胃靈顆粒的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究

王培棟，鄭曉英

(1.承德醫(yī)學(xué)院，河北承德 067000;2.承德市食品藥品檢驗(yàn)檢測中心)

胃靈顆粒由甘草(炙)、海螵蛸、白芍(炒)、白術(shù)(炒)、延胡索、黨參六味中藥提取制備，具有健胃和中、制酸、止痛的功效，用于治療胃炎、胃和十二指腸潰瘍，收載于《中華人民共和國衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)》中藥成方制劑第六冊[1]。胃靈顆粒原質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中僅有常規(guī)檢查項(xiàng)，無藥材定性或定量的指標(biāo)。甘草苷、芍藥苷分別為為胃靈顆粒中君藥甘草、臣藥白芍的有效成分，為有效控制胃靈顆粒的質(zhì)量，本研究建立了采用波長切換高效液相色譜法同時(shí)對甘草中的甘草苷和白芍中的芍藥苷進(jìn)行含量測定的方法。

1 儀器與試藥

高效液相色譜儀(Waters e2695型，Waters 2998檢測器，Waters化學(xué)工作站);色譜柱(Thermo Hypersil GOLD C18，4.6mm×250mm，5μm);電子天平(METTLER TOLE DO New classic MF型);超聲波清洗器(功率250W，頻率40kHZ)。甘草苷、芍藥苷對照品，中國食品藥品檢定研究院;胃靈顆粒(批號(hào)1204001，1204002，1204003)，承德天源藥業(yè)有限公司;乙腈，色譜純，賽默飛世爾科技中國有限公司。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件 色譜柱:Thermo Hypersil GOLD C18(4.6mm×250mm，5μm);流 動(dòng) 相:乙 腈-0.1%冰 乙 酸 溶 液(19:81);流速:1.0/min;檢測波長:芍藥苷230nm，甘草苷276nm;柱溫25℃;進(jìn)樣量10μl;理論板數(shù)按芍藥苷和甘草苷峰計(jì)算，均應(yīng)不低于2500。

2.2 溶液的制備

2.2.1 對照品溶液的制備:取甘草苷、芍藥苷對照品適量，精密稱定，加甲醇分別制成每1ml含甘草苷0.2mg、芍藥苷0.2mg的對照品溶液;取甘草苷、芍藥苷對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1ml各含甘草苷、芍藥苷0.2mg的對照品混合溶液。

2.2.2 供試品溶液的制備:取胃靈顆粒，研細(xì)，精密稱取5.0g，置具塞錐形瓶中，精密加入70%甲醇50ml，密塞，稱定重量，加熱回流20min，放冷，再稱定重量，70%甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻、濾過，取續(xù)濾液0.45μ m微孔濾膜濾過，即得。

2.3 專屬性試驗(yàn) 分別取胃靈顆粒處方中除甘草外的其它藥材、除白芍外的其它藥材，按胃靈顆粒的制備工藝分別制成無甘草、無白芍的陰性樣品，按2.2.2的方法操作，制成甘草陰性樣品和白芍陰性樣品溶液。分別精密吸取對照品混合溶液、供試品溶液、兩種陰性樣品溶液各10μl，按2.1的色譜條件測定，結(jié)果顯示，在甘草苷、芍藥苷的保留時(shí)間處，兩種陰性樣品無干擾。

2.4 線性關(guān)系考察

2.4.1 甘草苷線性關(guān)系:取2.2.1的甘草苷對照品溶液，分 別精密吸取2、5、10、15、20μ l進(jìn)樣，按2.1的色譜條件測定峰面積，以進(jìn)樣量(μg)為橫坐標(biāo)(X)，峰面積為縱坐標(biāo)(Y)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程:Y=1.8×1012X+9.203×104，r=0.999。結(jié)果顯示，甘草苷在0.3939-3.939μg的范圍內(nèi)呈良好線性關(guān)系。

2.4.2 芍藥苷線性關(guān)系:取2.2.1的芍藥苷對照品溶液，分別精密吸取2、5、10、15、20μl進(jìn)樣，按2.1的色譜條件測定峰面積，以進(jìn)樣量(μg)為橫坐標(biāo)(X)，峰面積為縱坐標(biāo)(Y)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程:Y=1.3×1012X+1.7×105，r=0.999。結(jié)果顯示，芍藥苷在0.4061-4.061μg的范圍內(nèi)呈良好線性關(guān)系。

2.5 精密度試驗(yàn) 精密吸取2.2.1中的甘草苷和芍藥苷對照品混合溶液10μl，按2.1的色譜條件分別連續(xù)進(jìn)樣5次，測定峰面積，得甘草苷和芍藥苷峰面積的RSD值分別為1.1%和0.6%，表明儀器精密度良好。

2.6 重復(fù)性試驗(yàn) 精密稱取胃靈顆粒6份(批號(hào)1204003)，按2.2.2的方法制成供試品溶液，分別精密吸取10μl按2.1的色譜條件測定峰面積，得甘草苷、芍藥苷峰面積的RSD分別為1.0%和0.3%，結(jié)果表明樣品重復(fù)性良好。

2.7 穩(wěn)定性試驗(yàn) 精密吸取同一供試品溶液(批號(hào)1204003)，分別于配制后0、4、8、12、24h進(jìn)樣10μl，按2.1的色譜條件測定峰面積，得甘草苷、芍藥苷峰面積的RSD分別為1.3%和0.6%，結(jié)果表明供試品溶液在24h內(nèi)穩(wěn)定。

2.8 加樣回收率試驗(yàn) 取已知含量的同一批樣品(批號(hào)1204003)6份，分別精密加入甘草苷、芍藥苷對照品溶液適量，按2.2.2的方法制備成加樣供試品溶液，按2.1的色譜條件進(jìn)行含量測定，計(jì)算加樣回收率，結(jié)果見表1:

表1 甘草苷和芍藥苷加樣回收率試驗(yàn)結(jié)果(n=6)

2.9 樣品含量測定 取三個(gè)批次的樣品(批號(hào)1204001，1204002，1204003)，按2.2.2的方法制備供試品溶液，按2.2.1的方法制備對照品混合溶液，按2.1的色譜條件測定，每批樣品平行制備2份，每份樣品測定2次，按外標(biāo)法計(jì)算甘草苷、芍藥苷的含量及RSD。結(jié)果見表2:

表2 樣品含量測定結(jié)果

3 討論

HPLC是近年來中藥材及中成藥常用的含量測定方法[2-5]。本研究采用雙波長HPLC技術(shù)，測定的結(jié)果表明甘草苷和芍藥苷峰面積值與進(jìn)樣量呈良好的線性關(guān)系，顯示該方法對處方中甘草苷和芍藥苷的含量測定適用，分離度高、峰型好，且陰性無干擾。本研究建立的方法簡便、準(zhǔn)確、可靠，可作為胃靈顆粒的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。

[1] 衛(wèi)生部藥典委員會(huì).中華人民共和國衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)中藥成方制劑[M].第六冊.北京:人民衛(wèi)生出版社，1992.109.

[2] 王瑞，展曉日，李歡.桂枝湯及其拆方對芍藥苷溶出量的影響[J].中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2013，19(9):6-8.

[3] 楊慈海，王啟硯，謝帆.反相高效液相色譜法測定胃靈顆粒中芍藥苷含量[J].中國藥業(yè)，2006，15(9):40-41.

[4] 夏金華.高效液相色譜法測定胃靈顆粒中芍藥苷的含量[J].海峽藥學(xué)，2011，23(1):44-45.

[5] 何紹萍，唐麗麗.HPLC法測定胃靈沖劑中芍藥苷和甘草苷的含量[J].廣東藥學(xué)院學(xué)報(bào)，2011，27(5):493-495.