥研究所，重慶市藥效評(píng)價(jià)工程技術(shù)研究中心，重慶市銀花工程技術(shù)研究中心，重慶400716）

雙花露純天然植物飲料成分分析

唐 清，王森弘，李燕君，楊 盛，徐曉玉*

（西南大學(xué)藥學(xué)院/中醫(yī)藥學(xué)院，西南大學(xué)中藥研究所，重慶市藥效評(píng)價(jià)工程技術(shù)研究中心，重慶市銀花工程技術(shù)研究中心，重慶400716）

對(duì)雙花露純天然植物飲料中所含藥用有效成分及營(yíng)養(yǎng)成分的含量進(jìn)行了檢測(cè)。RP-HPLC法、紫外分光光度法、氨基酸自動(dòng)分析儀法和原子吸收光譜法分別用于檢測(cè)綠原酸、總黃酮、氨基酸和礦質(zhì)元素的含量。結(jié)果表明：雙花露純天然植物飲料中所含綠原酸含量為301.61μg/mL，總黃酮含量為2.93mg/mL，氨基酸總含量為2.607mg/100mL，礦質(zhì)元素Fe、Ca、K、Na、Mg、Zn的含量分別為2.65、4.66、119.55、101.47、11.36、0.52μg/mL。雙花露純天然植物飲料含有豐富的藥用有效成分及營(yíng)養(yǎng)成分，值得進(jìn)一步推廣。

雙花露純天然植物飲料，綠原酸，總黃酮，氨基酸，礦質(zhì)元素

雙花露純天然植物飲料為西南大學(xué)藥學(xué)院研發(fā)的一款純天然植物飲品，其主要原料為秀山銀花與杭白菊。

秀山銀花產(chǎn)于重慶秀山縣，主要品種為灰氈毛忍冬。2005年版《中國(guó)藥典》（一部）首次將灰氈毛忍冬歸類為山銀花，并對(duì)其作了詳細(xì)的描述[1]，其氣清香，味微苦甘，性味歸經(jīng)、功能主治等均與忍冬一致。經(jīng)馮彬彬等[2]測(cè)定，秀山銀花所含有效成分綠原酸的含量高達(dá)9.03%，比山東平邑（4.08%）和河南封丘（3.79%）等地所產(chǎn)金銀花的綠原酸含量均高出很多。杭白菊為菊科多年生草本植物，盛產(chǎn)于浙江桐鄉(xiāng)市、海寧市，其花瓣潔白如玉，花蕊黃如純金，古時(shí)曾作貢品，素有“千葉玉玲瓏”的美名。杭白菊不僅具有很高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，而且具有很高的藥用功效，含有揮發(fā)油、總黃酮、綠原酸等有效成分，常飲能散風(fēng)清熱、平肝明目、消疲怡神[3]?，F(xiàn)代藥理研究表明，杭白菊具有抗氧化[4]、保護(hù)心血管[5]、降血脂[6]、抗菌消炎[7]及抗腫瘤[8]等作用。

雙花露純天然植物飲料含有多種藥用有效成分及營(yíng)養(yǎng)成分。本文主要測(cè)定雙花露純天然植物飲料中所含綠原酸、總黃酮、氨基酸、礦質(zhì)元素等成分的含量，為雙花露純天然植物飲料的進(jìn)一步推廣提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

雙花露 重慶秀滄生態(tài)農(nóng)業(yè)開發(fā)有限公司，批號(hào)：20130424A，食品生產(chǎn)許可證號(hào)：QS501506010093，規(guī)格：248mL；綠原酸對(duì)照品 中國(guó)藥品生物制品檢定所，純度96.6%；蘆丁對(duì)照品 中國(guó)藥品生物制品檢定所，純度92.5%；氫氧化鈉、亞硝酸鈉、硝酸鋁、乙醇、氫氧化鉀、無(wú)水乙醇、硝酸、高氯酸、硫酸、硫代硫酸鈉、石油醚、乙醚等 成都科龍化工廠，分析純。

1200型高效液相色譜儀 帶紫外檢測(cè)器，美國(guó)Agilent technologies；L-8800型全自動(dòng)氨基酸分析、U-3010型儀紫外可見(jiàn)分光光度計(jì) 日本HITACHI公司；TAS-990型原子吸收分光光度計(jì) 北京普析通用儀器有限責(zé)任公司；超聲波清洗器、萬(wàn)分之一電子天平、pH計(jì)、EL2046型電子天平 梅特勒-托利多儀器有限公司。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 綠原酸含量檢測(cè)

1.2.1.1 對(duì)照品溶液的制備 精密稱取綠原酸對(duì)照品0.0710g，置于100mL容量瓶中，加50%甲醇溶解并定容，搖勻，即得濃度為710μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)品貯備液。

1.2.1.2 樣品溶液的制備 準(zhǔn)確量取5mL飲料樣品于蒸發(fā)皿中，80℃恒溫水浴鍋上蒸干，用50%的甲醇溶解并定容至25mL容量瓶中，過(guò)濾，得到樣品溶液。

1.2.1.3 色譜條件 platisil ODS色譜柱（250mm× 4.6mm，5μm）；以0.2%H3PO4∶乙腈=87∶13為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)326nm；進(jìn)樣量20μL；流速為1.0mL/min；柱溫25℃。

1.2.1.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 精密吸取濃度為710μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)品母液配制成以下5個(gè)濃度：71.0、42.6、28.4、14.2、7.1μg/mL，用0.22μm微孔濾膜過(guò)濾后，置于樣品瓶中，按照上述色譜條件進(jìn)行HPLC測(cè)定，作峰面積對(duì)濃度的標(biāo)準(zhǔn)曲線，求出線性回歸方程。

1.2.1.5 樣品分析 在相同的色譜條件下，將樣品溶液注入液相色譜儀中進(jìn)行HPLC測(cè)定，采用外標(biāo)法進(jìn)行定量[9]。

1.2.2 總黃酮含量檢測(cè)

1.2.2.1 對(duì)照品溶液的制備 稱取0.2000g干燥至恒重的無(wú)水蘆丁，置于100mL容量瓶中，用50%甲醇溶液溶解并定容至刻度，搖勻，得2.00mg/mL標(biāo)準(zhǔn)貯備溶液。吸取10.00mL蘆丁標(biāo)準(zhǔn)貯備溶液于100mL容量瓶中，用50%甲醇定容至刻度，得到0.2mg/mL的蘆丁對(duì)照品溶液[10]。

1.2.2.2 樣品溶液的制備 準(zhǔn)確量取5mL飲料樣品，置于蒸發(fā)皿中，80℃恒溫水浴鍋上蒸干，用50%甲醇溶解并定容至25mL容量瓶中，過(guò)濾，得到樣品溶液。

1.2.2.3 顯色方法及檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇 精密吸取蘆丁對(duì)照品溶液及樣品溶液各2mL置于25mL容量瓶中，補(bǔ)水至約10mL，以空白試劑為對(duì)照，加1.0mL 50g/L亞硝酸鈉溶液，搖勻，放置6min，加1.0mL 100g/L硝酸鋁溶液，搖勻，放置6min，加4.0mL 200g/L氫氧化鈉溶液，再加水至刻度，搖勻，放置15min。用1cm比色皿，400～800nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)進(jìn)行掃描，選取最大吸收波長(zhǎng)為檢測(cè)波長(zhǎng)。

1.2.2.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 精密吸取蘆丁對(duì)照品溶液1.00、2.00、3.00、4.00、5.00、9.00mL置于25.00mL容量瓶中。按“1.2.2.3”中方法，以相應(yīng)試劑作空白，分別在最大吸收波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度。以吸光度（A）為縱坐標(biāo)（Y），以蘆丁濃度（mg/mL）為橫坐標(biāo)（X），繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

1.2.2.5 樣品分析 精密吸取2mL樣品溶液，按“1.2.2.3”中方法，以相應(yīng)試劑作空白，在最大吸收波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程計(jì)算樣品的總黃酮含量（以蘆丁計(jì)）。

1.2.3 氨基酸的檢測(cè)

1.2.3.1 樣品處理 準(zhǔn)確量取飲料樣品250mL置于圓底燒瓶中，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀減壓濃縮至50mL。取5mL濃縮液置于50mL燒杯中，加入0.2mL 4%磺基水楊酸溶液振蕩搖勻，用0.22μm濾膜過(guò)濾，備用[11]。

1.2.3.2 分析條件 一個(gè)樣品分析周期53min，儀器設(shè)有分離柱和反應(yīng)柱，即a.分離柱（4.6mm×60mm）：柱溫700℃、柱壓10.678MPa、洗脫液以0.4mL/min流速流經(jīng)此柱；b.反應(yīng)柱：柱溫1350℃、柱壓0.982MPa、茚三酮及茚三酮緩沖液以0.35mL/min流速流經(jīng)此柱。

1.2.4 礦質(zhì)元素分析

1.2.4.1 樣品處理 稱取飲料樣品5.0g，置于50mL錐形瓶中。加入消化液10mL（硝酸∶高氯酸=4∶1），混勻，150℃油浴加熱消化至澄清透明。放冷，用5%硝酸溶液洗滌錐形瓶，洗液轉(zhuǎn)入25mL容量瓶中，稀釋至刻度[12]，備用。

1.2.4.2 分析條件 按原子吸收光譜法測(cè)定Fe、Na、Ca、K、Mg、Zn的含量。原子吸收光譜檢測(cè)條件見(jiàn)表1。

表1 原子吸收光譜儀工作條件Table.1 Working conditions of AAS assay

2 結(jié)果與分析

2.1 綠原酸的含量測(cè)定結(jié)果

2.1.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線 以對(duì)照品濃度為橫坐標(biāo)（x），色譜峰面積為縱坐標(biāo)作圖（y），得到線性回歸方程為：y= 5.2065x-5.5733，r=0.9999。表明綠原酸濃度在7.1～71.0μg/mL范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。

2.1.2 精密度實(shí)驗(yàn) 取對(duì)照品溶液適量，重復(fù)進(jìn)樣6次，測(cè)定綠原酸的含量。計(jì)算得相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）＝0.039%，表明儀器精密度良好。

2.1.3 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn) 取同一供試品溶液適量，分別于0、2、4、6、8、12、24h進(jìn)樣，測(cè)定綠原酸的含量。結(jié)果見(jiàn)表2，RSD＝1.31%，表明供試品溶液在24h內(nèi)穩(wěn)定。

2.1.4 重復(fù)性實(shí)驗(yàn) 精密量取同一批樣品，共6份，每份約5mL，分別按“1.2.1.2”項(xiàng)下方法制備樣品溶液，測(cè)定綠原酸的含量。結(jié)果見(jiàn)表3，RSD＝1.01%，表明方法重復(fù)性良好。

2.1.5 加樣回收率實(shí)驗(yàn) 量取9份已知含量的樣品5mL，分別加入對(duì)照品3個(gè)濃度梯度共9份，按“1.2.1.2”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，按上述色譜條件測(cè)定，計(jì)算加樣回收率，結(jié)果見(jiàn)表4。

2.1.6 樣品含量的測(cè)定 取3批樣品（批號(hào)：20130423、20130424、20130510）各5mL，分別按“1.2.1.2”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，取20μL進(jìn)樣，按上述色譜條件測(cè)定峰面積，計(jì)算含量。結(jié)果顯示，3批樣品中綠原酸的含量分別為290.15、305.23、309.44μg/mL，平均含量為301.61μg/mL。

表2 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)結(jié)果（，n=3）Table.2 Stability test results（，n=3）

表2 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)結(jié)果（，n=3）Table.2 Stability test results（，n=3）

時(shí)間（h） 0 2 4 6 8 12 24 RSD（%）綠原酸含量（μg/mL） 305.27±0.72 304.79±0.29 304.50±0.77 304.21±0.58 303.35±1.44 302.29±0.60 301.81±0.48 1.31

表3 重復(fù)性實(shí)驗(yàn)結(jié)果（，n=3）Table.3 Reproducibility test results（，n=3）

表3 重復(fù)性實(shí)驗(yàn)結(jié)果（，n=3）Table.3 Reproducibility test results（，n=3）

編號(hào) 1 2 3 4 5 6 RSD（%）綠原酸含量（μg/mL） 305.74±0.93 304.05±0.38 306.23±0.77 306.90±0.67 304.88±1.34 305.17±1.06 1.01

表4 加樣回收率實(shí)驗(yàn)結(jié)果（，n=3）Table.4 Recovery test results（，n=3）

表4 加樣回收率實(shí)驗(yàn)結(jié)果（，n=3）Table.4 Recovery test results（，n=3）

編號(hào) 1 2 3 4 5 6 7 8 9RSD（%）回收率（%） 96.7±0.3 95.3±0.4 102.4±0.6 99.3±0.2 100.2±0.1 103.4±0.4 107.8±0.8 104.4±0.6 109.2±0.4 4.7

圖1為綠原酸含量測(cè)定液相色譜圖，在流動(dòng)相為0.2%H3PO4∶乙腈=87∶13時(shí)，樣品中的綠原酸達(dá)到很好的分離效果。

圖1 綠原酸含量測(cè)定色譜圖Fig.1 HPLC chromatogram of chlorogenic acid

2.2 總黃酮的含量測(cè)定結(jié)果

2.2.1 最大檢測(cè)波長(zhǎng)的確定及標(biāo)準(zhǔn)曲線線性關(guān)系考察 紫外掃描結(jié)果顯示（圖2），在510nm處蘆丁對(duì)照品有最大吸收，且該波長(zhǎng)處樣品也有較強(qiáng)吸收，故確定檢測(cè)波長(zhǎng)為510nm。經(jīng)線性回歸表明，蘆丁濃度在8～72μg/mL范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系?；貧w方程為：y=0.0121x+0.0021，r=0.9999。

圖2 總黃酮UV掃描圖譜Fig.2 UV graphs of total flavonoids

2.2.2 精密度實(shí)驗(yàn) 精密量取蘆丁標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照品溶液6份，置于10mL試管中，參照“1.2.2.3”中方法，在510nm處測(cè)定吸光度，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程計(jì)算各份總黃酮含量。結(jié)果RSD=0.22%，表明儀器精密度良好。

2.2.3 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn) 精密量取樣品溶液適量，參照“1.2.2.3”中方法操作，顯色后不同時(shí)間測(cè)定其吸光度變化，即放置5、10、15、30、45、60、90、120、150min后，分別測(cè)定其吸光度，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程計(jì)算總黃酮含量。結(jié)果見(jiàn)表5，RSD=1.22%，表明方法穩(wěn)定性較好。

2.2.4 重復(fù)性實(shí)驗(yàn) 精密量取同一批號(hào)飲料樣品6份，每份約5mL，照樣品溶液制備方法制備。精密吸取各樣品溶液適量，參照“1.2.2.3”方法操作，在510nm處測(cè)定吸光度，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程計(jì)算各份總黃酮含量。結(jié)果見(jiàn)表6，RSD=1.22%，表明方法重復(fù)性良好。

表5 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)結(jié)果（，n=3）Table.5 Stability test results（，n=3）

表5 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)結(jié)果（，n=3）Table.5 Stability test results（，n=3）

時(shí)間（min） 0 5 10 15 30 45 60 90 120 150 RSD（%）總黃酮含量（mg/mL） 2.91±0.01 2.91±0.01 2.90±0.01 2.89±0.00 2.88±0.01 2.87±0.01 2.86±0.01 2.85±0.00 2.82±0.01 2.80±0.01 1.22

表6 重復(fù)性實(shí)驗(yàn)結(jié)果（，n=3）Table.6 Reproducibility test results（，n=3）

表6 重復(fù)性實(shí)驗(yàn)結(jié)果（，n=3）Table.6 Reproducibility test results（，n=3）

編號(hào) 1 2 3 4 5 6 RSD（%）總黃酮含量（mg/mL） 2.77±0.01 2.76±0.00 2.80±0.01 2.85±0.01 2.79±0.01 2.84±0.00 1.01

表7 加樣回收率實(shí)驗(yàn)結(jié)果（，n=3）Table.7 Recovery test results（，n=3）

表7 加樣回收率實(shí)驗(yàn)結(jié)果（，n=3）Table.7 Recovery test results（，n=3）

編號(hào) 1 2 3 4 5 6 7 8 9RSD（%）回收率（%） 102.4±0.4 103.2±0.2 102.4±0.4 101.7±0.7 101.7±0.2 105.4±0.3 103.2±0.0 103±0.2 103.2±0.2 1.1

2.2.5 加樣回收率實(shí)驗(yàn) 精密量取已知總黃酮含量飲料樣品9份，每份約5mL，置于25mL的量瓶中，再按80%、80%、80%、100%、100%、100%、120%、120%、120%加入蘆丁對(duì)照品，各份均照樣品溶液制備方法制備。精密吸取各樣品溶液適量，參照“1.2.2.3”中方法操作，在510nm處測(cè)定吸光度。計(jì)算加樣回收率，結(jié)果見(jiàn)表7。

2.2.6 樣品含量的測(cè)定 取3批樣品（批號(hào)：20130423、20130424、20130510）各5mL，按“1.2.2.2”中方法處理樣品，按“1.2.2.3”中的方法檢測(cè)各個(gè)樣品的吸光度值，計(jì)算其總黃酮含量。結(jié)果顯示：3批樣品分別為2.81、3.01、2.96mg/mL，平均含量為2.93mg/mL。

2.3 氨基酸檢測(cè)結(jié)果

利用氨基酸自動(dòng)分析儀共檢測(cè)了17種氨基酸，檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表8。其中脯氨酸、谷氨酸、蘇氨酸、天冬氨酸、絲氨酸、丙氨酸及苯丙氨酸含量較為豐富，均高于0.1mg/mL。圖3為氨基酸的分離圖譜，各氨基酸分離良好。

表8 氨基酸檢測(cè)結(jié)果（n=3）Table.8 Detection result of amino acids（n=3）

2.4 礦質(zhì)元素分析結(jié)果

利用原子吸收光譜法共檢測(cè)了6種礦質(zhì)元素的含量，檢測(cè)結(jié)果如表9所示。其中K、Na、Ca、Mg四種元素為常量元素，含量較高，而Fe和Zn為微量元素，含量相對(duì)較低。

圖3 雙花露中各氨基酸的分離圖譜Fig.3 Chromatogram of each amino acid in Shuang Hua Botanical Beverage

表9 礦質(zhì)元素含量測(cè)定結(jié)果（n=3）Table.9 Content of mineral elements（n=3）

3 結(jié)論與討論

綠原酸是秀山銀花中的主要藥效物質(zhì)之一，具有多種生物藥理活性[13]。如抗菌、抗病毒、增高白血球、保肝利膽、抗腫瘤、降血壓、降血脂、清除自由基等。黃酮類化合物是植物中分布最廣泛的一類物質(zhì)，它們常以游離態(tài)或與糖結(jié)合成苷的形式存在[14]。黃酮類化合物不僅具有較強(qiáng)的天然抗氧化性，而且具有強(qiáng)有力的自由基清除性。此外，黃酮類化合物還被證實(shí)有較強(qiáng)的生物活性，如預(yù)防心血管疾病、抗衰老、抗菌、抗病毒、防癌抗癌、調(diào)節(jié)免疫等[15]。檢測(cè)結(jié)果顯示雙花露純天然植物飲料中綠原酸含量為301.61μg/mL，總黃酮含量為2.93mg/mL，濃度均較高，是該飲料中主要的功能性物質(zhì)。

氨基酸與礦質(zhì)元素均為雙花露純天然植物飲料中重要的營(yíng)養(yǎng)成分。氨基酸組成和含量是評(píng)價(jià)蛋白質(zhì)量的重要指標(biāo)[16]。雙花露純天然植物飲料中氨基酸總類齊全，共檢測(cè)出17種常見(jiàn)氨基酸成分，其總含量為2.607mg/100mL。其中含有蘇氨酸、賴氨酸、纈氨酸等體必需的氨基酸7種（因方法原因，本文未檢測(cè)出另一種人體必需氨基酸色氨酸），非必需氨基酸10種，人體必需的氨基酸占到氨基酸總量的24.1%。其中，天冬氨酸、谷氨酸是呈鮮味的特征氨基酸，丙氨酸、甘氨酸、脯氨酸是呈甘味的特征氨基酸[17]，這些氨基酸的存在為雙花露純天然植物飲料的良好口感提供了一定基礎(chǔ)。另外，礦質(zhì)元素與人體的健康有著密切的聯(lián)系，許多元素都有著重要的生理功能[18]。如鐵是人體必需的微量元素之一，它能與血紅蛋白結(jié)合，參與氧的運(yùn)輸。鈉是人體中一種重要無(wú)機(jī)元素，參與水的代謝，保證體內(nèi)水的平衡，調(diào)節(jié)體內(nèi)水分與滲透壓，并對(duì)維持神經(jīng)、肌肉的正常功能起作用。而鉀是構(gòu)成人體生理必需的化學(xué)元素，參與細(xì)胞內(nèi)糖和蛋白質(zhì)的代謝，與鈣、氯等離子一起維持神經(jīng)、肌肉的正常興奮性，并且還能協(xié)調(diào)正常心肌的舒張和收縮運(yùn)動(dòng)[19]。雙花露純天然植物飲料中檢測(cè)出了豐富的鐵、鈣、鈉、鉀等礦質(zhì)元素，其中鈉和鉀元素的含量最高，分別為101.47μg/mL和119.55μg/mL。

本研究證明，雙花露純天然植物飲料中含有豐富的藥用有效成分及營(yíng)養(yǎng)成分，值得進(jìn)一步開發(fā)推廣。

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Component analysis of Shuang Hua botanical beverage

TANG Qing，WANG Sen-hong，LI Yan-jun，YANG Sheng，XU Xiao-yu*
（College of Pharmaceutical Sciences&College of Traditional Chinese Medicine，Southwest University，Institute of Chinese Medicine，Southwest University，Chongqing Engineering Research Center for Pharmacological Evaluation；Chongqing Engineering Research Center for Flos Lonicerae，Chongqing 400716，China）

The medicinal component and nutrient content of Shuang Hua botanical beverage was detected.RPHPLC，Ultraviolet spectrophotometer，Automatic amino acid analyzer and Atomic absorption spectrophotometry were used to detect contents of chlorogenic acid，total flavonoids，amino acids and mineral elements，respectively.The result showed that the content of chlorogenic acid in Shuang Hua botanical beverage was 301.61μg/mL，total flavonoids was 2.93mg/mL，total amino acid content was 2.607mg/100mL.The mineral content of Fe，Ca，K，Na，Mg and Zn were 2.65，4.66，119.55，101.47，11.36 and 0.52μg/mL，respectively.Shuang Hua botanical beverage contained affluent medicinal components and nutrients.It was worthy of further development and utilization.

Shuang Hua botanical beverage；chlorogenic acid；total flavonoids；amino acid；mineral element

TS275.4

A

1002-0306（2014）04-0346-05

2013－07－31 *通訊聯(lián)系人

唐清（1989-），女，碩士研究生，研究方向：藥物分析。

國(guó)家科技支撐計(jì)劃課題（2006BAC01A16）子課題；2013年重慶高校創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)建設(shè)計(jì)劃資助項(xiàng)目；秀山縣人民政府資助項(xiàng)目（XS20120610）。