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    探討抗生素聯(lián)合應(yīng)用對(duì)D-檢驗(yàn)陽(yáng)性葡萄球菌的體外抗菌活性

    2013-12-04 12:25:12劉黎宏
    關(guān)鍵詞:西林萬(wàn)古霉素葡萄球菌

    劉黎宏

    葡萄球菌是一群革蘭陽(yáng)性球菌,是造成醫(yī)院感染的主要病原菌之一,由于沒(méi)有科學(xué)、合理地選擇抗生素,以及甲氧西林葡萄球菌的所占的比例越來(lái)越高,使得葡萄球菌對(duì)多種抗生素產(chǎn)生多重耐藥,這在臨床上是一個(gè)嚴(yán)重的問(wèn)題[1]。所以,在對(duì)MRS造成的感染進(jìn)行治療時(shí),可以考慮大環(huán)內(nèi)酯類、B類鏈陽(yáng)性菌素以及林可酰胺類等。然而,葡萄球菌對(duì)B類鏈陽(yáng)性菌素的耐藥機(jī)制和erm基因存在著一定的關(guān)系,因?yàn)閑rm基因在進(jìn)行編碼時(shí)會(huì)產(chǎn)生一種紅霉素核糖體甲基化霉,這種霉很容易造成23SrRNA的甲基化效應(yīng),從而使B類鏈陽(yáng)性菌素對(duì)核糖體的親和力大大降低,最終產(chǎn)生耐藥[4-5],這種耐藥可以分為如下兩種:固有耐藥與誘導(dǎo)耐藥,如果是誘導(dǎo)耐藥,則在進(jìn)行常規(guī)藥敏實(shí)驗(yàn)的時(shí)候,體現(xiàn)為對(duì)克林霉素敏感,但是當(dāng)運(yùn)用雙紙片法進(jìn)行D-test的時(shí)候,能夠明顯的看到在靠近紅霉素的一側(cè)克林霉素抑菌圈在縮小。雖然細(xì)菌在沒(méi)有誘導(dǎo)劑的情況下對(duì)克林霉素比較敏感,但是將克林霉素應(yīng)用于臨床中通常是看不到效果的。下面對(duì)36株D-test陽(yáng)性葡萄球菌作常用抗生素的體外抗菌活性檢測(cè),以便于對(duì)D-test陽(yáng)性葡萄球菌的耐藥情況進(jìn)行深入地了解,正確地將抗生素應(yīng)用于臨床中。

    1 資料與方法

    1.1 菌株來(lái)源 對(duì)某醫(yī)院住院患者的各種感染標(biāo)本進(jìn)行收集,取36株D-test陽(yáng)性葡萄球菌,其中耐甲氧西林葡萄球菌占19株。

    1.2 抗生素資料 萬(wàn)古霉素、阿米卡星、左氧氟沙星[8]、紅霉素、克林霉素、頭孢西丁、頭孢唑啉等等。

    1.3 培養(yǎng)基與儀器 M-H瓊脂購(gòu)于英國(guó)公司,德靈MicroScan-Walkaway 40全自動(dòng)細(xì)菌鑒定分析儀購(gòu)于德國(guó)西門子公司。

    1.4 標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)控菌株 衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心的金黃色葡萄球菌ATCC-25923.

    1.5 細(xì)菌分離鑒定 依據(jù)一般方法對(duì)分離[3]細(xì)菌進(jìn)行培養(yǎng),在德靈MicroScan-Walkaway 40全自動(dòng)微生物分析儀下進(jìn)行細(xì)菌的鑒定,利用頭孢西丁紙片法來(lái)判斷耐甲氧西林葡萄球菌。

    1.6 D-test方法 根據(jù)有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)來(lái)進(jìn)行。

    1.7 藥敏試驗(yàn)方法[9]運(yùn)用瓊脂平板稀釋法對(duì)聯(lián)用抗生素以及單用各種抗生素的最小抑菌濃度進(jìn)行測(cè)定,依據(jù)有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)來(lái)判斷聯(lián)合抑菌指數(shù):如果FIC<1,這說(shuō)明兩種抗生素具有協(xié)同作用;12或者=2,則說(shuō)明兩種抗生素具有拮抗作用。

    2 結(jié)果

    在運(yùn)用單一抗生素時(shí),萬(wàn)古霉素的抗菌活性是最好的,抑菌率最高[6];而聯(lián)合運(yùn)用兩種抗生素時(shí),萬(wàn)古霉素與苯唑西林具有最佳的協(xié)同作用,并且它們之間不存在拮抗作用。單用抗生素以及聯(lián)用抗生素對(duì)D-test陽(yáng)性葡萄球菌的體外抗菌活性以及FIC指數(shù)的具體結(jié)果。見表1、表2。

    3 討論

    葡萄球菌大多數(shù)都不會(huì)引起疾病,只有少數(shù)可以導(dǎo)致疾病,在臨床上,往往依據(jù)血漿凝固酶以及毒素產(chǎn)生的差異,將葡萄球菌分為以下兩類:凝固酶陽(yáng)性金黃色葡萄球菌與凝固酶陰性葡萄球菌,葡萄球菌是最普遍的化膿性球菌,主要引起毛囊炎、腦濃炎、肺炎以及肝濃炎[7],還很容易引起交叉感染,菌體的直徑大概為0.8 μm,形狀為小球形。葡萄球菌可以自然變異,然而可能與臨床存在著密切聯(lián)系的變異是菌落L型變異以及藥物敏感性變異[6]。

    表1 單用以及聯(lián)用抗生素對(duì)D-test陽(yáng)性葡萄球菌的體外抗菌活性

    表2 聯(lián)合應(yīng)用抗生素對(duì)D-test陽(yáng)性葡萄球菌的FIC

    也存在著菌株對(duì)如下多種藥物耐藥:青霉素、新型青霉素、苯唑青霉素、亞胺培南、頭孢唑啉等等,把這類菌株叫做耐甲氧西林葡萄球菌,這些菌株給醫(yī)院感染控制帶來(lái)了嚴(yán)重的威脅。一般而言,有兩種途徑產(chǎn)生耐藥性,即產(chǎn)生了誘導(dǎo)酶,例如β內(nèi)酰胺酶,這些誘導(dǎo)酶能夠使抗生素中的有效基因分解;另外一種就是敏感菌株經(jīng)過(guò)相關(guān)噬菌體對(duì)耐藥基因的質(zhì)粒進(jìn)行轉(zhuǎn)導(dǎo)從而具有耐藥性[8]。

    就目前的情況來(lái)看,臨床醫(yī)學(xué)面臨的主要難題之一是如何治療耐藥葡萄球菌引起的感染,在本文的實(shí)驗(yàn)當(dāng)中有36株單用抗生素的D-test陽(yáng)性葡萄球菌MIC,其中VAN的抗菌活性以及抗菌率都是非常好的,其次是AMK與LVF,AMK的抑菌率達(dá)到了92%,LVF的抑菌率為69%。

    但是依據(jù)實(shí)驗(yàn)室的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn),在治療MRS時(shí),有些藥物例如碳青霉烯類、β內(nèi)酰胺酶抑制劑以及頭孢類等可能只有在體外才有活性,而在臨床上卻沒(méi)有活性[9]。所以,在本實(shí)驗(yàn)中,CFZ真正的抑菌率應(yīng)該是34%,隨著醫(yī)學(xué)技術(shù)水平的不斷提高,VAN在臨床中的應(yīng)用也越來(lái)越廣泛,其中,異質(zhì)性萬(wàn)古霉素中介金黃色葡萄球菌大大降低了葡萄球菌對(duì)VAN的敏感度,因此,在臨床上應(yīng)該要將這一原理充分利用起來(lái)。

    將MIC90與MIC50聯(lián)合起來(lái)使用,相對(duì)于單獨(dú)使用藥物的MIC值而言,降低了3~15倍,這說(shuō)明把幾種藥物聯(lián)合起來(lái)使用,具有一定的協(xié)同作用,且協(xié)同作用存在著差異,聯(lián)合用藥可以使單藥用量降低,這樣可以避免單藥用量過(guò)多而產(chǎn)生一些不良的反應(yīng),除此之外,由于AMK、VAN等都具有腎毒性以及耳毒性,如果聯(lián)合起來(lái)使用則會(huì)使毒性大大增加,因此,通常情況下都不同時(shí)使用。

    就FIC指數(shù)而言,CFZ與VAN聯(lián)合起來(lái)使用效果是最好的,它們的協(xié)同作用達(dá)到了70%,并且不存在拮抗作用,所以在臨床上治療D-檢驗(yàn)陽(yáng)性葡萄球菌時(shí),應(yīng)該要盡可能地將CFZ與VAN聯(lián)合起來(lái)使用。

    因?yàn)槠咸亚蚓哪退幵矸浅5膹?fù)雜,耐藥率也在不斷上升,特別是當(dāng)前醫(yī)院出現(xiàn)功能異質(zhì)性萬(wàn)古霉素中介金黃色葡萄球菌的感染時(shí),在臨床上盡量不要單獨(dú)用藥,而要聯(lián)合用藥。因?yàn)楦鞣N藥物都有其自身的特性,作用的主要部位以及作用原理都是不同的,聯(lián)合起來(lái)使用可以說(shuō)達(dá)到了藥物互補(bǔ)的目的,可以全面地對(duì)耐藥菌株進(jìn)行抑制,避免耐藥菌株重復(fù)出現(xiàn),特別是對(duì)于那些敏感性下降的菌株以及VAN的耐藥菌株[10]。所以,對(duì)于葡萄球菌引起的一系列感染,細(xì)菌室必須要進(jìn)行D-test,以盡快將病原菌的耐藥表型找出來(lái),給臨床治療提供科學(xué)、有效的依據(jù)。根據(jù)用藥經(jīng)驗(yàn)、患者個(gè)人的實(shí)際情況以及有關(guān)科學(xué)標(biāo)準(zhǔn),選擇最好的抗生素,提高治療效率。

    綜上所述,由于葡萄球菌的耐藥性在逐漸增強(qiáng),再加上萬(wàn)古霉素的金黃色葡萄球菌病例數(shù)目的增多,在對(duì)葡萄球菌引起的感染進(jìn)行治療時(shí),最好是聯(lián)合使用抗生素,這樣可以大大提高治療效率。

    [1]徐修禮,于雄利,孫怡群,等.抗生素聯(lián)用對(duì)D-檢驗(yàn)陽(yáng)性葡萄球菌體外抗菌活性的分析[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床,2007,4(10):921-922.

    [2]張卓然.臨床微生物學(xué)及微生物檢驗(yàn)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2003:501-502.

    [3]沈小波.類芽孢桿菌B69抗生素的分離鈍化、結(jié)構(gòu)鑒定和生物學(xué)活性研究[D].杭州:浙江大學(xué),2011:1-4.

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    [7]孫曉萍.左氧氟沙星與痰熱清注射液配伍治療細(xì)菌性肺炎40例療效觀察[J].陜西醫(yī)學(xué)雜志,2010,39(9):1228.

    [8]廖冰,魏茂剛,羅林城,等.左氧氟沙星聯(lián)合痰熱清治療細(xì)菌性肺炎療效觀察[J].西部醫(yī)學(xué),2011,23(11):2158-2159.

    [9]陳民均.美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化研究所2005年版有關(guān)藥敏試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化更新要點(diǎn)[J].中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2005,28(4):449-451.

    [10]孫曉霞,劉蓬蓬,孫運(yùn)波,等.耐甲氧西林金黃色葡萄球菌感染的危險(xiǎn)因素分析[J].齊魯醫(yī)學(xué)雜志,2009,24(5):447-450.

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