早產(chǎn)兒缺氧缺血性腦病與血清Tau蛋白及NSE的相關(guān)性研究

索有梅，辛 穎

(1.甘肅省武威市人民醫(yī)院兒科；2.甘肅省武威職業(yè)學(xué)院，武威 733000)

早產(chǎn)兒因生產(chǎn)時出現(xiàn)窒息而導(dǎo)致腦的缺氧缺血性損害稱為缺氧缺血性腦病(hypoxic-ischemic encephalopathy，HIE)，其死亡率是正常新生兒的10倍，并且可發(fā)生智力低下、腦癱等神經(jīng)系統(tǒng)后遺癥[1]。腦脊液中的Tau蛋白由于腦損傷會明顯升高，神經(jīng)元支架蛋白Tau蛋白被降解后釋入血液中，檢測血清中Tau蛋白含量，可稱為診斷腦損傷的特異性指標[2]；神經(jīng)元特異性烯醇化酶(neuron-specific enolase，NSE)是中樞神經(jīng)特異性蛋白質(zhì),是反映神經(jīng)細胞損害最敏感的指標之一, 可作為神經(jīng)元損傷的標志物[3]。這兩者結(jié)合可對新生兒缺氧缺血性腦損傷起到診斷性意義，但是國內(nèi)尚未見到血清Tau蛋白和NSE與早產(chǎn)兒缺氧缺血性腦病的相關(guān)報道。本研究通過對血清Tau蛋白和NSE與早產(chǎn)兒缺氧缺血性腦病相關(guān)性分析，旨在為圍生期早產(chǎn)兒窒息與腦損傷的診斷提供參考依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2010年至2013年我院兒科住院部的患缺氧缺血性腦病的早產(chǎn)兒42例，其中28例為HIE早產(chǎn)兒為觀察組，胎齡(33.6±1.2)周,出生體質(zhì)量(1 643.8±125.3)g, 輕度7例,中度15例,恢復(fù)期6例；14例為正常早產(chǎn)兒作為對照組，胎齡(34.6±1.6)周,出生體質(zhì)量(1 865.8±143.3)g。兩組在胎齡、體質(zhì)量、性別方面比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2 納入標準 中華醫(yī)學(xué)會兒科學(xué)分會新生兒學(xué)組于2004年11 月修訂的標準[4],包括:①有明確的可導(dǎo)致胎兒宮內(nèi)窘迫的異常產(chǎn)科病史,以及嚴重的胎兒宮內(nèi)窘迫表現(xiàn)(胎心< 100次,持續(xù)5 min 以上和(或)羊水Ⅲ度污染),或在分娩過程中有明顯窒息史; ②出生時有重度窒息,指Apgar 評分1 min <3分, 并延續(xù)至5 min時仍<5分，或出生時臍動脈血氣pH < 7；③出生后不久出現(xiàn)神經(jīng)系統(tǒng)癥狀, 并持續(xù)24 h 以上; ④排除電解質(zhì)紊亂、顱內(nèi)出血和產(chǎn)傷等原因引起的抽搐,以及宮內(nèi)感染、遺傳代謝性疾病和其他先天性疾病所引起的腦損傷。

1.3 排除標準 ①宮內(nèi)感染、先天畸形；②產(chǎn)婦有子宮畸形、妊高征、心臟?。虎塾形鼰熓?、吸毒史、被動吸煙史。

1.4 操作方法 兩組早產(chǎn)兒生后1～3 d，使用無菌方法在橈動脈處抽取4 ml動脈血，取2 ml采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測定血清NSE?？崭共杉o脈血, 標本不抗凝、無溶血, 經(jīng)離心取血清測定。取2 ml血置于肝素抗凝管中抗凝，以3 000 r/min離心10 min，提取血清，裝于1 ml EP管中，放于超低溫冰箱中保存，測血清Tau蛋白含量，同樣采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測定血清，用酶標記法進行封閉、清洗，加入顯色劑避光保存15 min測其濃度。

2 結(jié) 果

2.1 兩組NSE檢測結(jié)果比較 觀察組NSE水平明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(27.01±2.01 U/mlvs10.28±2.54 U/ml,P<0.05)，說明患有HIE的早產(chǎn)兒血清中NSE水平高于正常組早產(chǎn)兒。

2.2 兩組血清Tau蛋白水平比較 患HIE早產(chǎn)兒血清Tau蛋白水平明顯高于對照組，結(jié)果具有統(tǒng)計學(xué)意義(6.84±4.47 ng/mlvs3.08±2.24 ng/ml,P<0.05)，提示血清Tau蛋白水平增高，早產(chǎn)兒患HIE的可能性較大。輕度組、中度組HIE早產(chǎn)兒血清Tau蛋白水平與對照組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(4.68±2.16 ng/mlvs3.08±2.24 ng/ml，5.46±1.89 ng/mlvs3.08±2.24 ng/ml,P均<0.05)；恢復(fù)期HIE早產(chǎn)兒Tau蛋白水平與輕度組、中度組HIE早產(chǎn)兒比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(3.76±2.12 ng/mlvs4.68±2.16 ng/ml，3.76±2.12 ng/mlvs5.46±1.89 ng/ml，P均<0.05)，說明HIE病情的轉(zhuǎn)歸通過Tau蛋白水平變化具有一致性。

3 討 論

由于早產(chǎn)兒身體器官發(fā)育尚未成熟，缺氧缺血性腦病在早產(chǎn)兒中更易發(fā)生，嚴重威脅早產(chǎn)兒的存活率及生存質(zhì)量。因早產(chǎn)兒HIE早期臨床特征存在不明顯性，常常被醫(yī)務(wù)工作者忽略，因此早期對早產(chǎn)兒HIE作出診斷，并給予早期干預(yù)治療，具有重要的臨床意義。

血清中Tau蛋白作為腦損傷神經(jīng)系統(tǒng)的重要指標，對其診斷的準確性提供了一種依據(jù)，Tau蛋白在中樞神經(jīng)系統(tǒng)正常的狀態(tài)下，能與微管蛋白結(jié)合形成微管，起到維持細胞形態(tài)，促進軸突運輸?shù)墓δ躘5]。實驗表明早產(chǎn)鼠與新生鼠大腦中只含有低分子量的Tau蛋白，Tau蛋白表達量多[6]。早產(chǎn)兒缺氧缺血性腦病是新生兒神經(jīng)功能障礙的主要病因，缺氧容易導(dǎo)致細胞膜的損傷，使膜的通透性升高，腦組織的缺氧缺血使Tau蛋白異常磷酸化，降低了微管結(jié)合的能力，同時阻礙了與微管相結(jié)合的有關(guān)蛋白，微管集聚使細胞骨架穩(wěn)定性降低，加速細胞凋亡[7]，神經(jīng)元被破壞后Tau蛋白被釋放，通過對其含量的檢測，可以了解神經(jīng)元被破壞的情況。本研究發(fā)現(xiàn)血清Tau蛋白水平增高，早產(chǎn)兒患HIE的可能性較大，血清Tau蛋白變化與腦損傷程度成正相關(guān)，HIE病情的轉(zhuǎn)歸通過Tau蛋白水平變化具有一致性。因此Tau蛋白含量可以協(xié)助診斷早產(chǎn)兒缺血缺氧性腦病輕重等級，成為診斷HIE的敏感型指標之一。

NSE是中樞神經(jīng)系統(tǒng)受損的標記物[8], 特異性地存在于神經(jīng)元和神經(jīng)內(nèi)分泌細胞的胞漿內(nèi)。當(dāng)新生兒窒息缺氧導(dǎo)致大腦神經(jīng)元損傷和壞死時, NSE可釋放進入血液和腦脊液中, 使血清和腦脊液中含量增加, 其含量可反應(yīng)神經(jīng)元死亡的程度, 對早期直接而準確了解腦損傷程度具有重要的臨床意義[9]。從本文結(jié)果可以看出NSE含量與早產(chǎn)兒腦損傷的程度呈正相關(guān)性。

綜上所述，Tau蛋白含量在早產(chǎn)兒缺血缺氧性腦病可以成為判定腦損傷及神經(jīng)損害程度的指標之一，NSE是判斷早產(chǎn)兒窒息后腦損傷程度及預(yù)后較靈敏而可靠的生化指標，兩者結(jié)合能比較有效的反應(yīng)腦損傷及預(yù)后的情況，對早產(chǎn)兒缺氧缺血性腦病的診斷及預(yù)后具有重要的臨床意義。

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