脂肪水解與脂肪信號(hào)

(南華大學(xué)醫(yī)學(xué)院生理學(xué)教研室,湖南衡陽421001)

脂肪水解是指甘油三酯(triacylglycerols,TG)(即通常所謂的脂肪)的水解。根據(jù)水解部位不同,脂肪水解分為胃腸道脂肪水解、血管脂肪水解和細(xì)胞內(nèi)脂肪水解,它們分別介導(dǎo)飲食脂肪的分解代謝、血液中脂蛋白相關(guān)TG的水解、細(xì)胞內(nèi)脂滴(lipid droplets,LDs)TG的降解。脂肪水解具有普遍性,幾乎存在于所有組織和細(xì)胞,尤其是儲(chǔ)存TG的脂肪組織。TGs水解產(chǎn)生非酯化脂肪酸,常用作能量底物、脂質(zhì)和膜合成的必需前體物及細(xì)胞信號(hào)過程的介導(dǎo)因子,在脂質(zhì)和能量穩(wěn)態(tài)的維持中發(fā)揮重要作用。近幾年來在脂肪水解方面取得了一些重要新發(fā)現(xiàn),包括脂肪組織甘油三酯脂肪酶(adipose triglyceride lipase,ATGL)、ATGL輔激活因子比較基因鑒別-58(comparative gene identification-58,CGI-58)及ATGL抑制因子G0/G1轉(zhuǎn)換蛋白2(G0/G1 switch protein 2,G0S2)等。新發(fā)現(xiàn)進(jìn)一步加深了我們對(duì)脂肪水解的理解及其與細(xì)胞信號(hào)和疾病之間的聯(lián)系。

1 脂肪水解

1.1 中性脂肪酶介導(dǎo)的脂肪水解

中性脂肪酶催化水解TG釋放非酯化脂肪酸(fatty acids,FA)和甘油需要三個(gè)保守過程,主要涉及三種不同的脂肪酶。首先,在ATGL的催化作用下TG轉(zhuǎn)化為二?；视王?diacylglycerols,DG);其次,DG在HSL作用下水解生成單酰基甘油酯(monoacylglycerols,MG);最后,MG脂肪酶(MG lipase,MGL)水解MG。

1.1.1 ATGL及其調(diào)節(jié) 2004年三組科學(xué)家[1-3]獨(dú)立鑒別出同一種TG水解酶,分別稱為ATGL[1]、desnutrin[2]和磷脂酶 A2ζ[3]。ATGL屬于含 patatin結(jié)構(gòu)域蛋白家族,其官方命名為含patatin樣磷脂酶結(jié)構(gòu)域蛋白A2(patatin-like phospholipase domain-containing protein A2,PNPLA2)。

ATGL表達(dá)和酶活性的調(diào)節(jié)是復(fù)雜的[4]。過氧化物酶體增殖物激活受體(peroxisome proliferatoractivated receptor,PPAR)激動(dòng)劑、糖皮質(zhì)激素和空腹可使ATGL mRNA表達(dá)升高,而胰島素和食物攝入可降低其表達(dá)。研究表明哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)復(fù)合物 1-依賴信號(hào)可降低ATGL mRNA水平[5]。沉默調(diào)節(jié)因子1(Sirtuin type 1,SIRT1)-介導(dǎo)去乙?；罨骖^框蛋白(Forkhead box protein O1,FoxO1)可增加ATGL mRNA水平并刺激脂肪水解[6]。

ATGL發(fā)揮完全水解酶活性需要一種輔激活蛋白,即比較基因鑒別-58(comparative gene identification-58,CGI-58)[7]。LD-相關(guān)蛋白參與CGI-58介導(dǎo)調(diào)節(jié)ATGL。在非激素刺激的白色和棕色脂肪細(xì)胞中,perilipin-1與CGI-58相互作用,阻止它與ATGL結(jié)合,因而誘導(dǎo)ATGL活性。一旦受到β腎上腺素刺激,蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)使perilipin-1多個(gè)位點(diǎn)磷酸化(包含S517),釋放CGI-58,誘導(dǎo)ATGL活性[8]。最新數(shù)據(jù)表明perilipin5參與LD和線粒體的相互作用,并抑制ATGL介導(dǎo)TG水解[9]。

此外,研究顯示G0S2作為ATGL的一種特殊肽抑制劑,調(diào)節(jié)其活性[10]。有報(bào)道色素上皮細(xì)胞源因子(pigment epithelium-derived factor,PEDF)通過ATGL誘導(dǎo)脂肪組織、肌肉和肝臟的TG水解[11]。盡管這種機(jī)制仍有待于闡明,但PEDF介導(dǎo)ATGL的激活可能涉及到胰島素抵抗、肝硬化的病理發(fā)生發(fā)展。

1.1.2 激素敏感脂肪酶(hormone-sensitive llpase,HSL)及其調(diào)節(jié) HSL是脂肪組織和許多非脂肪組織儲(chǔ)存脂肪分解代謝的關(guān)鍵限速酶。功能研究描繪出HSL的N端脂質(zhì)結(jié)合區(qū)域、α/β水解酶折疊結(jié)構(gòu)域包括催化活性的三元結(jié)構(gòu)、調(diào)節(jié)組件包括所有已知磷酸化位點(diǎn)[12]。HSL主要水解DG,其次也還水解許多其他脂質(zhì)(如TG、MG、膽固醇酯和視黃酯)和短鏈碳酸酯的酯鍵[13]。

HSL與ATGL的調(diào)節(jié)具有許多相似性。在脂肪組織中,β-腎上腺素激動(dòng)劑可強(qiáng)烈誘導(dǎo)HSL酶活性,而胰島素則具有強(qiáng)烈的抑制作用。然而這兩種脂肪酶的酶調(diào)節(jié)機(jī)制則顯著不同。HSL主要受PKA催化磷酸化調(diào)節(jié),此外還受其他激酶如AMPK、細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶、糖原合酶-4和Ca2+/鈣調(diào)蛋白依賴性激酶磷酸化調(diào)節(jié)[4]。HSL酶活性的完全激活,需要perilipin-1介導(dǎo)其進(jìn)入LD。PKA磷酸化perilipin-1的6個(gè)共有序列絲氨酸殘基,HSL結(jié)合到perilipin-1的N端區(qū)域,因而獲得進(jìn)入LD的途徑[14]。

1.1.3 MGL及其調(diào)節(jié) MGL被認(rèn)為是MG降解的限速酶。MG來源于細(xì)胞外TG的水解(LPL介導(dǎo))、細(xì)胞內(nèi)TG的水解(ATGL和HSL介導(dǎo))和細(xì)胞內(nèi)磷脂的水解(磷脂酶C、膜相關(guān)DG脂肪酶α和β介導(dǎo))。最新研究結(jié)果表明MGL的晶體結(jié)構(gòu)問題已得到解決[15]。這種酶具有典型的α/β水解酶折疊,二聚物晶體結(jié)構(gòu),含有一個(gè)抵達(dá)催化位點(diǎn)的寬闊疏水途徑。一個(gè)非極性螺旋結(jié)構(gòu)域lid覆蓋于活性位點(diǎn),并介導(dǎo)MGL與膜結(jié)構(gòu)的相互作用和底物的募集。

1.2 自噬和酸性脂肪酶介導(dǎo)脂肪水解

除中性脂肪酶介導(dǎo)脂肪水解外,溶酶體中的主要酸性脂肪酶(lysosomal acid llpase,LAL)也可催化水解TG和膽固醇酯。LAL主要催化降解脂蛋白相關(guān)脂質(zhì)及它們受體介導(dǎo)的溶酶體內(nèi)吞和融合。大分子自噬是一種降解多余或受損細(xì)胞器及細(xì)胞質(zhì)內(nèi)涵物如誤折疊蛋白聚合物的溶酶體途徑[16]。在高脂飼喂肥胖小鼠中,Singh等[17]發(fā)現(xiàn)LD的自噬需要禁食誘導(dǎo)鼠類肝臟和肝細(xì)胞的脂肪水解,刪除自噬相關(guān)蛋白7(autophagy-related protein 7,Atg-7)可引起肝臟脂質(zhì)蓄積。Hotamisligil及其同事[18]報(bào)道ob/ob小鼠肝臟Atg7表達(dá)嚴(yán)重受損而且肝臟脂肪變性,特異性恢復(fù)肝臟Atg7表達(dá)可減少肝臟脂質(zhì)蓄積。Atg-7缺陷小鼠脂肪組織的分析結(jié)果顯示自噬在脂質(zhì)生成也發(fā)揮作用[19]?？傊?自噬可能在脂質(zhì)代謝中具有多種作用,與細(xì)胞或組織類型有關(guān)。在肝臟中,高脂飲食或長時(shí)饑餓條件下自噬促進(jìn)脂肪分解。相反,在正常饑餓情況下自噬可能會(huì)促進(jìn)脂質(zhì)堆積。在WAT中自噬似乎參與脂肪和脂肪生成,但不參與脂肪分解。自噬在其他具有脂肪水解活性的組織如肌肉、巨噬細(xì)胞和生成固醇類細(xì)胞中的降解脂肪的作用仍有待明確。

2 脂肪水解在脂質(zhì)介導(dǎo)信號(hào)中的作用

當(dāng)人們注意到細(xì)胞TG含量增加與骨骼肌、肝臟胰島素抵抗強(qiáng)烈相關(guān)時(shí),中性脂質(zhì)代謝在信號(hào)獲取中的作用引起了研究者的極大興趣[20]。TG的相對(duì)惰性性質(zhì)使得它們不可能直接干預(yù)胰島素信號(hào),提示可能其水解產(chǎn)物參與了胰島素信號(hào)的調(diào)節(jié)。研究顯示缺乏ATGL的小鼠雖然可在骨骼肌、心肌組織、肝臟、腎臟和巨噬細(xì)胞等多種組織細(xì)胞中蓄積大量脂肪,但顯示胰島素敏感性增加[21]。這些發(fā)現(xiàn)表明脂肪水解與細(xì)胞信號(hào)介導(dǎo)密切相關(guān)。

2.1 脂肪水解源性FAs與PPAR信號(hào)

除了作為高效能量物質(zhì)和其他脂質(zhì)前體外,FAs還直接參與細(xì)胞信號(hào)通路和調(diào)節(jié)基因轉(zhuǎn)錄。FAs或FA衍生物可結(jié)合和激活核受體轉(zhuǎn)錄因子家族成員,控制涉及脂質(zhì)和能量穩(wěn)態(tài)、炎癥的基因表達(dá)。目前研究最好的FA激活核受體家族成員為PPARs。PPARs的完整轉(zhuǎn)錄活性需要結(jié)合同源脂質(zhì)配體,與其他核受體(視黃醇類X受體,retinoid-X receptor,RXR)形成異二聚體,并與許多轉(zhuǎn)錄輔激活因子包括PPARγ輔激活因子1(PPARg coactivator-1,PGC-1)發(fā)生相互作用。

FAs參與源自外源性FAs或內(nèi)源性FAs的信號(hào)。最近有研究[21]表明ATGL介導(dǎo)細(xì)胞內(nèi)甘油三酯水解參與PPAR激活所需脂質(zhì)配體的生成。脂肪水解受損的ATGL缺陷小鼠在氧化性組織如肝臟、巨噬細(xì)胞和BAT中顯示嚴(yán)重的PPARα信號(hào)缺陷,心肌組織中尤為明顯。PPARα靶基因表達(dá)減少的ATGL敲除動(dòng)物在出生數(shù)月后即可引起嚴(yán)重的線粒體功能障礙、底物氧化和氧化磷酸化(oxidative phosphorylation,OXPHOS)速率降低和大量心肌脂質(zhì)堆積以及致命的心肌病。HSL缺陷同樣也與PPARα靶基因表達(dá)降低相關(guān),但不會(huì)產(chǎn)生明顯的心肌表型,提示ATGL活性在PPARα配體和配體前體物生成過程中的特殊重要性。

除了ATGL在PPARα信號(hào)中的工具作用外,這種酶還影響PPARγ功能。Festuccia等[22]的研究結(jié)果顯示羅格列酮介導(dǎo)的PPARγ激活和脂質(zhì)蓄積與大鼠WAT脂肪水解增加有關(guān),而脂肪水解的增加是由ATGL和MGL誘導(dǎo)造成。此外,HSL缺陷小鼠也導(dǎo)致WAT中PPARγ靶基因表達(dá)下調(diào)[23],表明脂肪水解參與PPARγ信號(hào)。

2.2 脂肪水解源FAs與胰島素信號(hào)

已充分證實(shí)血漿和細(xì)胞FA濃度都與胰島素抵抗增加呈正相關(guān)[24]。非酯化FAs尤其是細(xì)胞內(nèi)棕櫚酸濃度的增加可促進(jìn)合成脂毒性脂質(zhì)如神經(jīng)酰胺類,干擾胰島素信號(hào)功能[25]。此外,FAs能直接或間接通過增加活性氧簇物質(zhì)-活化氧化還原敏感絲氨酸激酶,反過來使胰島素反應(yīng)失活[26]。棕櫚油酸大部分是在脂肪組織中通過從頭途徑合成。它在肝臟和肌肉中對(duì)胰島素信號(hào)的作用表明這種FA是一種具有內(nèi)分泌功能的脂質(zhì)激素(lipokine)。此外,據(jù)此可以想象肝臟棕櫚油酸也能以旁分泌的方式促進(jìn)胰島素敏感性。ATGL缺陷小鼠具有較低的血漿FA濃度和較高的胰島素敏感性,支持了減少脂肪水解和低FA水平的保護(hù)性作用。具有低FAs血漿濃度的HSL缺陷小鼠是否也影響胰島素敏感性仍有爭(zhēng)議[27]。

2.3 脂肪水解源性DG與PKC信號(hào)

大約50年前當(dāng)研究者意識(shí)到DG通過激活蛋白激酶C(protein kinase-C,PKC)可影響許多代謝和有絲分裂活性時(shí),就已發(fā)現(xiàn)DG作為第二信使的潛能。只有一種DG立體異構(gòu)1,2-二?；?sn-甘油(1,2-DG)可激活PKCs,而其他的立體異構(gòu)1,3-二?；?sn-甘油(1,3-DG)和 2,3-二?；?sn-甘油(2,3-DG)則缺少這種生物活性[28]。這種酶通過受體型活化C激酶(receptor of activated C kinase,RACK)蛋白被募集至質(zhì)膜時(shí),1,2-DG可激活傳統(tǒng)的和新型的PKC立體異構(gòu)[29]。1,2-DG有三種潛在來源。(1)經(jīng)典信號(hào)1,2-DG來自磷脂酶C(phospholipase C,PLC)介導(dǎo)質(zhì)膜4,5-磷酸磷脂酰肌醇的水解產(chǎn)物。(2)局限于ER膜的DG合成途徑。(3)來自LD相關(guān)TG的ATGL水解產(chǎn)物。ATGL和HSL介導(dǎo)LD中TG水解,均不能生成1,2-DG。此外,LD相關(guān)DG是否會(huì)從LD中解離出來以參與質(zhì)膜PKC的募集和激活,這仍是一個(gè)問題。因而,脂肪水解源性DG不太可能作為信號(hào)介導(dǎo)因子。

2.4 脂肪水解與單?；视王バ盘?hào)

當(dāng)發(fā)現(xiàn)磷脂衍生物MG 2-AG可激活大麻素受體(cannabinoid receptors,CBR)時(shí)就已認(rèn)識(shí)MG的信號(hào)潛能,因而調(diào)節(jié)食物攝入、脂質(zhì)代謝和能量穩(wěn)態(tài)。內(nèi)源性大麻素系統(tǒng)(endocannabinoid system,ECS)是指一組神經(jīng)調(diào)節(jié)脂質(zhì)(內(nèi)源性大麻素類似物,endocannabinoids,ECs)、兩種G蛋白偶聯(lián)受體(G protein-coupled receptors,CBR1 and CBR2)及參與合成和降解ECs的酶[30]。最具典型特征的ECs是N-花生四烯酸乙醇胺(N-arachidonoyl ethanolamine,AEA)和2-AG。

最近采用MGL特異性小分子抑制劑(JZL184)和MGL敲除小鼠進(jìn)行的研究提供了有力的證據(jù),MGL是用長鏈FAs酯化的2-AG和其他MG降解的主要酶。JZL184處理小鼠可誘發(fā)小鼠大麻素類效應(yīng),包括鎮(zhèn)痛、體溫過低和運(yùn)動(dòng)減弱[31]。然而,MGL基因敲除小鼠并不會(huì)導(dǎo)致ECS的過度活化或任何明顯的表型。顯然,當(dāng)動(dòng)物長期飼喂CBR激動(dòng)劑時(shí),大腦2-AG濃度的增加可觸發(fā)抵抗類似于那些已經(jīng)觀察到的調(diào)節(jié)機(jī)制[32]。

雖然MGL缺陷小鼠并不會(huì)產(chǎn)生大麻素類效應(yīng),但MGL活性的缺失實(shí)際上影響了脂肪組織和非脂肪組織的脂肪水解及代謝。對(duì)大腦或外周組織MGL缺陷小鼠的研究將有助于揭示一個(gè)問題:是中樞還是外周效應(yīng)引起胰島素抵抗的減弱。

2.5 脂肪信號(hào)與細(xì)胞周期、癌癥、惡病質(zhì)

在啤酒酵母菌中首次觀察到脂肪水解與有效細(xì)胞周期進(jìn)程相關(guān)。酵母菌表達(dá)3種含patatin結(jié)構(gòu)域的TG脂肪酶(TG lipases,Tgl),家族名稱為Tgl3、4、5[33]。Tgl3和Tgl4的刪除事實(shí)上可廢止所有細(xì)胞TG酶活性并當(dāng)饑餓細(xì)胞一旦進(jìn)食時(shí)可明顯延緩進(jìn)入細(xì)胞分化周期[34]。Tgl4可被細(xì)胞周期蛋白依賴激酶(cyclin-dependent kinase,Cdk1/Cdc28,為哺乳動(dòng)物Cdc2的同源物)磷酸化而激活。同時(shí),Cdk1/Cdc28使磷脂酸磷酸水解酶(phosphatidic acid phosphohydrolase,Pah1)發(fā)生磷酸化而抑制脂肪生成。Tgl4磷酸化和激活是發(fā)生在細(xì)胞分化周期的G1/S過渡期,這與芽發(fā)生一致并需要增加膜脂質(zhì)含量。Pah1磷酸化和失活發(fā)生于細(xì)胞周期的G2/M過渡期,表明細(xì)胞周期中存在一個(gè)窗口期,此期間內(nèi)脂肪生成和脂肪水解的初始步驟也許是并行進(jìn)行的。最近有證據(jù)表明酵母菌細(xì)胞周期調(diào)節(jié)信號(hào)分子(如IP3和含肌醇的神經(jīng)酰胺類分子)的前體物磷脂酰肌醇(phosphatidylinositol,PI),它的合成強(qiáng)烈取決于完整的脂肪水解[35]。因此,細(xì)胞周期調(diào)節(jié)TG脂肪水解也許可提供細(xì)胞分化信號(hào)分子的一個(gè)關(guān)鍵前體物。

最近有研究證實(shí)MGL促進(jìn)哺乳動(dòng)物癌細(xì)胞的致癌性[36]。過度表達(dá)或破壞MGL活性可分別增加或降低癌細(xì)胞的增殖,并且MGL高表達(dá)于侵襲性癌細(xì)胞系或原發(fā)癌。研究還發(fā)現(xiàn)MGL通過代謝作用而非CBR依賴機(jī)制影響腫瘤增殖。MGL缺失可降低細(xì)胞非酯化FA濃度。這些說明MGL影響來自致癌脂質(zhì)代謝物如LPA和PGE2的FA濃度。

脂肪水解信號(hào)也可能參與癌癥相關(guān)惡病質(zhì)(cancer-associated cachexia,CAC)的發(fā)病過程。在最近的一個(gè)研究中,Das等[37]證實(shí)ATGL缺陷小鼠可保護(hù)腫瘤誘導(dǎo)脂肪組織和骨骼肌的丟失。HSL缺陷小鼠同樣也具有類似作用。

3 結(jié)束語

脂肪水解相關(guān)酶和調(diào)節(jié)因子的最新發(fā)現(xiàn)使得以前的脂肪水解觀念需要進(jìn)行修正。脂肪水解過程及其調(diào)節(jié)的復(fù)雜性仍只理解了一部分。脂肪水解產(chǎn)物及中間體在細(xì)胞信號(hào)中的作用已開始引起關(guān)注和重視。將來研究的重要方向包括:(1)更好地理解協(xié)同調(diào)節(jié)適應(yīng)激素激活因子和抑制因子的脂肪水解機(jī)制的過程和生化因子;(2)脂肪水解在許多非脂肪組織的生理功能和脂肪水解機(jī)制的組織特異性差異,3)脂肪水解信號(hào)的特征及他們對(duì)基因轉(zhuǎn)錄、細(xì)胞周期和細(xì)胞生長作用的分子機(jī)制。脂肪酶影響癌細(xì)胞增殖或癌癥相關(guān)惡病質(zhì)的最新案例突出了脂肪水解在人類疾病中的潛在重要作用。脂肪水解相關(guān)酶在正常及病理狀態(tài)的作用及水解產(chǎn)物、中間體在細(xì)胞信號(hào)過程中作用的闡明,對(duì)于理解肥胖及代謝失調(diào)性疾病機(jī)制和尋找新的治療靶點(diǎn)具有重要意義。

[1] Zimmermann R,Strauss JG,Haemmerle G,et al.Fat mobilization in adipose tissue is promoted by adipose triglyceride lipase[J].Science,2004,306(5700):1383-1386.

[2] Villena JA,Roy S,Sarkadi-Nagy E,et al.Desnutrin,an adipocyte gene encoding a novel patatin domain-containing protein,is induced by fasting and glucocorticoids:ectopic expression of desnutrin increases triglyceride hydrolysis[J].J Biol Chem,2004,279(45):47066-47075.

[3] Jenkins CM,Mancuso DJ,Yan W,et al.Identification,cloning,expression,and purification of three novel human calcium-independent phospholipase A2 family members possessing triacylglycerol lipase and acylglycerol transacylase activities[J].J Biol Chem,2004,279(47):48968-48975.

[4] Lass A,Zimmermann R,Oberer M,et al.Lipolysis-a highly regulated multi-enzyme complex mediates the catabolism of cellular fat stores[J].Prog Lipid Res,2011,50(1):14-27.

[5] Chakrabarti P,English T,Shi J,et al.Mammalian target of rapamycin complex 1 suppresses lipolysis,stimulates lipogenesis,and promotes fat storage[J].Diabetes,2010,59(4):775-781.

[6] Chakrabarti P,English T,Karki S,et al.SIRT1 controls lipolysis in adipocytes via FOXO1-mediated expression of ATGL[J].J Lipid Res,2011,52(9):1693-1701.

[7] Lass A,Zimmermann R,Haemmerle G,et al.Adipose triglyceride lipase-mediated lipolysis of cellular fat stores is activated by CGI-58 and defective in Chanarin-Dorfman Syndrome[J].Cell Metab,2006,3(5):309-319.

[8] Granneman JG,Moore HP,Krishnamoorthy R,et al.Perilipin controls lipolysis by regulating the interactions of AB-hydrolase containing 5(Abhd5)and adipose triglyceride lipase(Atgl)[J].J Biol Chem,2009,284(50):34538-34544.

[9] Wang H,Bell M,Sreenivasan U,et al.Unique regulation of adipose triglyceride lipase(ATGL)by perilipin 5,a lipid droplet-associated protein[J].J Biol Chem,2011,286(18):15707-15715.

[10] Yang X,Lu X,Lombes M,et al.The G(0)/G(1)switch gene 2 regulates adipose lipolysis through association with adipose triglyceride lipase[J].Cell Metab,2010,11(3):194-205.

[11] Borg ML,Andrews ZB,Duh EJ,et al.Pigment epitheliumderived factor regulates lipid metabolism via adipose triglyceride lipase[J].Diabetes,2011,60(5):1458-1466.

[12] Holm C,Osterlund T,Laurell H,et al.Molecular mechanisms regulating hormone-sensitive lipase and lipolysis[J].Annu Rev Nutr,2000,20:365-393.

[13] Fredrikson G,Tornqvist H,Belfrage P.Hormone-sensitive lipase and monoacylglycerol lipase are both required for complete degradation of adipocyte triacylglycerol[J].Biochim Biophys Acta,1986,876(2):288-293.

[14] Wang H,Hu L,Dalen K,et al.Activation of hormone-sensitive lipase requires two steps,protein phosphorylation and binding to the PAT-1 domain of lipid droplet coat proteins[J].J Biol Chem,2009,284(46):32116-32125.

[15] Bertrand T,Auge F,Houtmann J,et al.Structural basis for human monoglyceride lipase inhibition[J].J Mol Biol,2010,396(3):663-673.

[16] Levine B,Kroemer G.Autophagy in the pathogenesis of disease[J].Cell,2008,132(1):27-42.

[17] Singh R,Kaushik S,Wang Y,et al.Autophagy regulates lipid metabolism[J].Nature,2009,458(7242):1131-1135.

[18] Yang L,Li P,Fu S,et al.Defective hepatic autophagy in obesity promotes ER stress and causes insulin resistance[J].Cell Metab,2010,11(6):467-478.

[19] Singh R,Xiang Y,Wang Y,et al.Autophagy regulates adipose mass and differentiation in mice[J].J Clin Invest,2009,119(11):3329-3339.

[20] Cohen JC,Horton JD,Hobbs HH.Human fatty liver disease:old questions and new insights[J].Science,2011,332(6037):1519-1523.

[21] Kienesberger PC,Lee D,Pulinilkunnil T,et al.Adipose triglyceride lipase deficiency causes tissue-specific changes in insulin signaling[J].J Biol Chem,2009,284(44):30218-30229.

[22] Festuccia WT,Laplante M,Berthiaume M,et al.PPARgamma agonism increases rat adipose tissue lipolysis,expression of glyceride lipases,and the response of lipolysis to hormonal control[J].Diabetologia,2006,49(10):2427-2436.

[23] Shen WJ,Yu Z,Patel S,et al.Hormone-sensitive lipase modulates adipose metabolism through PPARgamma[J].Biochim Biophys Acta,2011,1811(1):9-16.

[24] Boden G,Shulman GI.Free fatty acids in obesity and type 2 diabetes:defining their role in the development of insulin resistance and beta-cell dysfunction[J].Eur J Clin Invest,2002,32(Suppl 3):14-23.

[25] Summers SA.Sphingolipids and insulin resistance:the five Ws[J].Curr Opin Lipidol,2010,21(2):128-135.

[26] Vallerie SN,Hotamisligil GS.The role of JNK proteins in metabolism[J].Sci Transl Med,2010,2(60):60-65.

[27] Park SY,Kim HJ,Wang S,et al.Hormone-sensitive lipase knockout mice have increased hepatic insulin sensitivity and are protected from short-term diet-induced insulin resistance in skeletal muscle and heart[J].Am J Physiol Endocrinol Metab,2005,289(1):E30-39.

[28] Boni LT,Rando RR.The nature of protein kinase C activation by physically defined phospholipid vesicles and diacylglycerols[J].J Biol Chem,1985,260(19):10819-10825.

[29] Turban S,Hajduch E.Protein kinase C isoforms:mediators of reactive lipid metabolites in the development of insulin resistance[J].FEBS Lett,2011,585(2):269-274.

[30] Di Marzo V.The endocannabinoid system:its general strategy of action,tools for its pharmacological manipulation and potential therapeutic exploitation[J].Pharmacol Res,2009,60(2):77-84.

[31] Long JZ,Li W,Booker L,et al.Selective blockade of 2-arachidonoylglycerol hydrolysis produces cannabinoid behavioral effects[J].Nat Chem Biol,2009,5(1):37-44.

[32] Lichtman AH,Martin BR.Cannabinoid tolerance and dependence[J].Handb Exp Pharmacol,2005(168):691-717.

[33] Czabany T,Athenstaedt K,Daum G.Synthesis,storage and degradation of neutral lipids in yeast[J].Biochim Biophys Acta,2007,1771(3):299-309.

[34] Kurat CF,Natter K,Petschnigg J,et al.Obese yeast:triglyceride lipolysis is functionally conserved from mammals to yeast[J].J Biol Chem,2006,281(1):491-500.

[35] Gaspar ML,Hofbauer HF,Kohlwein SD,et al.Coordination of storage lipid synthesis and membrane biogenesis:evidence for cross-talk between triacylglycerol metabolism and phosphatidylinositol synthesis[J].J Biol Chem,2011,286(3):1696-1708.

[36] Nomura DK,Long JZ,Niessen S,et al.Monoacylglycerol lipase regulates a fatty acid network that promotes cancer pathogenesis[J].Cell,2010,140(1):49-61.

[37] Das SK,Eder S,Schauer S,et al.Adipose triglyceride lipase contributes to cancer-associated cachexia[J].Science,2011,333(6039):233-238.