趙蒙蒙 王青山 王爽 李瑞
[摘要] 目的 檢測自制納米羥磷灰石(NHA)復(fù)合樹脂與牙體組織之間的邊緣密合性。方法 健康離體前磨牙30顆制備Ⅰ類洞型,隨機分成3組,分別用NHA復(fù)合樹脂(A組)、卡瑞斯瑪復(fù)合樹脂(B組)、玻璃離子水門汀(C組)充填修復(fù),經(jīng)冷熱循環(huán)實驗后,采用2%亞甲基藍(lán)染料滲入法觀察充填材料與牙體洞壁間邊緣微滲漏的情況。結(jié)果 A、B、C組染料的滲漏深度分別為(1.20±0.81)、(1.94±0.70)、(1.73±0.54) mm,3組之間的差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05);3組間滲漏程度的差異也無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。結(jié)論 作為一種新型牙體修復(fù)材料,NHA復(fù)合樹脂與牙體組織之
間具有良好的黏結(jié)性能。
[關(guān)鍵詞] 納米羥磷灰石; 邊緣封閉性; 黏結(jié); 微滲漏
[中圖分類號] R 783.1 [文獻(xiàn)標(biāo)志碼] A [doi] 10.7518/hxkq.2013.03.020
修復(fù)材料與牙體組織之間的黏結(jié)性能是評價材料性能優(yōu)劣的重要指標(biāo)之一。邊緣微滲漏是充填材料與牙體之間因封閉不良而出現(xiàn)微小通道導(dǎo)致的,口腔中的細(xì)菌、代謝產(chǎn)物及其他有害物質(zhì)可通過這種微裂隙進(jìn)入牙體組織,導(dǎo)致一系列不良后果[1]。本
實驗采用染料滲漏法檢測自制納米羥磷灰石(nano- hydroxyapatite,NHA)復(fù)合樹脂與牙體組織的密合性,評價其邊緣封閉性能,為該材料的臨床應(yīng)用提供實驗依據(jù)。
1 材料和方法
1.1 實驗牙的選擇
收集因正畸減數(shù)拔除的無齲健康前磨牙30顆,要求無釉質(zhì)發(fā)育不全,無氟斑牙、四環(huán)素牙等牙齒著色性疾病,牙體完整無折斷,頰側(cè)頸部無楔狀缺損;放大鏡下檢查,無隱裂、無潛行性齲。牙齒拔除后,采用機械方法去除牙石及牙周軟組織,置于4 ℃人工唾液中儲存?zhèn)溆谩?/p>
1.2 材料與儀器
體積分?jǐn)?shù)為2%亞甲基藍(lán)溶液(上?;瘜W(xué)試劑有
限公司);卡瑞斯瑪光固化復(fù)合樹脂(上海賀利氏古莎齒科有限公司),加強型玻璃離子水門汀FX(日本松風(fēng)公司),NHA復(fù)合樹脂(自制);Szx7型體視顯微鏡(Olympus公司,日本),游標(biāo)卡尺(無錫錫工量具有限公司),HH-4型數(shù)顯恒溫水浴箱(常州國華電器有
限公司),電熱恒溫干燥箱(上海躍進(jìn)醫(yī)療器械廠)。
1.3 方法
1.3.1 試件制作 30顆前磨牙,流水沖洗下高速裂鉆在咬合面?zhèn)洧耦惗矗瓷顬橛匝辣举|(zhì)界下1.5 mm,洞直徑為3 mm;備洞后將30顆牙隨機分為3組,每組10顆,分別充填NHA復(fù)合樹脂(A組)、卡瑞斯瑪
復(fù)合樹脂(B組)、玻璃離子水門?。–組)。要求充填材料與洞緣平齊,砂紙打磨平整。
1.3.2 標(biāo)本染色 充填后待標(biāo)本干燥2~3 h,將根尖部分用自凝塑料封閉,距充填材料1 mm范圍外的牙體表面均勻涂布2層指甲油,表面干燥后進(jìn)行溫度循環(huán),冷水浴(5 ℃)60 s、室溫6 s、溫水?。?5 ℃)60 s,每個周期126 s,共循環(huán)500次,以模擬口腔環(huán)境溫度的急劇變化;每次循環(huán)后,標(biāo)本均放于37 ℃人造唾液中。溫度循環(huán)結(jié)束后,分別將樣本放入2%亞甲基藍(lán)溶液中,靜置于37 ℃恒溫箱中保存24 h后取出,流水下用軟毛刷清洗以去除表面附著的染料,不易去除部分用橡皮杯蘸浮石粉拋光去除。
1.3.3 滲漏深度測量 標(biāo)本沖洗干凈后烤干,檢查牙體,所有充填材料均未松動和脫落。用金剛砂片在水冷卻條件下切割3組標(biāo)本,將每個標(biāo)本沿近遠(yuǎn)中向縱形剖開,取近中和遠(yuǎn)中2個觀測點,在體視顯微鏡下觀察3組標(biāo)本的微滲漏情況,并用游標(biāo)卡尺(精度0.02 mm)測量每個觀測點上染料滲入的長度,取2點的平均值為該標(biāo)本的測量值。
1.3.4 滲漏程度判定 標(biāo)本滲漏程度的判定標(biāo)準(zhǔn)[2]如下:洞壁無染色劑滲入記為0;染色劑有滲入,僅限于釉質(zhì)和修復(fù)體的分界處,記為1;染色劑沿洞壁滲入但未達(dá)洞底,記為2;染色劑滲透包括洞壁和洞底,記為3;染色劑大部分或全部通過牙本質(zhì)達(dá)髓腔,記為4。
1.3.5 統(tǒng)計學(xué)處理 用SPSS 17.0軟件包進(jìn)行處理,不同材料與牙體間染料滲入深度的比較采用F檢驗和Kruskal-Wallis H檢驗,檢驗水準(zhǔn)取α=0.05。
2 結(jié)果
A、B、C組標(biāo)本染料的滲漏深度分別為(1.20±
0.81)、(1.94±0.70)、(1.73±0.54) mm,染料的滲漏
程度見表1;體視顯微鏡下亞甲基藍(lán)的滲漏狀態(tài)見圖1,圖中藍(lán)染部分為滲入的亞甲基藍(lán)染料。分析染料滲漏情況可以發(fā)現(xiàn),卡瑞斯瑪復(fù)合樹脂與牙體間的滲漏深度達(dá)洞底,玻璃離子水門汀與牙體間的滲漏深度達(dá)釉牙本質(zhì)界下但未達(dá)洞底,NHA復(fù)合樹脂與牙體間的滲漏深度接近釉牙本質(zhì)界。經(jīng)統(tǒng)計學(xué)檢驗,3組間染料的滲漏深度和滲漏程度均無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)。
3 討論
羥磷灰石的晶體結(jié)構(gòu)與天然骨的無機成分相似,是人體骨骼和牙齒最主要的無機成分。人工合成的NHA不但具有良好的生物相容性和生物活性[3],還具有量子隧道效應(yīng)、增強效應(yīng)[4]和特異性[5]。有研究[6]證明,羥磷灰石具有抑制口腔內(nèi)細(xì)菌生長繁殖,預(yù)防齲病,以及促進(jìn)早期齲再礦化等功能。NHA不但
組織修復(fù)能力強,炎癥反應(yīng)小,還具有良好的牙本質(zhì)再礦化作用[7],在牙體修復(fù)方面有較好的應(yīng)用前
景;但機械強度較差的缺陷使其至今無法應(yīng)用于牙體缺損的修復(fù)。如何使NHA達(dá)到修復(fù)材料機械性能的要求一直是眾多學(xué)者的研究方向。自制的NHA復(fù)合樹脂以NHA作為無機填料,與樹脂基體按合適比例混合而成;在前期試驗中,已證實該材料具有較佳的機械性能[8-9]和良好的生物相容性[10]。
牙體與充填物之間存在臨床上不能檢測到的縫隙,口腔中的細(xì)菌、酶及其產(chǎn)物等可通過這種縫隙進(jìn)入牙體組織,這種現(xiàn)象稱為微滲漏。納滲漏是指縫隙為50 nm左右的微孔,主要分布在牙本質(zhì)表面脫礦的膠原骨架區(qū),此處應(yīng)被材料緊密充填。納滲漏的微生物不易進(jìn)入,但當(dāng)充填界面的縫隙達(dá)到微米以上時便形成微滲漏,此時微生物就容易沿洞壁進(jìn)入;由于材料自身性能和臨床操作等人為因素,微滲漏是不可避免的[11]。研究[12]表明,微滲漏是導(dǎo)致繼發(fā)齲、引起牙髓感染的最主要因素。充填材料置于口腔后即有唾液薄膜覆蓋其上并在表面不規(guī)則地延伸,且會進(jìn)入充填體和牙體組織之間的縫隙中,而口腔細(xì)菌可以黏附于唾液薄膜上并侵襲整個縫隙,聚集于縫隙中的細(xì)菌在時間和營養(yǎng)物質(zhì)等條件充分時會進(jìn)行繁殖和產(chǎn)酸等活動,從而使牙體組織沿著洞壁發(fā)生脫礦[13]。Totiam等[14]的研究表明,縫隙越大洞壁的牙本質(zhì)損害越大,原因在于較大的縫隙為細(xì)菌的大量侵入和繁殖提供了足夠的空間,并且為細(xì)菌提供了充分的營養(yǎng)物質(zhì)而造成更大的洞壁缺損;而在較小的縫隙中,脫礦的牙體組織周圍的液態(tài)環(huán)境(唾液)含有足夠的與牙齒礦物有關(guān)的鈣磷成分,從而創(chuàng)造了再礦化的條件,所以洞壁缺損較小。
微滲漏的產(chǎn)生受多種因素影響,修復(fù)材料自身的性能是重要原因之一[15]。由于玻璃離子存在吸水
膨脹和脫水干燥的缺點,因此充填界面常會出現(xiàn)縫隙導(dǎo)致微滲漏[16]。復(fù)合樹脂在固化中產(chǎn)生的聚合收
縮可使牙體與修復(fù)體之間產(chǎn)生張力和(或)剪切力,張力可破壞修復(fù)體與洞壁間的連接,從而導(dǎo)致微滲漏。有研究表明,通過更具黏性的黏結(jié)劑和提高填料比例可增加黏結(jié)強度從而減小聚合壓力。理想的充填材料應(yīng)具有良好的邊緣封閉效果,與牙體組織能形成良好的黏結(jié)。黏結(jié)性牙體修復(fù)材料在增加牙體與材料間的邊緣密合性和減少微滲漏方面有較大的優(yōu)勢[17]。NHA良好的生物相容性和生物學(xué)活性在防止
牙髓刺激和促進(jìn)再礦化過程中可能發(fā)揮了重要作用,不失為具有良好應(yīng)用前景的新型牙體修復(fù)材料。
充填材料的黏結(jié)性是影響臨床修復(fù)效果的重要因素之一,微滲漏實驗和剪切力實驗均能對其作出較好評價[18]。微滲漏能反映修復(fù)體與牙體組織的密
合性,是評價充填材料與牙體結(jié)合性能的一項重要指標(biāo)。微滲漏的檢測方法有多種,如染料滲透法[19]、細(xì)菌滲漏法、電化學(xué)法、流體過濾法、放射性同位素標(biāo)記法[20]、掃描電鏡分析等,其中染料滲透法是
微滲漏檢測的重要方法之一,因其靈敏性高、簡便易行,是最常用的檢測方法[21]。本實驗所用染料為
亞甲基藍(lán),測量結(jié)果為定量試驗;溫度循環(huán)旨在模擬口腔溫度的急劇變化和臨床操作環(huán)境,使實驗數(shù)據(jù)更具真實性和可靠性[22]。
本研究表明,新型NHA復(fù)合樹脂的邊緣封閉性較好,與目前臨床常用的復(fù)合樹脂和玻璃離子的微滲漏程度無明顯差異,能達(dá)到臨床牙體修復(fù)材料的密合性能要求,具有進(jìn)一步探索和研究的價值。
[參考文獻(xiàn)]
[1] Taylor MJ, Lynch E. Microleakage[J]. J Dent, 1992, 20(1):3-10.
[2] Verné E, Brovarone CV, Milanese D. Glass-matrix biocomposites
[J]. J Biomed Mater Res, 2000, 53(4):408-413.
[3] Kalita SJ, Bhardwaj A, Bhatt HA. Nanocrystalline calcium phos-
phate ceramics in biomedical engineering[J]. Mater Sci Eng C, 2007,
27(3):441-449.
[4] Atai M, Solhi L, Nodehi A, et al. PMMA-grafted nanoclay as novel
filler for dental adhesives[J]. Dent Mater, 2009, 25(3):339-347.
[5] Sadat-Shojai M, Atai M, Nodehi A, et al. Hydroxyapatite nanorods
as novel fillers for improving the properties of dental adhesives:
Synthesis and application[J]. Dent Mater, 2010, 26(5):471-482.
[6] 呂奎龍, 滕立群, 孟祥才, 等. 納米羥基磷灰石牙膏對人工齲再
礦化研究[J]. 黑龍江醫(yī)藥科學(xué), 2002, 25(3):26-27.
Lü Kuilong, Teng Liqun, Meng Xiangcai, et al. Remineralization
of artificial caries with nano-hydroxyapatite toothpaste[J]. Hei-
longjiang Medicine Pharmacy, 2002, 25(3):26-27.
[7] 謝民, 趙立新, 高成山. 納米羥基磷灰石對軟化牙本質(zhì)再礦化
效果實驗研究[J]. 貴州醫(yī)藥, 2009, 33(1):19-20.
Xie Min, Zhao Lixin, Gao Chengshan. Study on nano-hydroxyapatite
on the remineralization of decalcified dentin[J]. Guizhou Medical J,
2009, 33(1):19-20.
[8] 王云, 王青山. 牙體修復(fù)性納米羥基磷灰石復(fù)合材料的機械性
能研究[J]. 現(xiàn)代口腔醫(yī)學(xué)雜志, 2011, 25(2):115-117.
Wang Yun, Wang Qingshan. Experimental study of dentistry nano-
hydroxyapatite composite[J]. J Modern Stomatology, 2011, 25(2):
115-117.
[9] Wang QS, Wang Y, Li R, et al. Effects of light-initiation agent
on mechanical properties of light-cured nano-hydroxyapatite com-
posite for dental restoration[J]. Applied Mechanics and Materials,
2012, 138/139:1012-1016.
[10] 李瑞, 王青山, 趙蒙蒙, 等. 牙體修復(fù)性納米羥基磷灰石復(fù)合材
料生物相容性評價[J]. 牙體牙髓牙周病學(xué)雜志, 2012, 22(3):157-
160.
Li Rui, Wang Qingshan, Zhao Mengmeng, et al. Biocompatibility
evaluation of light-cured nano-hydroxyapatite composite for tooth
restoration[J]. Chin J Conserv Dent, 2012, 22(3):157-160.
[11] Piwowarczyk A, Lauer HC, Sorensen JA. Microleakage of various
cementing agents for full cast crowns[J]. Dent Mater, 2005, 21(5):
445-453.
[12] Siso HS, Kustarci A, G?ktolga EG. Microleakage in resin compo-
site restorations after antimicrobial pre-treatments: Effect of KTP
laser, chlorhexidine gluconate and Clearfil Protect Bond[J]. Oper
Dent, 2009, 34(3):321-327.
[13] 賴光云, 李鳴宇. 繼發(fā)齲的研究進(jìn)展[J]. 國際口腔醫(yī)學(xué)雜志, 2010,
37(1):113-115, 119.
Lai Guangyun, Li Mingyu. Research progress of secondary caries
[J]. Int J Stomatol, 2010, 37(1):113-115, 119.
[14] Totiam P, González-Cabezas C, Fontana MR, et al. A new in vitro
model to study the relationship of gap size and secondary caries
[J]. Caries Res, 2007, 41(6):467-473.
[15] Antonopoulos KG, Attin T, Hellwig E. Evaluation of the apical seal
of root canal fillings with different methods[J]. J Endod, 1998, 24
(10):655-658.
[16] Wiedeman JA, Kaul R, Heuer LS, et al. Tobacco smoke induces
persistent infection of Chlamydophila pneumoniae in HEp-2 cells
[J]. Microb Pathog, 2004, 37(3):141-148.
[17] Mackenzie L, Shortall AC, Burke FJ. Direct posterior composites:
A practical guide[J]. Dent Update, 2009, 36(2):71-72, 74-76,
79-80.
[18] Ahluwalia P, Chopra S, Thomas AM. Strength characteristics and
marginal sealing ability of chlorhexidine-modified glass ionomer
cement: An in vitro study[J]. J Indian Soc Pedod Prev Dent, 2012,
30(1):41-46.
[19] 包廣潔, 李子夏. 三類常用牙體充填材料界面微滲漏的激光掃
描共聚焦顯微鏡觀測[J]. 現(xiàn)代口腔醫(yī)學(xué)雜志, 2008, 22(5):507-
510.
Bao Guangjie, Li Zixia. Microleakage observation of three kinds of
commonly used dental filling materials under confocal laser scan-
ning microscope[J]. J Modern Stomatol, 2008, 22(5):507-510.
[20] Ha?kel Y, Wittenmeyer W, Bateman G, et al. A new method for
the quantitative analysis of endodontic microleakage[J]. J Endod,
1999, 25(3):172-177.
[21] Parolia A, Kundabala M, Gupta V, et al. Microleakage of bonded
amalgam restorations using different adhesive agents with dye un-
der vacuum: An in vitro study[J]. Indian J Dent Res, 2011, 22
(2):252-255.
[22] Popoff DA, Gon?alves FS, Magalh?es CS, et al. Repair of amal-
gam restorations with composite resin and bonded amalgam: A mi-
croleakage study[J]. Indian J Dent Res, 2011, 22(6):799-803.
(本文編輯 吳愛華)