管角螺幼螺配合飼料中蛋白質(zhì)適宜含量的研究

杜學(xué)星， 蔣霞敏， 姜小敏， 葉 麗

(寧波大學(xué)海洋學(xué)院， 寧波 315211)

管角螺(HemifusustubaGmelin)隸屬于軟體動(dòng)物門，腹足綱、角螺屬，是淺海較大型經(jīng)濟(jì)螺類，其肉味鮮美，營養(yǎng)豐富，由于近年來受到過度捕撈，野生資源日益減少，供不應(yīng)求，所以進(jìn)行大規(guī)模人工養(yǎng)殖勢在必行。雖然目前管角螺的人工育苗和養(yǎng)殖技術(shù)已經(jīng)取得初步成功，但其餌料仍以鮮活餌料為主，不僅成本較高，還容易污染水質(zhì)，造成資源浪費(fèi)，而配合飼料可以根據(jù)管角螺的養(yǎng)殖環(huán)境和不同生長階段的營養(yǎng)需求及時(shí)調(diào)整營養(yǎng)配比，滿足其營養(yǎng)需求，所以研制管角螺的配合飼料成為目前急需解決的問題。

蛋白質(zhì)含量不僅是影響配合飼料品質(zhì)和成本的主要因素，還是決定水產(chǎn)動(dòng)物生長的最關(guān)鍵的營養(yǎng)物質(zhì)。飼料蛋白質(zhì)含量過低不能滿足水產(chǎn)動(dòng)物的生長需要，過高則不僅會(huì)增加成本、造成資源的浪費(fèi)，而且會(huì)使水中氮磷含量增多，破壞水質(zhì)[1]。所以研究飼料中蛋白質(zhì)的適宜含量，對(duì)優(yōu)化飼料成本、保持水產(chǎn)動(dòng)物良好的生長和提高飼料利用率具有重要意義[2]。迄今為止，管角螺的研究仍集中在解剖學(xué)、組織學(xué)、人工繁育等方面，關(guān)于管角螺對(duì)飼料中蛋白質(zhì)需求量的研究尚屬空白。

本試驗(yàn)以國產(chǎn)魚粉+白魚粉為蛋白源，混合油(魚油∶豆油=1∶1)為脂肪源，特定生長率、飼料轉(zhuǎn)化率、蛋白質(zhì)效率和存活率為指標(biāo)，研究了飼料中不同蛋白質(zhì)水平對(duì)管角螺生長和肌肉成分的影響，以探求管角螺配合飼料的最適蛋白質(zhì)含量，為以后進(jìn)一步研究管角螺的配合飼料提供一定的基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)飼料配方及試驗(yàn)設(shè)計(jì)

表1試驗(yàn)飼料組成和成分分析

誘食劑的添加量為0.54%濃度的縊蟶浸出液50 mL?；A(chǔ)料為國產(chǎn)魚粉29%，去皮花生粕2%，去皮豆粕7.5%，α-淀粉10%，維生素預(yù)混料1%和礦物質(zhì)預(yù)混料0.5%。

以國產(chǎn)魚粉+進(jìn)口白魚粉為蛋白源，混合油(魚油∶豆油=1∶1)為脂肪源，脂肪含量為9%(豆油在佳佳樂超市，為金龍魚牌植物油，其它試驗(yàn)用基礎(chǔ)飼料成分均由寧波天邦股份有限公司提供)，制成蛋白水平為25%、30%、35%、40%、45%的5種試驗(yàn)飼料，其設(shè)計(jì)配方及營養(yǎng)成分見表1，飼料氨基酸含量見表2。試驗(yàn)飼料制作時(shí)，先將各種原粉過100目篩，再按配方比例準(zhǔn)確稱量各種原料，混合均勻后，加水(飼料干粉∶水為2∶1)，反復(fù)揉捏，擠壓制作成直徑為2 mm，長度為10～15 mm的飼料，60℃烘干，放入保鮮袋中，于0℃冰箱中保存待用。明膠需先在90℃水中溶解后再加入。

試驗(yàn)用管角螺在浙江省寧?？h得水水產(chǎn)苗種場人工育苗獲得，試驗(yàn)前饑餓3 d，投喂配合飼料，至正常攝食后開始試驗(yàn)。選取殼高(2.25±0.25)cm，體重(0.65±0.25)g的管角螺300只，隨機(jī)分為與蛋白質(zhì)梯度相對(duì)應(yīng)的5個(gè)試驗(yàn)組，每組設(shè)3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)20只管角螺。

表2 飼料中氨基酸含量

1.2 試驗(yàn)條件

試驗(yàn)于2010年8—9月在寧?？h得水水產(chǎn)苗種場進(jìn)行。試驗(yàn)用盆為內(nèi)徑16 cm、高8 cm的塑料圓盆，盆內(nèi)鋪沙(40網(wǎng)目)，沙厚1.5～2 cm，水體高4～5 cm，盆和沙均用高錳酸鉀消毒，所用海水經(jīng)過兩層沙濾處理。投餌量為體重的6%，日投餌料2次(7:00、17:00)，每天11:00和21:00撈出餌料，烘干稱重，每次撈出餌料后換水，換水量100%(盆底部的細(xì)沙每周換一次)。每10 d測量殼高和體重一次，投餌量據(jù)此適當(dāng)?shù)剡M(jìn)行調(diào)整。試驗(yàn)期間，24 h連續(xù)充氧，水溫(29.7±1.9)℃，鹽度24.5±2.5。試驗(yàn)持續(xù)40 d。

粗蛋白采用GB/T 5009.5-2003凱氏定氮法測定，粗脂肪采用GB/T 5009.6-2003索氏抽提法測定；水分采用GB/T 5009.3-2003干燥法測定；灰分采用GB/T 5009.4-2003高溫灼燒法測定；氨基酸組成采用GB/T18246-2000安捷倫1200型液相色譜儀測定。

1.3 生長指標(biāo)

特定生長率(SGR)、飼料轉(zhuǎn)化率(FCR)、蛋白質(zhì)效率(PER)和存活率(SR)計(jì)算方法如下：

特定生長率SGR(%/d)=(lnM2-lnM1)/t×100%

飼料轉(zhuǎn)化率FCR (%)= ( M2-M1) / Mf×100%

蛋白質(zhì)效率(PER)=( M2-M1) / Mp×100%

存活率SR (%)=H2/ H1×100%

其中，M1為開始試驗(yàn)時(shí)螺的體重(g)，M2為試驗(yàn)結(jié)束時(shí)螺的體重(g)，Mf為干物質(zhì)攝入量(g)，Mp為蛋白質(zhì)攝入量(g)；t為試驗(yàn)時(shí)間(d)；H1為每箱放入的螺個(gè)數(shù)(ind)，H2為試驗(yàn)結(jié)束時(shí)存活的螺個(gè)數(shù)(ind)。

1.4 統(tǒng)計(jì)分析

特定生長率、飼料轉(zhuǎn)化率、蛋白質(zhì)效率、成活率和肌肉營養(yǎng)成分用Excel方差分析進(jìn)行顯著性檢驗(yàn),如差異性顯著(P<0.05)，則用SSR法進(jìn)行多重比較。

2 結(jié)果

2.1 配合飼料不同蛋白質(zhì)含量對(duì)管角螺生長的影響

從表3可以看出，飼料蛋白質(zhì)水平對(duì)管角螺特定生長率、飼料轉(zhuǎn)化率、蛋白質(zhì)效率均有一定影響，而對(duì)成活率無顯著性影響(P>0.05)，各組的成活率為90%～98.33%。蛋白質(zhì)含量為25%～40%時(shí)，管角螺的特定生長率和飼料轉(zhuǎn)化率隨著蛋白質(zhì)含量的上升而升高，在40%時(shí)達(dá)到最大值1.02%和60.10%，當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)含量超過40%后兩者均逐漸下降。蛋白質(zhì)效率在35%水平最大，達(dá)到了1.62%，45%時(shí)最小，僅為0.88%。

表3 飼料蛋白質(zhì)水平對(duì)管角螺生長的影響

同行肩標(biāo)不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)，下表同。

2.2 管角螺配合飼料中蛋白質(zhì)的最適含量

根據(jù)養(yǎng)殖試驗(yàn)結(jié)果，試驗(yàn)管角螺的特定生長率(S)和飼料轉(zhuǎn)化率(F)兩項(xiàng)指標(biāo)與飼料蛋白質(zhì)水平(X)之間的關(guān)系均可以用回歸曲線模型成功擬合(P<0.05)，其關(guān)系圖見圖1和圖2。其數(shù)學(xué)表達(dá)式分別為：S=-0.0001x3+ 0.0068x2-0.0876x(R2= 0.9579)，F(xiàn) =-0.0152x3+ 1.4041x2-40.616x + 413.07(R2= 0.9946)。由兩圖可以看出，特定生長率和飼料轉(zhuǎn)化率均隨飼料中蛋白質(zhì)含量的升高呈先上升后下降的趨勢。由上述數(shù)學(xué)表達(dá)式可以求得，當(dāng)特定生長率(S)和飼料轉(zhuǎn)化率(F)有極大值時(shí)，對(duì)應(yīng)的飼料蛋白水平(X)值分別為37.50%和38.88%。

圖1 飼料蛋白質(zhì)水平與特定生長率的關(guān)系

圖2 飼料蛋白質(zhì)水平與飼料轉(zhuǎn)化率的關(guān)系

表4 飼料蛋白水平對(duì)管角螺體肌肉成分的影響

2.3 飼料蛋白質(zhì)水平對(duì)管角螺體肌肉成分的影響

由表4可以看出，飼料蛋白質(zhì)水平對(duì)管角螺肌肉粗蛋白、粗脂肪和水分含量均有一定影響，但對(duì)粗灰分含量無顯著性影響(P>0.05)。隨著飼料蛋白質(zhì)水平的增加，管角螺體肌肉中的粗蛋白含量由59.49%增加到62.43%，水分含量由67.48%增加到69.34%，而粗脂肪含量由0.65%減小到0.49%。

2.4 肌肉氨基酸

不同蛋白質(zhì)水平的管角螺肌肉氨基酸含量有較大差異，且多數(shù)氨基酸含量隨蛋白質(zhì)水平的增加呈增大趨勢，而酪氨酸、蛋氨酸、胱氨酸和苯丙氨酸含量變化不明顯，蘇氨酸含量出現(xiàn)了減少。蛋白質(zhì)水平為45%組的氨基酸總量、必需氨基酸和鮮味氨基酸含量最多，25%組的最少，后者比前者分別少74.27%、17.47%和44.48%。25%組EAA/TAA最大，35%組最??；35%組DAA/TAA最大，其次為40%組，45%組最小(表5)。

5種蛋白質(zhì)水平下，亮氨酸和賴氨酸的AAS和CS都大于1.00，評(píng)分最高，苯丙氨酸+酪氨酸的AAS和CS都小于1.00，評(píng)分最低，其次為蛋氨酸+胱氨酸?？傮w看來，40%和45%的AAS和CS較高，25%組的評(píng)分最低(表6)。

表5 管角螺肌肉氨基酸

表6管角螺肌肉必需氨基酸評(píng)價(jià)

3 討論

3.1 配合飼料不同蛋白質(zhì)含量對(duì)管角螺生長的影響

目前，關(guān)于飼料蛋白質(zhì)對(duì)水產(chǎn)動(dòng)物生長的研究很多，許貽斌等[3]設(shè)置了8種飼料蛋白質(zhì)水平，得出隨飼料蛋白質(zhì)含量的增加，方斑東風(fēng)螺(Babyloniaareolata)的相對(duì)增質(zhì)量率和飼料轉(zhuǎn)化率呈拋物線形式，蛋白質(zhì)效率逐漸降低；Zhou等[4]研究得出方斑東風(fēng)螺隨著飼料蛋白質(zhì)含量由27%增加到43%，體重在逐漸增大，而飼料蛋白質(zhì)效率在逐漸減小，27%和33%組的飼料轉(zhuǎn)化率遠(yuǎn)高于其他組。在本試驗(yàn)中，飼料的不同蛋白質(zhì)水平對(duì)管角螺幼螺生長有一定影響。管角螺幼螺在蛋白質(zhì)含量為25%～40%時(shí)，特定生長率隨蛋白質(zhì)水平的上升而增加，但蛋白質(zhì)含量超過40%以后，隨著飼料中蛋白質(zhì)含量的增加，幼螺生長率反而下降。飼料轉(zhuǎn)化率和蛋白質(zhì)效率與螺體增重有關(guān)，飼料中蛋白質(zhì)含量逐漸增多時(shí)，飼料轉(zhuǎn)化率和蛋白質(zhì)效率也逐漸增大，說明管角螺將攝取的大部分蛋白質(zhì)用于身體生長；從圖表2中可以看出，當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)含量從35%到40%時(shí)，蛋白質(zhì)效率先上升后下降，而且蛋白質(zhì)最佳含量為37.50%或38.88%，當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)含量從超過此點(diǎn)后，蛋白質(zhì)效率呈下降形式，Colvin[5]和Alava等[6]分別在印度對(duì)蝦(P. indicus)和斑節(jié)對(duì)蝦(P. monodon)飼料蛋白質(zhì)需要量研究中也得出相似的結(jié)果。飼料中蛋白含量較高時(shí)對(duì)于對(duì)蝦并不是必需的,其大部分被用作能量,只有小部分用于生長積累[7]。

3.2 管角螺配合飼料中蛋白質(zhì)最適含量的確定

研究水產(chǎn)動(dòng)物的營養(yǎng)需求有兩類常用指標(biāo)，一是生長指標(biāo)，包括增重率、特定生長率等；二是反映水產(chǎn)動(dòng)物對(duì)飼料及其營養(yǎng)物質(zhì)利用效率的指標(biāo)，如飼料轉(zhuǎn)化率、蛋白質(zhì)效率等，評(píng)定指標(biāo)的不同會(huì)引起需要量估算值的差異[8]。所以本試驗(yàn)除了采用生長指標(biāo)評(píng)價(jià)管角螺配合飼料中蛋白質(zhì)的最適含量，還對(duì)飼料轉(zhuǎn)化率和蛋白質(zhì)效率進(jìn)行了研究。通過對(duì)特定生長率與飼料蛋白水平、飼料轉(zhuǎn)化率與飼料蛋白水平兩組數(shù)據(jù)進(jìn)行擬合，得到飼料蛋白質(zhì)的最適含量分別為37.50%和38.88%，而由生長指標(biāo)得出的飼料蛋白質(zhì)最優(yōu)含量為35%～40%，所以，本研究得出管角螺幼螺配合飼料的最適蛋白質(zhì)含量為37.50%～38.88%，這與方斑東風(fēng)螺(36.47%～43.10%)[3]、翹嘴紅鲌(Erythroculterilishaeformis)(41.35%)[9]、中華倒刺鲃(SpinibarbussinensisBleeker)幼魚(39.60%～42.20%)[10]蛋白質(zhì)需求量相近，但小于其他肉食性水產(chǎn)動(dòng)物，如黃鰭短須石首魚(yellowtail)(45%)[11]，這可能與個(gè)體差異、環(huán)境差異、攝食習(xí)慣等有關(guān)。

本試驗(yàn)僅限于水溫(29.7±1.9)℃，鹽度24.5±2.5，管角螺初始?xì)じ邽?.00～2.50 cm的生長階段，今后尚需繼續(xù)研究管角螺在不同生長階段以及多因素組合因子聯(lián)合作用下對(duì)蛋白質(zhì)的需求量，才能研發(fā)出合理的管角螺配合飼料。

3.3 飼料蛋白質(zhì)水平對(duì)管角螺體肌肉成分的影響

水產(chǎn)動(dòng)物體的營養(yǎng)成分與其攝食的飼料有一定的相關(guān)性，Juancey[12]試驗(yàn)結(jié)果表明飼料蛋白質(zhì)低時(shí)，全魚粗蛋白質(zhì)含量低；Zhou等[4]對(duì)方斑東風(fēng)螺的研究發(fā)現(xiàn)，隨著飼料蛋白質(zhì)含量的增加，肌肉粗蛋白含量明顯增加，而脂肪含量減少，灰分含量無明顯變化。而在本試驗(yàn)中，管角螺肌肉的蛋白質(zhì)含量隨飼料蛋白質(zhì)水平的增加而增加，但蛋白質(zhì)含量從35%增加到45%時(shí)，肌肉中蛋白質(zhì)的含量變化不顯著。粗脂肪含量則相反，隨飼料蛋白質(zhì)水平的增加呈下降趨勢，且各水平間差異性顯著(P<0.05)。蛋白質(zhì)水平的變化對(duì)肌肉中的粗灰分沒有顯著性影響(P>0.05)，對(duì)肌肉水分含量則有顯著影響(P<0.05)。

3.4 氨基酸

關(guān)于貝類體內(nèi)氨基酸的研究較多，如蔡麗玲等[13]檢測出長竹蟶(Solengouldi)肉的呈味氨基酸占總氨基酸的51.44%，氨基酸比例接近FAO/WHO規(guī)定的人體必需氨基酸均衡模式；尹邵武等[14]試驗(yàn)得出，金寶螺(Lyncinaaurantiumaurantium)含有17種氨基酸，其中，必需氨基酸含量為296.20 mg/g，呈味氨基酸占氨基酸總量的41.1%。許貽斌等[15]得出，方斑東風(fēng)螺呈味氨基酸含量為26.16%，必需氨基酸含量為28.24%，必需氨基酸含量低于FAO/WHO標(biāo)準(zhǔn)。但關(guān)于飼料蛋白質(zhì)水平對(duì)貝類體內(nèi)氨基酸含量的影響研究較少。李娜等[16]指出，貝類缺乏將其他營養(yǎng)成分轉(zhuǎn)化成蛋白質(zhì)的能力，所以貝類所需蛋白質(zhì)全部來自于飼料中；Mai等[17]將U-14C葡萄糖注射到美國紅鮑(Haliotisrufescenst)體內(nèi)，發(fā)現(xiàn)其體內(nèi)無法合成蘇氨酸、纈氨酸、蛋氨酸、異亮氨酸、酪氨酸、組氨酸、色氨酸、賴氨酸和精氨酸等11種氨基酸；楊紅生等[18]用不同微藻喂養(yǎng)鮑，結(jié)果表明餌料不同，鮑體內(nèi)氨基酸成分也有很大差異。本實(shí)驗(yàn)中，投喂5種蛋白質(zhì)水平不同的飼料，管角螺肌肉中的氨基酸含量也不同，且多數(shù)氨基酸含量隨蛋白質(zhì)水平的增加而增加。蛋白質(zhì)水平為45%的氨基酸總量、必需氨基酸和鮮味氨基酸含量最多，其次為40%。FAO/WHO規(guī)定的理想蛋白源氨基酸組成為EAA/TAA 40%左右，EAA/NEAA 60%以上，而本實(shí)驗(yàn)中EAA/TAA為23.09%～25.10%，EAA/NEAA為30.03%～34.44%，低于FAO/WHO的規(guī)定，這說明配合飼料的研究尚不完善，有待于進(jìn)一步探索試驗(yàn)。AAS和CS是評(píng)價(jià)蛋白質(zhì)優(yōu)劣的兩個(gè)重要評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)，40%和45%的AAS和CS較高，25%組的評(píng)分最低，5種蛋白質(zhì)水平下，苯丙氨酸+酪氨酸的AAS和CS都小于1.00，評(píng)分最低，其次為蛋氨酸+胱氨酸。所以，苯丙氨酸+酪氨酸是第一限制性氨基酸，蛋氨酸+胱氨酸為第二限制性氨基酸，而許貽斌等[4]得出，方斑東風(fēng)螺肌肉中的纈氨酸為第一限制性氨基酸；朱愛意等[19]對(duì)東極海區(qū)管角螺軟體部分分析得出其第一限制性氨基酸為纈氨酸，異亮氨酸為第二限制性氨基酸，這與本實(shí)驗(yàn)結(jié)果有所不同，這可能是受餌料或者環(huán)境的影響造成的。

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