Tiam1和nm23H1在胃癌中的表達

姚 樂* 李 梅安 毅

(1 陜西省榆林市第一醫(yī)院消化內(nèi)科，陜西 榆林 719000；2 陜西省腫瘤醫(yī)院腫瘤介入科，陜西 西安 710061)

Tiam1和nm23H1在胃癌中的表達

姚 樂1* 李 梅2安 毅1

(1 陜西省榆林市第一醫(yī)院消化內(nèi)科，陜西 榆林 719000；2 陜西省腫瘤醫(yī)院腫瘤介入科，陜西 西安 710061)

目的探討Tiam1和nm23H1與胃癌發(fā)生、發(fā)展過程中的相關(guān)性，從而有助于進一步探討胃癌侵襲與轉(zhuǎn)移的分子機制。方法收集胃癌標本60例，用免疫組化Max-Vision法測定Tiam1和nm23H1蛋白的表達。結(jié)果胃癌臨床病理學特征與Tiam1和nm23H1表達的關(guān)系：①Tiam1蛋白在胃癌組織中的表達水平與胃癌組織的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、分化程度以及浸潤深度，存在顯著相關(guān)性，組間比較差異具有顯著性（P＜0.05）。②nm23H1蛋白在胃癌組織中的表達水平與胃癌組織的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、浸潤深度以及分化程度存在明顯相關(guān)性，組間比較差異具有顯著性（P＜0.05）。③Tiam1與nm23H1蛋白表達呈負相關(guān)。結(jié)論①Tiam1在胃癌組織中的表達隨著胃癌組織的病理分化程度的降低，淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移，浸潤深度的加深而明顯增高。②nm23H1在胃癌組織表達較低，與胃癌的浸潤程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及病理分化程度有關(guān)。

胃癌；T淋巴瘤侵襲轉(zhuǎn)移誘導因1；nm23H1

胃癌仍然是全世界最常見的惡性腫瘤。近年來發(fā)現(xiàn)腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)基因T細胞淋巴瘤侵襲轉(zhuǎn)移誘導因子1（Tiam1）在多種腫瘤細胞中異常高表達，nm23H1蛋白在正常組織發(fā)育中起正調(diào)控作用，是調(diào)控細胞增殖的因子。在腫瘤轉(zhuǎn)移過程中起到負調(diào)控作用的代表基因，在多種惡性腫瘤的發(fā)生過程中nm23H1基因有缺失的現(xiàn)象。

1 材料與方法

1.1 一般資料：收集延安大學醫(yī)學院病理教研室2007年1月至2010年10月間存檔的病理組織蠟塊，均經(jīng)有經(jīng)驗的病理醫(yī)師確診，術(shù)前均未經(jīng)放療、化療。入選病例60例，年齡最小30歲，最大81歲，其中男性患者32例，女性18例。

1.2 主要試劑及實驗儀器：①即用型鼠抗人Tiam1單克隆抗體、鼠抗人nm23H1單克隆抗體、免疫組化MaxVision試劑盒及DAB顯色試劑盒，均購自福州邁新生物技術(shù)有限公司。②蘇木素、無水酒精、中性樹膠等由延安大學醫(yī)學院實驗中心實驗室提供。③DNP-9162型恒溫培養(yǎng)箱 （上海精宏實驗設(shè)備有限公司）微量移液器（北京青云航空儀表公司）BX-41型奧林巴斯光學顯微鏡。

1.3 實驗方法：快捷免疫組化Max-Vision法，高溫抗原修復。HP染色：①石蠟切片考片、脫蠟、水化。②亞甲藍溶液中染色1 min。③水洗晾干后，中性樹膠封固。

1.4 統(tǒng)計學處理：免疫組化結(jié)果分析采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件進行。

2 胃癌臨床病理學特征與Tiam1和nm23H1表達的關(guān)系

Tiam1和nm23H1表達的關(guān)系與胃癌臨床病理學特征：Tiam1蛋白在胃癌組織中的表達水平與患者的性別，年齡無統(tǒng)計學差異（P＞0.05），與腫瘤組織的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、分化類型，浸潤范圍，情況存在相關(guān)性，組間比較有顯著性差異（P＜0.05）。nm23H1蛋白在胃癌組織中的表達情況與患者的性別，年齡無統(tǒng)計學差異（P＞0.05），與胃癌組織的分化類型，浸潤范圍，淋巴結(jié)是否轉(zhuǎn)移存在相關(guān)性，組間比較差異具有顯著性（P＜0.05）。

3 討 論

胃癌的是最常見的惡性腫瘤之一，近些年來在我國的發(fā)病率和病死率呈上升趨勢。早發(fā)現(xiàn)、早治療是改善預后的重要因素。胃癌發(fā)生是多因素作用的結(jié)果，近年研究發(fā)現(xiàn)腫瘤的發(fā)生發(fā)展與多種癌基因的增加和抑癌基因的減少密切相關(guān)。Tiam 1蛋白參與腫瘤侵襲、轉(zhuǎn)移的一種蛋白質(zhì)分子，他是Racl的特異性轉(zhuǎn)化因子,有活性的Racl與其他效應分子協(xié)同作用，完成影響細胞的形體極化過程、結(jié)構(gòu)重組、調(diào)節(jié)細胞骨架、促進細胞的運動、轉(zhuǎn)移，調(diào)節(jié)細胞的增殖與凋亡、參與基因表達的調(diào)控[1-2]，nm23H1是腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因，位于人的17q21基因鏈，其參與體內(nèi)磷酸核苷的生成，可以干擾G蛋白介導的信號傳導通路而影響細胞代謝及微管聚合狀態(tài)[3]，nm23H1與Tiam 1蛋白質(zhì)分子之間有無關(guān)系，已經(jīng)有了部分實驗研究。在體內(nèi)nm23H1通過限制Rac1的活化,減少細胞膜皺褶和片足的形成，起到對Tiam1蛋白活化的抑制作用，抑制胃癌發(fā)展和轉(zhuǎn)移[4]。我們在探討Tiam1與胃癌生物學行為的關(guān)系中發(fā)現(xiàn)以下結(jié)果：Tiam1蛋白的表達在不同性別、年齡、腫瘤原發(fā)部位中未表現(xiàn)出明顯差異，盡管細胞突變可能受到患者的居住環(huán)境、年齡、性別、等社會因素在不同程度上影響，胃癌組織隨胃癌組織浸潤深度的加深、分化程度的降低中Tiam1蛋白的表達率明顯增高(P<0.05)，Tiaml蛋白表達率在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者明顯高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者，組間比較有顯著差異(P<0.05)。本研究發(fā)現(xiàn)作為腫瘤轉(zhuǎn)移促進因子的Tiam1，與胃癌生物學行為（包括組織淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、分化程度、浸潤深度）息息相關(guān)，而這些生物學將直接影響患者的預后及術(shù)后5年生存率的重要因素。Meghan[5]發(fā)現(xiàn)在人類乳腺癌的形成、進展和轉(zhuǎn)移過程中Tiam1高水平表達。國內(nèi)也有人[6]乳腺癌患者不同淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀況和臨床分期Tiam1蛋白表達程度差異有顯著性，大量臨床實驗證明Tiaml蛋白可能作為肺癌轉(zhuǎn)移、治療效果及預后的監(jiān)測指標。Engers等[7]報告在前列腺癌患者的癌組織發(fā)現(xiàn)Tiam1蛋白的超表達可能提示預后不佳。國內(nèi)有人[8]用免疫熒光法單純測定Tiam1蛋白在中晚期胃癌組織中的表達，發(fā)現(xiàn)與癌組織的分化程度、淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移情況、浸潤深度、具有顯著相關(guān)性。本實驗表明在胃癌的發(fā)展過程中nm23-H1基因失活發(fā)揮了部分作用，但不是在所有胃癌標本中都表達率過低，nm23-H1表達率陽性的多少與胃癌患者的腫瘤的發(fā)生部位、性別、年齡、及生活環(huán)境均無相關(guān)性，顯示在抑制胃癌的局部浸潤中可起到一定的作用，無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組高于有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組，說明nm23-Hl表達與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈負相關(guān)，提示在抑制胃癌轉(zhuǎn)移中nm23-Hl基因可起到作用，與大多數(shù)學者的觀點相符，nm23-Hl基因是一個腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因。分化程度高的腫瘤組織中nm23H1的表達率均高于分化程度低的腫瘤組織，可見nm23-H1表達率的高低在部分程度上可以為胃癌的惡性程度的判斷提供參考價值。Nesi G等[9]研究認為胃癌患者nm23-H1基因表達較高者5年生存率明顯升高。國內(nèi)有人研究發(fā)現(xiàn)[10]，隨胃癌分化程度的降低，nm23H1的表達率逐漸下降。在探討Tiam1和nm23H1表達與胃癌發(fā)生的相關(guān)性中，我們的研究數(shù)據(jù)表明：Tiam1和nm23H1蛋白表達呈顯著的負相關(guān)。在Tiam1染色陰性中的nm23H1染色陽性率高于Tiam1染色陽性的胃癌組織中nm23H1的染色陰性率(P<0.05)。此現(xiàn)象說明在胃癌發(fā)生，發(fā)展的過程中Tiam1和nm23H1協(xié)同參與其中。

[1] 陳科,何俊琳,王應雄.nm23基因家族結(jié)果與功能研究[J].中國優(yōu)生與遺傳雜志,2007,15(4):11-13.

[2] 趙茜,區(qū)穗芳,謝秀琴.P53及nm23在胃癌中的表達及其與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關(guān)系[J].中國熱帶醫(yī)學,2007,7(5):689-690.

[3] De-Luea A,Baldi A,Russo P,et al.Coex Perssion of Helieobaeter Pyloris Porteins CagA and HsPB induces cell Proliefration in AGS gastric epithtelial cells,independently from the bacterial inefetion[J]. Cnaeer Res,2003,63(19):6350-6356.

[4] Maeda S,Yoshida H,Mitsuno Y,et al.Analysis of apoptotic and antipaoptotic signaling pathways induced by Helieobaeter Pylori[J]. Gut,2002,50(6):771-778.

[5] Meghan EM,Lee-Su K,Janet E,et al.The Role of guanine nucl-eotide exchange factor Tiam1 in cellular migration,invasion,adhesion and tumor progression[J].Breast Cancer Research and Treatment,2004,84(1): 21-32.

[6] 郭志強,段惠萍,李明眾.Ezrin和Tiam1在乳腺癌中的表達及其意義[J].臨床醫(yī)藥實踐雜志,2008,17(6):408-412.

[7] Engers R,Mueller M,Walter A,et al.Prognostic relevance of Tiam1 protein expression in prostate carcinomas[J].Br J Cancer,2006,95(8): 1081-1086.

[8] 趙文明,耿敬姝.Tiam1基因在胃癌中的表達及意義[J].實用腫瘤學雜志,2007,21(1):9-12.

[9] Nesi G,Palli D,Pernice LM,et al.Expression of nm23 gene in gastric Cancer is associated with a poor 5-year survival[J].Anti-Cancer Res,2001,21(5): 3643-3649.

[10] 楊育生,劉斌,邢傳平,等.胃癌組織中Caveolin-1,nm23及MMP-2的表達及意義[J].世界華人消化雜志,2007,15(15):1725-1730.

Tiam1 and nm23H1 Expression in Gastric Cancer

YAO Le1*, LI Mei2, AN Yi1
(1 Department of Gastroenterology, Yulin First Hospital, Yulin 719000, China; 2 Department of Cancer Interventional Radiology, Shaanxi Provincial Tumor Hospital, Xi'an 710061, China)

Objective To study the correlation between Tiam1 and nm23H1 in the process of gastric cancer occurrence and development, which contribute to further explore the molecular mechanisms of gastric cancer invasion and metastasis. Methods 50 cases of gastric cancer specimens collection, using immunohistochemical s-p method to determinate the expression of Tim1 and nm23H1 protein. Results The gastric cancer clinical pathology characteristic and the Tiam1 and the relationship between nm23H1 expression: ①Tiam1 protein expression levels in gastric cancer tissue differentiation degree, inf i ltration depth, lymph node metastasis have signif i cant correlation, compare the differences between groups is signif i cant (P<0.05). ②nm23H1 expression levels of protein in gastric cancer tissue differentiation degree, inf i ltration depth, lymph node metastasis is a signif i cant correlation, compare the differences between groups is signif i cant (P<0.05). ③Tiam1 and negatively correlated with nm23H1 protein expression. Conclusion ①Tiam1 expression in gastric cancer tissue with the loss of the differentiation degree and lymph node metastasis, invasion depth deepening, which increased obviously. ②Nm23H1 expression in gastric cancer tissue is low, which have relationship with gastric cancer inf i ltration, lymph node metastasis and pathologic differentiation degree.

Gastric cancer; Tiam1; nm23H1

R735.2

B

1671-8194（2014）35-0021-02

*通訊作者