DEHP對男性生殖系統(tǒng)影響的研究進(jìn)展

郭浩 劉劍新

●綜 述

DEHP對男性生殖系統(tǒng)影響的研究進(jìn)展

郭浩 劉劍新

男性的生育能力下降是近些年來人們普遍關(guān)注的問題，研究發(fā)現(xiàn)在不育人群中，男性因素約占50.0%[1]，男性患者不育癥的發(fā)病率呈上升趨勢。男性精液質(zhì)量研究數(shù)據(jù)顯示，歐洲、美國以及亞洲男性的精子質(zhì)量存在著明顯下降的趨勢[2]。近50年來，男性人群的隱睪、尿道下裂的發(fā)病率增加了一倍，同時(shí)成年男性的精液質(zhì)量下降，1938—1990年14 947例健康成年男性平均精子數(shù)減少了50.0%，射精精液體積減少了2.75～3.40ml，可能是環(huán)境因素和生活方式的改變，導(dǎo)致上述疾病的發(fā)生及男性精子數(shù)目的減少[3]。近年來，由于環(huán)境污染及生活方式的改變，塑料制品在食品包裝及醫(yī)療制品中廣泛使用，人類接觸鄰苯二甲酸酯（PAEs）類物質(zhì)增多，尤其以接觸鄰苯二甲酸二（2-乙基）-己酯（DEHP）增多更為明顯。目前，一些不法商販將DEHP非法用作食品和飲料的添加劑，在醫(yī)學(xué)界及食品衛(wèi)生部門引起了強(qiáng)烈的關(guān)注。DEHP作為工業(yè)增塑劑，不應(yīng)被添加到食品中[4]。DEHP使得人群的不育不孕癥的發(fā)病率明顯上升，PAEs類物質(zhì)在人體內(nèi)蓄積，最終導(dǎo)致人類的生殖系統(tǒng)病變、性行為改變、免疫功能缺陷及后代生殖能力下降，本文主要針對DEHP對男性生殖系統(tǒng)的影響作一綜述。

1 DEHP與環(huán)境內(nèi)分泌干擾物（EDCs）

EDCs是指具有內(nèi)分泌干擾功能的物質(zhì)，1995年美國環(huán)境保護(hù)署（EPA）、地理檢測部門和公共服務(wù)部等單位組成的“內(nèi)分泌干擾物工作組”對EDCs的解釋是：“對機(jī)體內(nèi)天然激素的產(chǎn)生、釋放、運(yùn)輸、代謝、消除、結(jié)合、功能發(fā)揮以及維持體內(nèi)環(huán)境平衡穩(wěn)定和機(jī)體發(fā)育過程中產(chǎn)生干擾作用的外源物質(zhì)”[5]。DEHP屬于PAEs類物質(zhì)，是使用最廣泛的增塑劑，應(yīng)用于塑料制品、食品包裝、個(gè)人護(hù)理產(chǎn)品、醫(yī)療設(shè)備和藥品包裝以及其他化工產(chǎn)品的生產(chǎn)原料，與人們的日常生活密切相關(guān)。DEHP及其代謝產(chǎn)物鄰苯二甲酸單乙基己酯（MEHP）具有EDCs的作用，其作用和體內(nèi)的激素作用相似，干擾體內(nèi)激素的正常生理功能[6]。DEHP是目前我國使用量最大的增塑劑，約占PAEs總量的40.0%[7]。增塑劑在加工過程中不能真正與塑料的碳鏈形成共價(jià)結(jié)合，因而在使用過程中會不斷地向環(huán)境中釋放，對大氣、土壤及水體造成污染。DEHP可以通過呼吸道、消化道、皮膚、注射等多種途徑被人體吸收，通過血液循環(huán)進(jìn)入肝臟、腎臟及睪丸等組織，只有部分會在24h內(nèi)由尿或糞便排出體外，而它的主要代謝物MEHP會在人體組織中長期蓄積，時(shí)間長達(dá)6個(gè)月[8]，對人類健康造成潛在影響，尤其對生殖系統(tǒng)的危害受到人們的關(guān)注。DEHP作為一種脂溶性環(huán)境雌激素，其代謝產(chǎn)物結(jié)構(gòu)與內(nèi)源性雌激素具有一定的相似性，進(jìn)入人和動物體內(nèi)可影響內(nèi)源性激素的合成與代謝，并可與相應(yīng)的受體結(jié)合，干擾內(nèi)源性激素對機(jī)體許多生理活動的調(diào)節(jié)，對人和動物產(chǎn)生多方面不利的影響，其中主要表現(xiàn)為生殖發(fā)育毒性[9-10]。DEHP可以直接或間接損害睪丸的精子發(fā)生，直接損害包括對不同階段生精細(xì)胞的細(xì)胞毒性或基因毒性反應(yīng)，使生精細(xì)胞發(fā)生永久性損傷，間接損害是通過影響下丘腦-垂體-睪丸軸的促性腺激素釋放激素和促性腺激素的釋放，作用于性激素生成器官如胸腺、垂體、腎上腺等影響男性生殖功能。美國毒物與疾病登記署（ATSDR）估算，普通人群對DEHP的最大接觸量為2mg/d，平均暴露濃度按體重計(jì)為3～30μg/kg。德國成人的DEHP攝入范圍為0.03～173μg/kg,而職業(yè)性或醫(yī)源性的接觸量更高[11]。比如，輸血時(shí)的接觸量可高達(dá)250～300mg，Huang等[12]研究提示當(dāng)人體暴露在濃度為30μg/d的環(huán)境中，他們的血清、尿液、孕婦的羊水、母乳甚至精液中都可以檢測出DEHP。

2 DEHP對男性生殖系統(tǒng)的影響

DEHP對男性生殖系統(tǒng)的影響主要是對精子質(zhì)量的影響，Gao等[13]對50例長期在塑料大棚工作和50例長期使用塑料飯盒飲食的弱精癥患者，以及50例正常對照進(jìn)行精漿中DEHP濃度檢測，分別為（0.72±0.48）、（0.71±0.49）和（0.21±0.18）mg/L，患者組與對照組相比，精子活力與DEHP濃度呈負(fù)相關(guān)，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。Pant等[14]對人類精子的體外試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，暴露于高濃度DEHP的精液樣品，在30min～96h后精子活力下降與暴露時(shí)間和DEHP濃度成反比。張晶[15]對187例男性不育癥患者血清及精液中的DEHP進(jìn)行檢測，檢出率分別為92.3%和75.9%，濃度分別為0.37mg/L和0.12mg/L，患者血清及精液中的DEHP檢出率及DEHP濃度均高于正常人群對照組，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，且精液中DEHP濃度與精子密度、存活率及活力呈負(fù)相關(guān)（P＜0.05），與液化時(shí)間呈正相關(guān)（P＜0.01），這些均提示了DEHP可能是目前男性不育發(fā)生的重要因素。Zhang等[16]對37例上海男性的精液分析結(jié)果顯示精液量和精子密度與鄰苯二甲酸二丁酯（DBP）和DEHP濃度呈負(fù)相關(guān)，精子畸形率與DEHP濃度呈正相關(guān)。Rozati等[17]研究了PAEs與男性不育癥的相關(guān)性，在對21例不育癥男性以及32例正常男性的血清、精液進(jìn)行采樣分析后，發(fā)現(xiàn)不育癥患者血清及精液中PAEs總濃度顯著高于正常男性，且具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。其中精液PAEs濃度與射精量、精子總數(shù)、精子活力和正常活性精子數(shù)呈負(fù)相關(guān)。Pant等[18]在對印度不育癥男性精液的研究中，發(fā)現(xiàn)DEHP濃度高達(dá)（0.77±1.2）μg/ml，而精液中精子數(shù)量減少，活力降低。DEHP作為一種EDCs主要通過抑制睪酮的生成發(fā)揮其抗雄激素活性，Li等[19]對不育癥男性的精液檢查發(fā)現(xiàn)精液中DEHP水平增高，同時(shí)這類男性的血液中雌二醇及催乳素含量較正常水平增高，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。Joensen等[20]對丹麥隨機(jī)抽取的881例男性尿液及精液中DEHP及代謝產(chǎn)物MEHP的濃度與他們血清中的性激素水平進(jìn)行了分析，MEHP濃度與血清中總睪酮、游離睪酮以及游離雌二醇的水平呈負(fù)相關(guān)，說明人群的DEHP暴露可導(dǎo)致血清睪酮水平的下降，對下丘腦-垂體-性腺軸具有正反饋調(diào)節(jié)作用。

3 DEHP對子代生殖的影響

DEHP能夠通過胎盤及乳汁傳播到子代體內(nèi)，引起子代雄性尿道下裂、隱睪及附睪發(fā)育不全等生殖系統(tǒng)異常，同時(shí)也可影響子代的生殖激素水平。在孕后14d至產(chǎn)后3d給予母鼠口服DEHP，可以觀察到雄性仔鼠出現(xiàn)睪丸萎縮、附睪畸形、尿道下裂等生殖系統(tǒng)損害，并存在劑量效應(yīng)關(guān)系。Pocar等[21]研究發(fā)現(xiàn)孕期和哺乳期暴露于DEHP的雌性小鼠的雄性仔鼠的睪丸重量減輕13.0%，與對照組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，同時(shí)暴露小鼠的雄性仔鼠的性腺類固醇和促性腺激素受體基因表達(dá)顯著降低。在子宮內(nèi)和哺乳期暴露于DEHP可能改變雄性動物激素合成，從而影響動物的生育能力。鄭海紅等[22]對懷孕12d到產(chǎn)后21d的SD母鼠分別用劑量為10、100、750mg/（kg·d）的DEHP灌胃，觀察DEHP對產(chǎn)后1d（PNDl）及產(chǎn)后21d（PND21）雄性仔鼠肛生殖器距離（AGD）和類固醇激素合成急性調(diào)節(jié)蛋白（StAR）表達(dá)水平的影響，發(fā)現(xiàn)PNDl中、高劑量組雄性仔鼠的AGD均有不同程度縮短，與對照組和低劑量組相比均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（均P＜0.01）。PND21中、高劑量組雄性仔鼠的AGD縮短明顯，與對照組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.01）。中、高劑量組雄性仔鼠睪丸胚胎間質(zhì)細(xì)胞（FLC）的促黃體生成素受體（LHR）蛋白表達(dá)明顯減弱，與對照組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.01）；高劑量組睪丸FLC的StAR蛋白表達(dá)明顯減弱，與對照組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.01），表明DEHP對新生雄性仔鼠具有生殖毒性反應(yīng)，其可能機(jī)制是宮內(nèi)暴露后，DEHP抑制睪丸FLC的LHR蛋白和StAR蛋白的表達(dá)從而影響睪丸發(fā)育。

4 DEHP對雄性動物睪丸支持細(xì)胞的影響

睪丸支持細(xì)胞的功能主要是為精子的發(fā)生提供合適的激素和營養(yǎng)環(huán)境，也是PAEs致睪丸毒性的主要靶細(xì)胞。PAEs對睪丸支持細(xì)胞之間緊密連接結(jié)構(gòu)的破壞，可以導(dǎo)致雄性動物睪丸萎縮及生精細(xì)胞脫落。MEHP作為DEHP的主要代謝產(chǎn)物，能夠誘導(dǎo)睪丸支持細(xì)胞損傷，并通過Fas/FasL途徑，加速生精細(xì)胞的凋亡[23]，同時(shí)還能破壞生精上皮連接復(fù)合體，減弱睪丸支持細(xì)胞對生精細(xì)胞發(fā)育的支持能力[24]。DEHP可誘導(dǎo)哺乳動物睪丸損傷，是睪丸萎縮、睪丸支持細(xì)胞空泡形成、生精細(xì)胞從生精小管上皮脫落、少精及精子活力不足等疾病的重要致病因素[25]，Awal等[26]經(jīng)口給予實(shí)驗(yàn)動物（大鼠、豚鼠）較高劑量DEHP或其主要代謝產(chǎn)物MEHP可引起明顯的睪丸急性損害，染毒數(shù)小時(shí)后，可見睪丸支持細(xì)胞內(nèi)形成空泡，細(xì)胞質(zhì)中波形蛋白絲坍陷，生精細(xì)胞脫落，凋亡率增加，且具有時(shí)間-效應(yīng)和劑量-效應(yīng)關(guān)系。Skinner[27]研究表明睪丸支持細(xì)胞通過各種旁分泌信號來調(diào)控生殖細(xì)胞的基因表達(dá)和代謝，從而參與精子的生成，主要有胰島素樣生長因子（IGF），神經(jīng)生長因子（NGF），由神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞衍生的神經(jīng)營養(yǎng)因子（BDNF）和干細(xì)胞生長因子（SCF）。

5 DEHP對雄性動物睪丸間質(zhì)細(xì)胞的影響

睪酮主要是由分布在生精小管間結(jié)締組織中的睪丸間質(zhì)細(xì)胞產(chǎn)生，睪丸間質(zhì)細(xì)胞分泌人體內(nèi)95.0%的睪酮，主要作用是維持性功能、參與精子發(fā)生與成熟等生理過程。睪丸間質(zhì)細(xì)胞存在凋亡機(jī)制，機(jī)體通過凋亡去除嚴(yán)重?fù)p傷、畸變和衰老的細(xì)胞，以維持睪丸間質(zhì)細(xì)胞質(zhì)量和數(shù)量的相對穩(wěn)定，保證其功能的正常發(fā)揮。但是睪丸間質(zhì)細(xì)胞過度凋亡會使睪酮的分泌量減少，導(dǎo)致生精細(xì)胞凋亡增加，精子數(shù)量下降。睪酮是促使精子細(xì)胞進(jìn)行減數(shù)分裂及細(xì)胞分化的主要激素，通過睪丸支持細(xì)胞發(fā)揮生理功能，在精子發(fā)生周期中合成各種蛋白質(zhì)和營養(yǎng)因子[28]。成熟型睪丸間質(zhì)細(xì)胞（ALCs）是成年雄性動物睪酮的主要來源，ALCs可直接由血中攝取膽固醇，在線粒體內(nèi)膜上轉(zhuǎn)換為孕烯醇酮，進(jìn)而轉(zhuǎn)化成有活性的雄激素，其中StAR，3β-羥基類固醇脫氫酶（3β-HSD）、細(xì)胞色素p450膽固醇側(cè)鏈裂解酶（p450scc）和細(xì)胞色素p450 17α-羥化酶（p450c17α）在膽固醇向線粒體內(nèi)膜轉(zhuǎn)運(yùn)及雄激素合成過程中發(fā)揮關(guān)鍵作用。其中StAR是激素可誘導(dǎo)的線粒體蛋白，可作用于線粒體外膜，介導(dǎo)并促進(jìn)膽固醇經(jīng)線粒體外膜轉(zhuǎn)運(yùn)至內(nèi)膜，為睪丸間質(zhì)細(xì)胞合成睪酮的限速步驟之一，在動員轉(zhuǎn)運(yùn)膽固醇到線粒體內(nèi)膜過程中起到極其重要的作用。有研究發(fā)現(xiàn)DEHP作用于出生后的動物，血中雄激素水平及睪丸間質(zhì)細(xì)胞睪酮合成能力呈雙相性變化，較高劑量的DEHP可使成年大鼠的血清睪酮水平下降，而低劑量作用則使血清睪酮水平升高[29]，然而Ge等[30]在體外檢測了MEHP對睪丸間質(zhì)細(xì)胞合成類固醇能力的影響，發(fā)現(xiàn)DEHP有雙相調(diào)節(jié)作用，使用濃度100μmol/L MEHP處理后，可增加黃體生成素（LH）刺激的睪酮產(chǎn)生；而當(dāng)濃度提高到10mmol/ L時(shí)，則抑制LH刺激的睪酮產(chǎn)生。Desdoits-Lethimonier等[31]首次用實(shí)驗(yàn)證實(shí)了DEHP及其代謝產(chǎn)物可影響人睪丸間質(zhì)細(xì)胞的睪酮合成。Mendiola等[32]對生育男性和不育男性聯(lián)合分析的數(shù)據(jù)顯示，暴露于高濃度DEHP環(huán)境的人群其血清游離睪酮水平顯著下降，可知血液中類固醇激素水平與DEHP的暴露量相關(guān)。正常情況下，睪丸間質(zhì)細(xì)胞是合成和分泌雄激素的主要細(xì)胞。Pan等[33]研究顯示，長時(shí)間暴露于低濃度DEHP會損害睪丸間質(zhì)細(xì)胞的激素合成功能，并誘發(fā)細(xì)胞異型性增生，最終導(dǎo)致惡性腫瘤發(fā)生。

6 芹菜油對DEHP致睪丸損傷的保護(hù)作用

DEHP致睪丸損傷主要通過影響超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽過氧化物酶（GPX）和過氧化氫酶（CAT）和細(xì)胞色素p450芳香化酶（CYP19）基因表達(dá)實(shí)現(xiàn)，Madkour[34]的研究中對大鼠應(yīng)用DEHP和芹菜油進(jìn)行干預(yù)，實(shí)驗(yàn)組大鼠的睪丸萎縮、精子數(shù)量、精子畸形的比例、雄性大鼠血清睪酮水平、FSH、LH和雌二醇含量、SOD、GPX和CAT水平、芳香化酶基因的表達(dá)等方面與對照組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。給大鼠口服芹菜油能夠緩解DEHP的生殖毒性，主要表現(xiàn)在體重和睪丸重量增加，精子數(shù)量、質(zhì)量和活力增加，精子異常減少，抗氧化酶減少，血中睪酮的和其他激素水平增高，CYP19基因表達(dá)增加。芹菜油能夠治療DEHP所導(dǎo)致生殖系統(tǒng)損傷，可作為一種潛在的治療策略，對抗DEHP的生殖毒性。

7 硒對DEHP致睪丸損傷的保護(hù)作用

最近提出的氧化應(yīng)激機(jī)制也是DEHP產(chǎn)生雄性生殖毒性的重要因素之一。氧化應(yīng)激是機(jī)體ROS和抗氧化防御機(jī)制之間失去平衡所致。氧化應(yīng)激和ROS在調(diào)節(jié)一些生理功能中起重要作用，但也可造成細(xì)胞損傷和凋亡。線粒體膜去極化，更高水平的活性氧（ROS）和更強(qiáng)的脂質(zhì)過氧化作用，這些因素可能是導(dǎo)致男性不育的主要原因。睪丸支持細(xì)胞的細(xì)胞骨架由微管、微絲和中間絲組成。在一個(gè)硒元素和DEHP作為干預(yù)因素的研究中，暴露于DEHP可使睪丸支持細(xì)胞內(nèi)波形蛋白纖維破壞和溶解，還可誘導(dǎo)生精細(xì)胞發(fā)生凋亡；缺硒且暴露于DEHP的實(shí)驗(yàn)組與正常硒飲食且未暴露DEHP的對照組相比，睪丸支持細(xì)胞波形蛋白纖維的破壞更為明顯，生精細(xì)胞損害更嚴(yán)重，凋亡大量增加（高于對照組近25倍）[35]。硒元素是細(xì)胞內(nèi)抗氧化防御的重要組成部分，這一結(jié)果也間接地為氧化應(yīng)激機(jī)制提供了證據(jù)。另一方面，體外睪丸支持細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)表明DEHP或MEHP都不會減少睪丸支持細(xì)胞的數(shù)量，但會影響其功能[36]。潘亮等[37]從妊娠日起以10、100、500mg/（kg·d）濃度DEHP對雌性Wistar大鼠連續(xù)灌胃染毒至孕19d，測定睪丸SOD水平，該研究提示隨著DEHP濃度增加，SOD水平降低。500mg/（kg·d）DEHP組SOD水平與對照組相比，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.05），提示DEHP胚胎期暴露可增加大鼠睪丸組織的脂質(zhì)過氧化水平，這是DEHP致雄性仔鼠生殖發(fā)育毒性的可能機(jī)制之一。

8 結(jié)論

DEHP作為一種EDCs，對男性生殖系統(tǒng)具有損傷作用明顯，可以導(dǎo)致男性不育癥發(fā)生。DEHP的主要靶細(xì)胞是睪丸間質(zhì)細(xì)胞、支持細(xì)胞及生精上皮，對雄性生殖系統(tǒng)的各個(gè)階段產(chǎn)生影響，干擾體內(nèi)正常代謝調(diào)節(jié)。目前增塑劑使用量和應(yīng)用范圍越來越大，人們在日常生活中接觸DEHP越來越多，對健康造成嚴(yán)重危害。但是，目前對于DEHP生殖毒性的劑量-效應(yīng)關(guān)系的研究還主要局限于動物實(shí)驗(yàn)，在人群中僅僅通過流行病學(xué)調(diào)查證實(shí)。進(jìn)一步研究應(yīng)主要針對DEHP對人體的具體損害機(jī)制及相關(guān)藥物的保護(hù)作用，為男性不育癥的研究提供參考，同時(shí)也要通過法律法規(guī)來約束DEHP的使用，使之對人類健康的影響降到最低。

[1]Joffe M．Semen quality analysis and the idea of normal fertility[J]．Asian J Androl,2010,12(1):79-82．

[2]Corrales J J,Cordero M,Galindo P,et al．Trends in semen quality in a non-industrialized population from the Salamanca area,Spain, during the last 30 years[J]．Med Clin(Barc),2011,136(7):277-283．

[3]Toppari J,Larsen J C,Christiansen P,et al．Male reproductive health and environmental xenoestrongens[J]．Environ Health Perspect,1996,104(Suppl 4):741-803．

[4]Li M,Qiu L,Zhang Y,et al．Dose-related effect by maternal exposure to di-(2-ethylhexyl)phthalate plasticizer on inducing hypospadiac male rats[J]．Environ Toxicol Pharmacol,2013,35(1): 55-60．

[5]Kavlock R J,Daston G P,DeRosa C,et al．Research needs for the risk assessment of health and environmental effects of endocrine disruptors:a report of the U．S．EPA-sponsored workshop[J]．Environ Health Perspect,1996,104(Suppl 4):715-740．

[6]Lagos-Cabré R,Moreno R D．Contribution of environmental pollutants to male infertily:a working model of germ cell apoptosis induced by plasticizers[J]．Biol Res,2012,45(1):5-14．

[7]Singh S,Li S S．Bisphenol A and phthalates exhibit similar toxicogenomics and health effect[J]．Gene,2012,494(1):85-91．

[8]Schettler T．Human exposure to phthalates via consumer products [J]．Int J Androl,2006,29(1):134-139．

[9]李苗,張育輝．DEHP對中國林蛙精巢中StAR、CYP17和CYP19基因表達(dá)的影響[J]．生態(tài)學(xué)雜志,2012,31(7):1785-1790．

[10]Swan S H．Environment phthalate exposure in relation to reproductive outcomes and other health endpoints in humans[J]．Environ Res,2008,108(2):177-184．

[11]Fromme H,Gruber L,Schlummer M,et al．Intake of phthalates and di(2-ethylhexyl)adipate:results of the Integrated Exposure Assessment Survey based on duplicate diet samples and biomonitoring data[J]．Environ Int,2007,33(8):1012-1020．

[12]Huang P C,Kuo P L,Chou Y Y,et al．Association between prenatal exposure to phthalates and the health of newborns[J]．Environ Int,2009,35(1):14-20．

[13]Gao D J,Gao B,Zhu Z J,et al．Correlation between di-2-ethylhexyl phthalate and idiopathic oligoasthenospermia[J]．Nat J Andro,2014,20(8):702-705．

[14]Pant N,Pant A,Shukla M,et al．Environmental and experimental exposure of phthalate esters:The toxicological consequence on human sperm[J]．Hum Exp Toxicol,2011,30(6):507-514．

[15]張晶．酞酸酯類對男性人群生殖毒性及果蠅遺傳毒性影響的研究[D]．上海:同濟(jì)大學(xué),2009．

[16]Zhang Y H,Zheng L X,Chen B H．Phthalate exposure and human semen quality in Shanghai:a cross-sectional study[J]．Biomed Environ Sci,2006,19(3):205-209．

[17]Rozati R,Reddy P P,Reddanna P,et al．Role of environmental estrogens in the deterioration of male factor fertility[J]．Fertil Steril, 2002,78(6):1187-1194．

[18]Pant N,Shukla M,Kumar Patel D,et al．Correlation of phthalate exposures with semen quality[J]．Toxicol Appl Pharmacol,2008, 231(1):112-116．

[19]Li S G,Dai J C,Zhang L Q,et al．An association of elevated serum prolactin with phthalate exposure in adult men[J]．Biomed Environ Sci,2011,24(1):31-39．

[20]Joensen U N,Frederiksen H,Jensen M B,et al．Phthalate excretion pattern and testicular function:a study of 881 healthy Danish men[J]．Environ Health Perspect,2012,120(10):1397-1403．

[21]Pocar P,Fiandanese N,Secchi C,et al．Exposure to di(2-ethylhexyl)phthalate(DEHP)in utero and during lactation causes long-term pituitary-gonadal axis disruption in male and female mouse offspring[J]．Endocrinology,2012,153(2):937-948．

[22]鄭海紅,陳祥義,陳玲,等．DEHP對新生雄性仔鼠毒性作用的實(shí)驗(yàn)研究[J]．醫(yī)學(xué)研究雜志,2012,41(1):28-33．

[23]Yao P L,Lin Y C,Richburg J H．TNF alpha-mediated disruption of spermatogenesis in response to Sertoli cell injury in rodents is partiallyregulated byMMP2[J]．Biol Reprod,2009,80(3):581-589．[24]Yao P L,Lin Y C,Richburg J H．Mono-（2-ethylhexyl）phthalate induced disruption of junctional complexes in the seminiferous epithelium of the rodent testis is mediated by MMP2[J]．Biol Reprod,2010,82(3):516-527．

[25]Suzuki Y,Yoshinaga J,Mizumoto Y,et al．Foetal exposure to phthalate esters and anogenital distance in male newborns[J]．Int J Androl,2012,35(3):236-244．

[26]Awal M A,Kurohmaru M,Andriana B B,et al．Mono-(2-ethylhexyl)phthalate(MEHP)induces testicular alterations in male guinea pigs at prepubertal stage[J]．Tissue Cell,2005,37(3): 167-175．

[27]Skinner M K．Sertoli cell secreted regulatori factors[M]．New York: Elsevier,2005:107-121．

[28]Wang R S,Yeh S,Tzeng C R,et al．Androgen receptor roles in spermatogenesis and fertility:lessons from testicular cell-specific androgen receptor knockout mice[J]．Endocr Rev,2009,30 (2):119-132．

[29]Howdeshell K L,Wilson V S,Furr J,et al．A mixture of five phthalate esters inhibits fetal testicular testerone production in the sprage-dawley rat in a cumulative,does-additive manner[J]．Toxicol Sci,2008,105(1):153-165．

[30]Ge R S,Chen G R,Dong Q,et al．Biphasic effects of postnatal exposure to diethyl hexylphthalate on the timing of puberty in male rats[J]．J Androl,2007,28(4):513-520．

[31]Desdoits-Lethimonier C,Albert O,Le Bizec B,et al．Human testis steroidogenesis is inhibited by phthalates[J]．Hum Reprod,2012,27(5):1451-1459．

[32]Mendiola J,Meeker J D,Jorgensen N,et al．Urinary concentrations of di(2-ethylhexyl)phthalate metabolites and serum reproductive hormones:pooled analysis of fertile and infertile men[J]．J Androl,2012,33(3):488-498．

[33]Pan G,Hanaoka T,Yu L,et al．Associations between hazard indices of di-n-butylphthalate and di-2-ethylhexylphthalate exposure and serum reproductive hormone levels among occupationally exposed and unexposed Chinese men[J]．Int J Androl, 2011,34(5 Pt 2):e397-406．

[34]Madkour N K．The beneficial role of celery oil in lowering the di (2-ethylhexyl)phthalate induced testicular damage[J]．Toxicol Ind Health,2012,11:1-12．

[35]Erkekoglu P,Zeybek N D,Giray B,et al．The effects of di(2-ethylhexyl)phthalate exposure and selenium nutrition on sertoli cell vimentin structure and germ-cell apoptosis in rat testis[J]．Arch Environ Contam Toxicol,2012,62(3):539-547．

[37]潘亮,葉麗杰,劉秋芳,等．鄰苯二甲酸二(2－乙基)己酯宮內(nèi)暴露對子代大鼠睪丸發(fā)育及銅鋅微量元素的影響[J]．中國工業(yè)醫(yī)學(xué)雜志,2013, 26(2):108-109．

（本文編輯：胥昀）

“第三屆國際肝膽胰外科及微創(chuàng)外科大會”通知

由浙江省人民醫(yī)院和浙江省抗癌協(xié)會共同主辦，《中華醫(yī)學(xué)雜志》、《中華外科雜志》、《中華消化外科雜志》、《中華普通外科雜志》、《中華肝膽外科雜志》、《中國實(shí)用外科雜志》、《中國微創(chuàng)外科雜志》、《浙江醫(yī)學(xué)》（排名不分先后）編輯部共同協(xié)辦的第三屆國際肝膽胰外科和微創(chuàng)外科大會將于2014年12月12日至14日在杭州舉行。

本次大會將邀請美國、日本、新加坡、印度、香港、臺灣和中國大陸著名肝膽胰外科專家、學(xué)者、院士就肝膽胰外科發(fā)展的熱點(diǎn)、難點(diǎn)和發(fā)展趨勢進(jìn)行研討。會議內(nèi)容：大會學(xué)術(shù)報(bào)告、全國手術(shù)視頻總決賽和手術(shù)演示。手術(shù)演示內(nèi)容：達(dá)芬奇機(jī)器人肝膽胰外科手術(shù)、腹腔鏡胰十二指腸切除術(shù)、肝膽胰腫瘤納米刀治療、復(fù)雜肝膽胰外科手術(shù)。歡迎廣大外科同道積極投稿和參會。

征文要求：肝膽胰外科、微創(chuàng)外科的基礎(chǔ)和臨床研究。形式：手術(shù)視屏（光盤，錄像格式AVI、MPEG）、文字（word）或PPT三種形式。入選優(yōu)秀論文或視頻將在會上報(bào)告。注冊代表獲國家級繼續(xù)醫(yī)學(xué)教育學(xué)分5分。

征文截止日期：2014年11月15日。會議聯(lián)系人：吳嘉（電話15858256026），張宇華（電話13588033123）。征文電子版發(fā)至郵箱：inthbp@163.com或zyhemail@hotmail.com或登陸網(wǎng)站注冊：www.inthbp.com

本刊編輯部

《浙江醫(yī)學(xué)》“病例討論”欄目征稿

根據(jù)廣大讀者的建議，本刊自2010年第7期起開辟“病例討論”欄目，論文結(jié)構(gòu)分為“病例摘要”和“討論”兩部分，以期通過對疑難、復(fù)雜或罕見病例的介紹和討論，交流臨床工作經(jīng)驗(yàn)，幫助廣大臨床醫(yī)師掌握科學(xué)的臨床思維方式，提高各專科和多學(xué)科的綜合分析判斷能力，進(jìn)而提高醫(yī)療水平?，F(xiàn)特向廣大臨床醫(yī)師征集相關(guān)病例，具體要求如下。

1病例選擇 （1）疑難病例，特別是涉及多學(xué)科、多領(lǐng)域的疑難病例；（2）診斷明確，但病情危重和（或）治療棘手的病例；（3）臨床較罕見的病例。以上病例均需最終獲得明確診斷或成功治療，且臨床資料齊全，并能提供實(shí)驗(yàn)室、影像學(xué)和（或）病理確診依據(jù)。

2寫作格式和要求（1）病歷摘要：分段敘述患者的簡要病史（包括主訴、現(xiàn)病史、既往史等）、入院后體檢情況、輔助檢查結(jié)果、入院后治療方案及病情變化等內(nèi)容；（2）討論：分段記錄各級或各科或各院醫(yī)師對該病例的特點(diǎn)、診斷、鑒別診斷、進(jìn)一步輔助檢查和治療方案等方面的分析，若為罕見病，則需介紹目前國內(nèi)外關(guān)于該病診治方面的最新進(jìn)展；（3）列出相關(guān)的國內(nèi)外主要參考文獻(xiàn)；（4）全文字?jǐn)?shù)在3 000字左右。

3投稿注意事項(xiàng) 投稿時(shí)請務(wù)必在稿件末頁留下第一作者手機(jī)號碼和電子郵箱地址，同時(shí)附上單位證明（證明該病例所有資料屬實(shí)，無一稿兩投，無涉及保密等情況）。

本刊編輯部

2014-07-14）

233030 蚌埠醫(yī)學(xué)院（郭浩，系碩士研究生，現(xiàn)在上海市中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院泌尿外科實(shí)習(xí)）；上海市中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院泌尿外科（劉劍新，系蚌埠醫(yī)學(xué)院碩士研究生導(dǎo)師）

劉劍新，E-mail:ljx6898@sina.com