瘦肉精/羧甲基-β-環(huán)糊精包合物的制備及其表征

■周 婕李穎慧 劉 倩 張振中

(1.鄭州大學(xué)藥學(xué)院，河南鄭州450001；2.藥物關(guān)鍵制備技術(shù)省部共建重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，河南鄭州450001)

鹽酸克倫特羅（結(jié)構(gòu)如圖1所示）是β2-腎上腺素受體激動(dòng)劑，又稱“瘦肉精”。80年代初，意外發(fā)現(xiàn)鹽酸克倫特羅在動(dòng)物體內(nèi)，可以增加瘦肉率、降低脂肪含量。所以，它曾被作為家畜促生長(zhǎng)劑在國(guó)內(nèi)廣泛應(yīng)用。與其它β2-腎上腺素受體激動(dòng)劑相比，鹽酸克倫特羅的生物利用度高，主要存在于動(dòng)物肝臟、皮毛和視網(wǎng)膜中，食用了含有克倫特羅的豬肉可能出現(xiàn)肌肉震顫、心跳過速、心悸、頭暈等癥狀[1-3]。在農(nóng)業(yè)部176號(hào)公告中，明確規(guī)定鹽酸克倫特羅為禁用藥物，不得用于動(dòng)物飼養(yǎng)過程。但在利益的驅(qū)動(dòng)下，違法使用鹽酸克倫特羅的現(xiàn)象仍時(shí)有發(fā)生[4-5]。

β-CD、HP-β-CD、CM-β-CD的包合物研究已見于報(bào)道[6-12]。Lin[13]等制備了β-CD/百里香酚包合物，并對(duì)其包合進(jìn)行了表征研究。目前，還沒有鹽酸克倫特羅與各種CD之間相互作用的文獻(xiàn)報(bào)道。

本文以鹽酸克倫特羅和CM-β-CD用超聲溶解，通過冷凍干燥的方法制成鹽酸克倫特羅/CM-β-CD的包合物，采用顯微熔點(diǎn)測(cè)定、差示掃描量熱分析、紫外光譜、紅外光譜及掃描電鏡的方法對(duì)包合物進(jìn)行表征，初步判定鹽酸克倫特苯環(huán)包含于主體空腔中，驗(yàn)證了包合物的形成，為以后用毛細(xì)管電泳，以CM-β-CD為手性添加劑拆分鹽酸克倫特羅提供了理論依據(jù)，為提高鹽酸克倫特羅檢測(cè)靈敏度提供了可能。

圖1 鹽酸克倫特羅

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器與試劑

顯微熔點(diǎn)測(cè)定儀（上海物理光學(xué)儀器廠）；DSC-60A差示掃描量熱（日本島津公司）；UV-2550紫外分光光度儀（日本島津公司）；紅外光譜儀（美國(guó)Thermo公司）；S-3700掃描電子顯微鏡（日本日立公司）；-80℃超低溫冰箱（美國(guó)Thermo公司）。

鹽酸克倫特羅（中國(guó)藥品生物制品檢定所）；CM-β-CD（湖北遠(yuǎn)成藥業(yè)有限公司）。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

取鹽酸克倫特羅1.56 mg(10.0 mmol)和CM-β-CD 7.7 mg(10.0 mmol)，加入0.5 ml超純水，超聲30 min，冷凍干燥，制成凍干粉即得鹽酸克倫特羅包合物。

2 結(jié)果與討論

2.1 顯微熔點(diǎn)測(cè)定

鹽酸克倫特羅：熔點(diǎn)(mp)160～162 ℃；CM-β-CD：mp＞300 ℃；物理混合(鹽酸克倫特羅∶CM-β-CD 1∶1，mol/mol)：154～157 ℃部分熔化，其余固體mp＞300 ℃；包合物：mp＞300℃。

在物理混合物中，鹽酸克倫特羅于154～157℃熔化，說明仍以晶體形式存在，但由于鹽酸克倫特羅與CM-β-CD之間存在較弱的相互作用，熔點(diǎn)稍有下降。在包合物中，鹽酸克倫特羅可能通過疏水作用以分子形式進(jìn)入CM-β-CD空腔，失去了晶體的特征。

2.2 差示掃描量熱分析

用差示掃描量熱計(jì)對(duì)“2.1”節(jié)中4種樣品進(jìn)行掃描，掃描速度為10℃/min。結(jié)果表明，鹽酸克倫特羅單體在161℃有強(qiáng)吸熱峰（熔點(diǎn)峰）；CM-β-CD在300℃有寬吸收峰（熔點(diǎn)峰）。物理混合在161℃有強(qiáng)吸熱峰（鹽酸克倫特羅熔點(diǎn)峰），在300℃有寬的吸收峰（CM-β-CD熔點(diǎn)峰）；包合物在161℃無吸熱峰。與顯微熔點(diǎn)測(cè)定的結(jié)果相符。

2.3 紫外光譜

取適量鹽酸克倫特羅和包合物分別溶于水，然后進(jìn)行紫外全波長(zhǎng)掃描，結(jié)果見圖2。從圖2可以看出，鹽酸克倫特羅單體紫外吸收在242 nm和296 nm，包合物紫外吸收在245 nm和299 nm，鹽酸克倫特羅在形成包合物后吸收峰位置發(fā)生紅移現(xiàn)象，且強(qiáng)度明顯增大，而相同波長(zhǎng)范圍內(nèi)CM-β-CD無吸收峰。說明鹽酸克倫特羅已被CM-β-CD包合形成包合物。

圖2 紫外吸收

2.4 紅外光譜

測(cè)定“2.1”節(jié)中4種樣品紅外光譜，結(jié)果見圖3。在圖3中可以看出物理混合既有鹽酸克倫特羅的吸收特征，又有CM-β-CD的吸收特征，而包合物只有CM-β-CD的吸收特征，鹽酸克倫特羅的苯環(huán)的特征吸收峰已經(jīng)消失，說明鹽酸克倫特羅苯環(huán)部分通過疏水作用以分子形式進(jìn)入CM-β-CD空腔，失去了鹽酸克倫特羅的紅外特征。

圖3 紅外圖譜

2.5 掃描電鏡

測(cè)定“2.1”節(jié)中4種樣品掃描電子顯微鏡圖片，結(jié)果見圖4。從圖4可以看出物理混合既有鹽酸克倫特羅的形態(tài)，又有CM-β-CD的晶型，而包合物中鹽酸克倫特羅被包裹在CM-β-CD的內(nèi)部，幾乎看不到藥物的形態(tài)。說明鹽酸克倫特羅通過疏水作用以分子形式進(jìn)入CM-β-CD空腔，失去了鹽酸克倫特羅的形態(tài)。

圖4 掃描電鏡

3 結(jié)論

本文通過冷凍干燥的方法制備了鹽酸克倫特羅/CM-β-CD包合物，采用顯微熔點(diǎn)測(cè)定、差示掃描量熱分析、紫外光譜、紅外光譜及掃描電鏡的方法對(duì)包合物進(jìn)行表征，結(jié)果表明鹽酸克倫特羅通過分子形式進(jìn)入CM-β-CD內(nèi)部，為以后使用手性添加劑法拆分鹽酸克倫特羅，提供了理論基礎(chǔ)，為提高鹽酸克倫特羅檢測(cè)靈敏度提供了可能。