副豬嗜血桿菌病的診斷與防治

楊裕 楊志強 丁艷霞 李琳 任嚴新 孫召金 王福傳*

（1山西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院飼料科技研究中心，山西太原 030031；2吉林大學(xué)人獸共患病研究所/人獸共患病教育部重點實驗室，吉林長春 130062）

副豬嗜血桿菌病的診斷與防治

楊裕1楊志強2丁艷霞2李琳2任嚴新2孫召金2王福傳1*

（1山西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院飼料科技研究中心，山西太原 030031；2吉林大學(xué)人獸共患病研究所/人獸共患病教育部重點實驗室，吉林長春 130062）

副豬嗜血桿菌是健康豬呼吸道攜帶的一種病原，常于豬只受應(yīng)激后誘發(fā)以多發(fā)性漿膜炎、纖維性滲出性炎癥、關(guān)節(jié)炎、腦膜炎、呼吸困難、高熱及高死亡率為特征的高度接觸性傳染病，本文綜述了HPS的病原特性、流行特點、發(fā)病機理、診斷、預(yù)防以及治療，并對該病防控的發(fā)展方向進行展望。

副豬嗜血桿菌；病原；流行；防控

副豬嗜血桿菌病（Glasser＇s disease）是由副豬嗜血桿菌（Haemophilus parasuis,HPS）引起的豬的一種呼吸道傳染病，常伴隨有特征明顯的腦膜炎、多發(fā)性漿膜炎、多發(fā)性關(guān)節(jié)炎以及細菌性肺炎。該病在豬群中零散發(fā)生，其中3周齡到4月齡的豬較為易感，經(jīng)常于斷奶、環(huán)境改變、混群等應(yīng)激后發(fā)生，或者與其他疾病混合感染，尤其是在豬繁殖與呼吸綜合征（PRRS）和豬圓環(huán)病毒病（PCV）等免疫抑制性疾病發(fā)生后更加易感。副豬嗜血桿菌病在主要的豬肉生產(chǎn)國都存在，甚至多年隔離的現(xiàn)代豬場也將其視為一種重大疾病[1]。隨著養(yǎng)豬業(yè)的發(fā)展，副豬嗜血桿菌病越來越受到重視[2]。

1 病原特性

HPS是一種非溶血性、無鞭毛、無芽孢、多形、短小的革蘭氏陰性桿菌，屬巴氏桿菌科嗜血桿菌屬，煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD）依賴菌，可以生長在血瓊脂平板，菌落形狀類似于葡萄球菌菌落[3]。HPS可以從正常豬的鼻腔或扁桃體分離出來，也可以從處于病豬的肺尤其是發(fā)生肺炎的病豬的肺中分離出來。敗血癥副豬嗜血桿菌常入侵漿膜（腹膜、胸膜、心包膜、關(guān)節(jié)腔、腦膜）。

HPS的發(fā)現(xiàn)最早可追溯到1910年，是由格拉瑟（Glasser）發(fā)現(xiàn)的一種小革蘭氏陰性桿菌；直到1976年，經(jīng)過準確的分類研究將其命名為副豬嗜血桿菌[4]。目前已經(jīng)鑒定出至少21種血清型，其他亞型株同樣常見。發(fā)生該病的豬群經(jīng)常伴隨攜帶幾種不同血清型的病原，血清型4、5、12和13在我國很常見，血清型4、5、13和14在北美很常見，在我國常見有一定的交叉免疫保護，相關(guān)研究表明，用血清型為4和5的菌株制造的疫苗可以保護免受4或5感染，并減輕血清型13、14感染引起的損傷。雖然毒力與莢膜抗原有關(guān)，但是不一定與免疫原性有關(guān)。

2 流行特點

副豬嗜血桿菌廣泛分布于豬群中，是一種高度接觸性傳染病。仔豬出生后暴露于該病中，該病原在豬體內(nèi)很早就開始繁殖[5]。新生仔豬在受到母源抗體保護7～8周后，自身逐漸建立起來的免疫力足以抵抗該病。如果沒有主動或被動免疫的仔豬暴露于副豬嗜血桿菌，豬群即可暴發(fā)該病。豬群受到強烈應(yīng)激時，該病會暴發(fā)，該病也常與一些疾病混合感染，如豬繁殖與呼吸綜合征、豬圓環(huán)病毒病等[6]。

3 發(fā)病機理

目前，副豬嗜血桿菌病的發(fā)病機理不是很明確，可能是損傷與應(yīng)激打開了病菌入侵的通道，也可能是因為豬繁殖與呼吸綜合征、豬流感、豬圓環(huán)病毒病等疾病導(dǎo)致免疫抑制，感染后HPS在多個部位定居，所以有一段菌血癥的時期[7]。

HPS可入侵血腦屏障，“喜歡”寄居在軟腦膜和腦髓，經(jīng)常集中在這些地方并刺激發(fā)生炎癥反應(yīng)。另外，在一些漿膜表面也常常能分離到病原，經(jīng)常導(dǎo)致炎癥和纖維蛋白滲出[7]?？捎蔑@微鏡明顯觀察到該菌對脈管系統(tǒng)的損傷，脈管系統(tǒng)的損傷可能引起黏膜免疫抑制并促使炎性滲出的形成和關(guān)節(jié)滑液的增多，進而促進HPS損傷的發(fā)生。副豬嗜血桿菌的全身性分布對肺炎或支氣管肺炎的壞死擴展有促進作用。

4 診斷

4.1 臨床癥狀

副豬嗜血桿菌病經(jīng)常突發(fā)，長勢最好的豬首先發(fā)病。暴發(fā)性疫病可引起極高的死亡率。癥狀由病原集中的地方?jīng)Q定。大多數(shù)情況存在起始體溫顯著升高并伴隨厭食、精神沉郁、被毛粗亂、跛行、嚴重呼吸困難等癥狀。HPS在大腦、腦膜以及脊髓內(nèi)聚集，常引起中樞神經(jīng)系統(tǒng)紊亂，包括顫抖、共濟失調(diào)、后肢麻痹或側(cè)躺[8]。腿關(guān)節(jié)腫脹影響豬行走。任何年齡段的病豬都可能突然死亡。有時出現(xiàn)敗血癥和肌肉炎。在轉(zhuǎn)為慢性的情況下，出現(xiàn)鼻炎、呼吸困難、結(jié)膜變紅、四肢末端發(fā)紺以及面部和耳朵水腫等癥狀。

4.2 剖解病變

副豬嗜血桿菌病以纖維素性胸膜肺炎、纖維素性多發(fā)性漿膜炎、關(guān)節(jié)炎和腦膜炎為特征，胸腔內(nèi)有大量淡紅色液體、纖維素性滲出物及凝塊，心包緊張，存有大量心包液，有的心包膜上有奶酪樣壞死，心包膜與心臟粘連。肺臟表面覆有大量纖維素性滲出物并與胸壁粘連；肺炎區(qū)累及兩側(cè)肺葉的尖葉、心葉、膈葉的前下部及副葉。肉眼可見的損傷主要是在單個或多個漿膜面，可見漿液性和化膿性纖維蛋白滲出物，這些漿膜包括腹膜、心包膜和胸膜，這些損傷也可能波及腦膜和關(guān)節(jié)表面，尤其是腕關(guān)節(jié)和跗關(guān)節(jié)。在顯微鏡下觀察滲出物，可見纖維蛋白中性粒細胞和較少量的巨噬細胞[9]。副豬嗜血桿菌經(jīng)常引起急性敗血癥，并且其內(nèi)毒素可引起彌漫性血管內(nèi)凝血，導(dǎo)致多個器官內(nèi)形成微血栓，非常類似于由豬鏈球菌引起的血栓、細菌性肺炎，但副豬嗜血桿菌病常引起“絨毛心”，而豬鏈球菌病則引起“鎧甲心”。

有時沒有肉眼可見的病變，但是如果把大腦摘除，即可能在大腦腹側(cè)面見到纖維素性及膿性滲出。隨著病程的進展，滲出可能會出現(xiàn)在小腦或大腦。一個或多個腿關(guān)節(jié)腫脹，或許伴隨其他部位的損傷。寰枕關(guān)節(jié)經(jīng)常受到影響。關(guān)節(jié)分泌液含有纖維素，顏色從灰色到綠色。

4.3 病原分離鑒定

由于副豬嗜血桿菌廣泛存在，HPS可以從健康豬的鼻腔、氣管和肺臟中分離。嚴格無菌操作，從豬的胸膜、心包、肝臟、脾臟、關(guān)節(jié)和腦膜取出病料，接種到含有煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD）的胰酪胨大豆瓊脂培養(yǎng)基（TSA）平板上，24～48小時后挑取灰白或透明、光滑呈露珠樣的菌落，于含NAD的TSA平板上單菌落劃線純培養(yǎng)，并于48小時后細菌涂片，革蘭氏染色鏡檢[10]。若鏡檢結(jié)果為革蘭氏陰性細小桿菌，有莢膜，無芽胞，具多形性，從短桿狀到細絲狀，以短桿狀為主，則繼續(xù)進行一次純化培養(yǎng)，同時接種于鮮血瓊脂平板、普通瓊脂平板和巧克力瓊脂平板。如果細菌在巧克力瓊脂平板上生長良好，而在鮮血瓊脂平板、普通瓊脂平板上沒有菌落生成，則將菌株保存待進一步鑒定，再將HPS涂在不含NAD的鮮血瓊脂平板上，再挑去金黃色葡萄球菌菌落劃線，24～48小時后觀察金黃色葡萄球菌劃線周圍有無HPS菌落生長，或進行生化鑒定，有條件的豬場可進行聚合酶鏈式反應(yīng)（PCR）檢測來確診[11-13]。

5 預(yù)防與治療

5.1 預(yù)防

設(shè)定嚴格的管理制度，搞好環(huán)境衛(wèi)生，加強飼養(yǎng)，控制主要疾病例如豬繁殖與呼吸綜合征、豬圓環(huán)病毒病、豬流感等疾病的發(fā)生，預(yù)防性地注射抗生素和疫苗才可以綜合預(yù)防該病。因為副豬嗜血桿菌的寄居與豬的早期生活有關(guān)（小于10日齡），隔離飼養(yǎng)尚未能成功防治該病，必須注重綜合防治[13]。減少應(yīng)激和接種疫苗對于種畜疾病預(yù)防來說具有重要的意義，從斷奶到保育階段是HPS預(yù)防的重中之重，采用副豬嗜血桿菌多價滅活菌苗（含血清型4、5、12、13）的免疫效果明顯，保護能力強，安全可靠。除做好常規(guī)免疫外，需經(jīng)常監(jiān)測母源抗體，分娩前4周免疫1次，2頭份/頭。一旦豬場發(fā)病，仔豬在15～60日齡時要實施緊急接種，每頭1 mL，半個月后加強免疫1次；待疫情穩(wěn)定后全場2～3周齡的仔豬進行常規(guī)免疫副豬嗜血桿菌疫苗[13]。

若已從豬體內(nèi)分離出HPS，可以使用福爾馬林滅活的自家苗進行有效預(yù)防。但是于副豬嗜血桿菌的交叉保護有限，對一種血清型的預(yù)防并不能確保避免其他血清型的感染。

5.2 治療

副豬嗜血桿菌病的病程通常很短，且如果不經(jīng)過治療，病畜會死亡。所以，病畜需及時給予口服藥物治療以及非腸道給藥治療。臨床藥敏試驗表明，本菌對氟喹諾酮類、頭孢類、增效磺胺類、氨基糖苷類等藥物敏感。但是由于HPS血清型較多，從不同豬場分離的HPS菌株敏感度不同。因此，治療前須做藥敏試驗[14]。同時，根據(jù)本病菌易產(chǎn)生耐藥性的特點，采取盡早、交替、聯(lián)合對癥下藥原則。臨床癥狀出現(xiàn)初期，立即使用泰拉菌素、頭孢菌素、氨芐青霉素、阿莫西林、土霉素、四環(huán)素、卡那霉素和慶大霉素等敏感藥物，進行大劑量注射治療，其中較為常見的藥物為頭孢菌素、阿莫西林、土霉素、氟苯尼考和氟喹諾酮類等[15,16]，臨床上也可將阿莫西林、四環(huán)素、慶大霉素、達諾沙星或恩諾沙星等任何兩種無配伍禁忌的藥物進行組合，同時混合或分別深部肌肉注射，并配合地塞米松以增強效果，或采用清開靈注射液與頭孢噻呋鈉以進行中西藥結(jié)合治療，每天1次，連用7天。在治療期間，適量輔喂氟苯尼考、替米考星、電解多維、維生素（維生素C、維生素E、維生素A）、黃芪多糖，按說明拌料或飲水添加，有顯著增強抵抗力的作用，有助于患豬迅速恢復(fù)食欲，縮短治愈期[17]。

6 小結(jié)

豬場防控該病要遵循“養(yǎng)重于防，防重于治”的方針，獸醫(yī)要制定嚴格的防疫制度，要提高飼料質(zhì)量，注意環(huán)境衛(wèi)生，各階段豬群全進全出，豬舍消毒后要有空置期，分級飼養(yǎng)，減少豬群流動，定期對圈舍進行消毒，減少應(yīng)激，定期采血鑒定血清型，有針對性地加強疫苗免疫，并做藥敏試驗，預(yù)防性給藥，嚴格控制豬繁殖與呼吸綜合征、豬瘟、豬圓環(huán)病毒病、豬細小病毒病以及豬鏈球菌病等疾病的發(fā)生[18,19]。副豬嗜血桿菌病發(fā)病很快，確診和治療都有困難，要求豬場技術(shù)員能盡早發(fā)現(xiàn)病豬,并對整個豬群采取控制措施。副豬嗜血桿菌存在眾多血清型，提示研制更有效的多價苗迫在眉睫；混合感染多發(fā)，也提示研制副豬嗜血桿菌病與其他豬病的多聯(lián)苗有望成為防治該病的重要手段，所以運用基因工程的手段研制具有交叉保護的疫苗是預(yù)防和控制副豬嗜血桿菌病的必然趨勢，研究識別母源抗體與自身抗體的快速檢測方法亦有助于準確確定疫苗注射的時機，進而加強免疫效果。

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S858.28

B

1673-4645（2014）07-0026-04

2014-06-18

山西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院科研項目（2012ygg22）；山西省科技攻關(guān)計劃項目（20140311020-3）

楊裕（1976-），男，助理研究員

*通訊作者：王福傳（1959-），男，研究員