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    土當(dāng)歸對(duì)輻射損傷小鼠體重與血常規(guī)的影響

    2013-11-25 13:55:20秦繼勇李文輝畢良文
    江蘇中醫(yī)藥 2013年1期
    關(guān)鍵詞:輻射損傷水提物紅細(xì)胞

    劉 穎 秦繼勇 李文輝 畢良文 段 偉 常 莉

    (1.云南省腫瘤醫(yī)院、昆明醫(yī)科大學(xué)第三附屬醫(yī)院,云南昆明 650118;2.南京醫(yī)科大學(xué)第二附屬醫(yī)院,江蘇南京 210011;3.延安大學(xué)附屬醫(yī)院,陜西延安 716000)

    本研究選用云南海拔3000米以上高輻射藏族和納西族地區(qū),具有活血化瘀、補(bǔ)血益氣、滋補(bǔ)強(qiáng)壯等功效的天然植物藥土當(dāng)歸(隆顎當(dāng)歸,Angelica Oncosepala),觀察其水提物灌胃對(duì)輻射損傷小鼠體重及紅細(xì)胞、白細(xì)胞、血小板數(shù)量的影響,目的是在云南高海拔地區(qū)尋找出新的,高效、低毒的,有廣泛臨床藥用及食用價(jià)值的抗輻射天然植物藥。

    1 實(shí)驗(yàn)材料

    1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 健康SPF級(jí)昆明種小鼠,雄性,6~8周齡,體重18~22g,由云南省昆明醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供。

    1.2 受試藥物 由云南省中醫(yī)中藥研究所提供土當(dāng)歸水提物。

    1.3 實(shí)驗(yàn)試劑與儀器 RPMI-1640(GIBCO公司生產(chǎn),批號(hào):1 296119)、高氯酸、苦味酸、氯化鈣、冰醋酸、福爾馬林、60C0遠(yuǎn)距離治療機(jī)、離心機(jī)、普通光學(xué)顯微鏡、血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀、分光光度計(jì)、電子天平、烘箱等。

    2 實(shí)驗(yàn)方法

    2.1 土當(dāng)歸水提物提取 將藥物250g浸泡于3000mL清水中24h,加熱煮沸 30min,冷卻過濾,得濾液 1;藥渣中加入2000mL清水,加熱煮沸30min,冷卻過濾,得濾液2;再次在藥渣中加入2000mL清水,加熱煮沸30min,冷卻過濾,得濾液3,藥渣棄去。合并3次濾液,靜置過夜,次日取上清液加熱蒸發(fā)濃縮至浸膏,浸膏放入85℃烘箱烘干,取出藥物,保存待用。

    2.2 藥物劑量 按動(dòng)物體表面積比率換算等效劑量法計(jì)算,參照文獻(xiàn)[1],計(jì)算結(jié)果擴(kuò)大5倍作為高劑量,倍比稀釋得出中、低劑量,即 2.236g/kg、1.118g/kg、0.559g/kg。

    2.3 給藥方式 將藥物用蒸餾水配成相應(yīng)濃度,按小鼠體重計(jì)算給藥劑量,灌胃給藥。正常對(duì)照組、照射對(duì)照組小鼠給予0.2mL蒸餾水灌胃。

    2.4 動(dòng)物分組 將50只小鼠隨機(jī)分成5組,每組10只,分別作上標(biāo)記以便區(qū)分,分別是:正常對(duì)照組(normal control)、照射對(duì)照組(irradiating control IR)、照射+高劑量藥物組(IR+HD)、照射+中劑量藥物組 (IR+MD)、照射+低劑量藥物組(IR+LD)。

    2.5 照射條件60Co-γ射線一次性照射6Gy,吸收劑量率為0.19Gy/min,源皮距為80cm。

    2.6 實(shí)驗(yàn)方法 動(dòng)物分組稱重小鼠,并剪斷小鼠尾巴取血1次,檢測(cè)血常規(guī)。隨后將小鼠送往云南省腫瘤醫(yī)院放射治療中心一次性照射60Co-γ射線6Gy,照射后土當(dāng)歸水提物連續(xù)灌胃給藥 10d,照射后第 2、4、7、14 天各稱 1 次體重,第 5、14天取血檢測(cè)血常規(guī)。

    2.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 不同時(shí)間的小鼠體重和紅細(xì)胞、白細(xì)胞、血小板計(jì)數(shù)均以()表示,統(tǒng)計(jì)學(xué)分析使用SPSS11.5軟件進(jìn)行處理。統(tǒng)計(jì)方法使用單因素方差分析 (one-way ANOVA),組間兩兩比較用q檢驗(yàn)。以α=0.05作為檢驗(yàn)水準(zhǔn),P≤0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

    照射前5組小鼠體重和白細(xì)胞、紅細(xì)胞、血小板細(xì)胞數(shù)值無(wú)明顯差異。照射后,與正常對(duì)照組比較,照射對(duì)照組上述指標(biāo)均明顯下降。與照射對(duì)照組比較,土當(dāng)歸水提物中、低劑量可明顯升高輻照后14d小鼠的紅細(xì)胞計(jì)數(shù);照射+低劑量藥物組照射后14d紅細(xì)胞計(jì)數(shù)亦明顯高于同時(shí)期照射+高劑量藥物組。其余指標(biāo)和時(shí)段各藥物干預(yù)組與照射對(duì)照組比較無(wú)顯著性差異。見表1~表4。

    4 討論

    近年來,一些學(xué)者對(duì)當(dāng)歸、土當(dāng)歸的抗輻射作用做了研究。張端蓮等[2]應(yīng)用當(dāng)歸注射液對(duì)60Co-γ照射損傷后的小鼠給予治療,發(fā)現(xiàn)當(dāng)歸可使輻射損傷后的小鼠卵泡數(shù)目恢復(fù)正常,卵泡平均面積增加。李宗山等[3]報(bào)道100%當(dāng)歸水浸出液可使照射小鼠淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng)顯著增強(qiáng),且未見副作用。陳蕙芳[4]介紹了土當(dāng)歸(Aralia cordata Thunb)對(duì)于放射損傷引起的造血功能不全有恢復(fù)作用。但國(guó)內(nèi)外未見有研究土當(dāng)歸 (隆顎當(dāng)歸,Angelica Oncosepala)放射保護(hù)作用的文獻(xiàn)報(bào)道。

    表1 土當(dāng)歸水提物對(duì)輻照小鼠體重的影響g

    表2 土當(dāng)歸水提物對(duì)輻照小鼠白細(xì)胞計(jì)數(shù)的影響 ×109/L

    表3 土當(dāng)歸水提物對(duì)輻照小鼠紅細(xì)胞計(jì)數(shù)的影響 ×1012/L

    表4 土當(dāng)歸水提物對(duì)輻照小鼠血小板計(jì)數(shù)的影響 ×109/L

    本研究結(jié)果可見,照射對(duì)照組小鼠體重、白細(xì)胞、紅細(xì)胞、血小板計(jì)數(shù)均明顯低于正常對(duì)照組,這說明本次實(shí)驗(yàn)輻射損傷模型建立成功,其實(shí)驗(yàn)得出的結(jié)果是可靠的,同時(shí)也說明該實(shí)驗(yàn)?zāi)P偷目茖W(xué)性和可重復(fù)性,與文獻(xiàn)[5-6]一致。照射+土當(dāng)歸水提物組小鼠體重和外周血象中白細(xì)胞、血小板與照射對(duì)照組比較均無(wú)顯著性差異,分析原因有可能是對(duì)藥物只進(jìn)行了粗提,粗提取物中所含有效成分可能太少,此外所用的提取方法也可能使某些有效成分未能提取出來。從土當(dāng)歸水提物實(shí)驗(yàn)結(jié)果中可知,照射后第14天,三個(gè)照射給藥組紅細(xì)胞計(jì)數(shù)值均高于照射對(duì)照組,低、中劑量藥物組與照射對(duì)照組之間有顯著性差異,低、高劑量藥物組之間也有顯著性差異,提示土當(dāng)歸水提物有促進(jìn)輻射損傷小鼠外周血紅細(xì)胞恢復(fù)的趨勢(shì)。但僅依靠這一個(gè)指標(biāo)我們尚不能判斷土當(dāng)歸水提物對(duì)輻射損傷小鼠有防護(hù)作用,但這一結(jié)果值得我們進(jìn)一步深入研究。

    [1]陳奇.中藥藥理研究方法學(xué).北京:人民衛(wèi)生出版社,1993:1103

    [2]張端蓮,王松山,余墨聲,等.當(dāng)歸對(duì)輻射損傷后小鼠卵泡影響的定量研究.中草藥,1997,28(3):156

    [3]李宗山,邱世翠,曹奇志,等.當(dāng)歸抗X線輻射對(duì)小鼠淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng)的影響.濱州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào).2004,27(6):424

    [4]陳蕙芳.天然藥物和傳統(tǒng)藥物:土當(dāng)歸提取物治療放射引起的造血功能不全.國(guó)外藥訊,1992(5):35

    [5]Hari kumer K B,Sabu MC,Lima PS,et al.Modulation of haematopoetie system and antioxidant enzymes by Emblica officinalis gaertn and its protective role againstgammaradiation induced damages in mice.J Radiat Res,2004,45(4):549

    [6]郭群,陳水英,張作民,等.心樂靈抗輻射作用的實(shí)驗(yàn)研究.中醫(yī)藥臨床雜志,2004,16(2):101

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