谷赤清肝明目片的提取工藝優(yōu)選研究

楊 健 李 芳 王衛(wèi)鋒 西安市中醫(yī)醫(yī)院（西安710001）

谷赤清肝明目片由西安市中醫(yī)醫(yī)院臨床常用傳統(tǒng)中藥湯劑改變劑型制得，處方由谷精草、赤芍、木賊、青葙子、決明子、金銀花、防風(fēng)等藥物組成，功能清肝瀉火，明目，用于肝火上炎引起的目赤腫痛。該制劑中谷精草、赤芍、木賊、金銀花、防風(fēng)等藥材以水提取方式入藥。本文將采用正交試驗(yàn)法對(duì)該制劑的水提取工藝進(jìn)行優(yōu)化，確保谷赤清肝明目片的質(zhì)量和療效。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 Waters高效液相色譜儀（美國(guó)）；AS10200A型超聲清洗器（昆山超聲儀器有限公司）；塞多利斯BP211D 型電子天平（德國(guó)Sartorius）。

1.2 試藥 芍藥苷對(duì)照品（中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)：10736－200833），試驗(yàn)所用中藥材由西安市中醫(yī)醫(yī)院藥劑科提供；液相用試劑為色譜純；水為超純水；其它試劑為分析純。

2 方法與結(jié)果 2.1 正交試驗(yàn)設(shè)計(jì) 處方中谷精草、赤芍、木賊、青葙子、決明子、金銀花、防風(fēng)等藥材采用水提取處理，以芍藥苷和干膏得率為指標(biāo)對(duì)提取次數(shù)、提取時(shí)間、加水量三個(gè)因素進(jìn)行考察，根據(jù)預(yù)試驗(yàn)的結(jié)果各選擇三個(gè)水平，采用正交表安排試驗(yàn)。因素水平表見表1。

表1 谷赤清肝明目片提取工藝因素水平表

2.2 正交試驗(yàn)提取液的制備 取水提工藝的藥材，按處方比例量平行稱取9份，每份105g，按正交實(shí)驗(yàn)安排表進(jìn)行提取，合并提取液。將上述提取液濃縮，定容至一定體積，即得樣品溶液。

2.3 干膏得率的測(cè)定 精密量取“2.1”項(xiàng)下各正交試驗(yàn)提取液100mL，水浴蒸干，殘?jiān)?05℃干燥3h，取出，置于干燥器中放置30min，稱重，計(jì)算干膏得率。

2.4 芍藥苷含量測(cè)定［1～3］2.4.1 色譜條件 色譜柱：C18色譜柱（Diamosil 4.6×250mm，5μm）；流動(dòng)相：乙腈－0.1%磷酸溶液（15∶85）；流速1.0mL·min－1；柱溫：室溫；檢測(cè)波長(zhǎng)230nm；進(jìn)樣量10μL。

2.4.2 測(cè)定方法精密吸取正交試驗(yàn)各提取液2mL，加甲醇定容至10mL，搖勻，濾過(guò)，用微孔濾膜（0.45μm）濾過(guò)，作為供試品溶液。另精密稱取芍藥苷對(duì)照品1.81mg，加甲醇制成每1mL含0.0724mg的溶液作為對(duì)照品溶液。精密吸取對(duì)照品溶液及供試品溶液各10μL，按“2.4.1”項(xiàng)下色譜條件測(cè)定，計(jì)算。

2.5 試驗(yàn)結(jié)果及分析 試驗(yàn)結(jié)果見表2，方差分析結(jié)果見表3。

表2 水提正交試驗(yàn)表及結(jié)果

表3 水提方差分析表

由表2、表3可知，影響提取效果因素順序?yàn)樘崛〈螖?shù)（A）＞加水量（C）＞提取時(shí)間（B）；其中提取次數(shù)對(duì)提取效果有顯著影響，提取時(shí)間、加水量長(zhǎng)短幾無(wú)影響。綜合以上分析，確定最佳水提取工藝為A3B2C3，即藥材加12倍量水，提取三次，第一次1.5h，第二、三次各1.0h。

2.6 最佳提取工藝的驗(yàn)證試驗(yàn) 按處方量稱取提取藥材，共3份，每份105g，按優(yōu)選的工藝條件提取，測(cè)定芍藥苷含量和干膏得率。結(jié)果見表4。

表4 最佳工藝驗(yàn)證試驗(yàn)

表4 結(jié)果表明，優(yōu)選出的水提取工藝條件穩(wěn)定、合理、可行。

3 討 論 3.1 在對(duì)水提工藝條件進(jìn)行優(yōu)選時(shí)，我們同時(shí)測(cè)定了芍藥苷的含量和干膏得率，并給予不同的加權(quán)系數(shù)對(duì)試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行處理，以綜合評(píng)分進(jìn)行評(píng)價(jià)，這比采取單一指標(biāo)對(duì)提取工藝進(jìn)行優(yōu)選更加合理和科學(xué)。

3.2 正交試驗(yàn)優(yōu)選的水提取工藝條件經(jīng)過(guò)驗(yàn)證，表明是可行的，可為谷赤清肝明目片的生產(chǎn)和臨床應(yīng)用提供試驗(yàn)依據(jù)。

［1］ 國(guó)家藥典委員會(huì).中國(guó)藥典［S］.一部.北京：人民衛(wèi)生出版社，2010：150.

［2］ 于文靜，李井濤.HPLC 法測(cè)定少腹逐瘀丸中芍藥苷的含量［J］.中國(guó)藥事，2012，26（3）：285－287.

［3］ 陳 昕，高 軍，張大軍，等.HPLC 法測(cè)定消乳癖顆粒中芍藥苷的含量［J］.中國(guó)藥師，2012，15（3）：372－374.