P53蛋白鑒別水腫性流產(chǎn)及葡萄胎的應用

胡桂明，任景麗，王憲遠

(鄭州大學第二附屬醫(yī)院病理科 河南鄭州 450014)

葡萄胎(Hydatidiform mole，HM)是較常見的異常妊娠，在世界范圍內的發(fā)生率為1:(500～1 000)次妊娠［1］，又分為完全性葡萄胎(Complete hydatidiform，CHM)和部分性葡萄胎(Partial hydatidiform，PHM)，CHM和PHM可以由免疫組化標記P57蛋白得到很好的鑒別［2］，但水腫性流產(chǎn)(Hydropic abortus，HA)與兩者的鑒別還是一個難點，有研究報道P53蛋白對兩者鑒別有一定價值［1］。本實驗中應用P53蛋白分別對正常絨毛、水腫性流產(chǎn)、部分性葡萄胎和完全性葡萄胎標記，分析其臨床意義。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 臨床資料:收集鄭州大學第二附屬醫(yī)院2010年5月至2012年5月臨床和病理形態(tài)確診的正常胎盤絨毛、水腫性流產(chǎn)、部分性葡萄胎和完全性葡萄胎病例各20例。

1.1.2 方法與試劑:應用免疫組化SP法檢測突變型P53蛋白在正常胎盤絨毛、水腫性流產(chǎn)、部分性葡萄胎和完全性葡萄胎中的表達水平，操作嚴格按照試劑盒說明書進行，已知陽性切片做陽性對照，鼠抗人P53克隆抗體購買自Gene Tech公司。

1.2 免疫組化結果判定 免疫組化結果由兩位病理醫(yī)師交叉判定，P53的免疫組化結果判斷參照陳云新等［3］報道的方法，P53的陽性表達主要定位于細胞滋養(yǎng)細胞的胞核，其胞核呈明確的棕黃色判定為陽性;在切片的不同部分選取5個高倍視野，每個視野計數(shù)100個細胞，計算陽性細胞占所有細胞的比例，陽性細胞數(shù)平均＜10%為陰性，≥10%為陽性。

1.3 統(tǒng)計學處理 運用FISH確切概率法及t檢驗進行數(shù)據(jù)分析，P＜0.05，差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 正常胎盤絨毛及HA、HM組織病理學特點 正常胎盤絨毛組織未見明顯水腫，滋養(yǎng)細胞無明顯增生;HA可見絨毛間質輕度水腫，滋養(yǎng)細胞無明顯增生;PHM的絨毛間質水腫，可見中央水池形成及滋養(yǎng)細胞包涵體，絨毛周圍滋養(yǎng)細胞局灶性增生，絨毛間質有或無血管，血管腔中可見胎兒的有核紅細胞;CHM可見絨毛間質明顯水腫，中央水池形成，滋養(yǎng)細胞增生明顯，絨毛間質中血管消失。

2.2 P53蛋白在正常絨毛、HA和HM中表達水平正常絨毛中P53蛋白呈陰性表達，HA中僅有2例P53蛋白呈陽性表達，但陽性細胞數(shù)＜5%，按照免疫組化結果標準判定為陰性;PHM中P53蛋白在20例均為陽性表達，每例陽性細胞數(shù)在50%以上，CHM中P53蛋白在20例中也均為陽性表達，每例陽性細胞數(shù)高達80%以上;P53蛋白在各組病例中的陽性率，PHM較HA明顯增加，CHM較PHM明顯增加，差異均有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，見表1。

表1 P53蛋白在正常絨毛、HA、CHM、PHM中表達水平(n，%)

3 討論

葡萄胎的發(fā)生由基因遺傳引起，完全性葡萄胎有一個雄性遺傳的補體，其所有遺傳的物質是父親衍化的，即由“空卵”單精受精引起，隨后單倍體精子的補體復制導致一個雙倍體基因型;而部分性葡萄胎通常是三倍體，由兩個精子與一個卵子發(fā)育形成，導致2:1的父系與母體染色體比。目前，完全性葡萄胎與部分性葡萄胎的鑒別用P57蛋白標記，能夠很好的區(qū)分開來，但是，隨著超聲影像學的發(fā)展，早期葡萄胎的發(fā)現(xiàn)使其與水腫性流產(chǎn)從顯微鏡下很難區(qū)分開來，診斷不明確直接影響患者的治療和心理康復，已有學者用P53蛋白實驗性用于兩者的鑒別診斷，并得出一定數(shù)據(jù)［3-4］，在本實驗中，用 P53蛋白標記正常胎盤絨毛、水腫性流產(chǎn)、部分性葡萄胎和完全性葡萄胎，進一步觀察其表達水平，分析其意義。

P53基因位于17號染色體斷臂，其編碼產(chǎn)物為相對分子質量為53 kU的核結合蛋白，野生型P53蛋白是細胞生長的負調節(jié)因子，被認為是抗癌基因，當P53基因突變形成突變型P53時，就具有了致癌作用［5］?？蛋察o等［6］的研究表明，突變型P53在正常絨毛中不表達，但在絨癌的表達中高達88.9%，說明P53蛋白在葡萄胎的發(fā)生發(fā)展中可能起到一定的作用。在本實驗中，正常絨毛中P53蛋白呈陰性表達，水腫性流產(chǎn)中僅有少數(shù)病例P53蛋白呈陽性表達，但陽性細胞數(shù)＜5%，按照免疫組化結果標準判定為陰性;部分性葡萄胎中P53蛋白的陽性細胞數(shù)為50%以上，完全性葡萄胎中P53蛋白的陽性細胞數(shù)高達80%以上，本組結果與陳云新［3］相似，說明P53蛋白在鑒別水腫性流產(chǎn)和葡萄胎時能夠起到一定的輔助作用。

P53蛋白在鑒別水腫性流產(chǎn)和葡萄胎的具體機制還尚不明確，需更多實驗來進一步證實。同時，水腫性流產(chǎn)和葡萄胎的鑒別還需要更多的研究人員重視，以期待能找出更為理想的鑒別標準，使病理診斷更為準確。

［1］Sebire N J，F(xiàn)isher R A，Rees H C.Histopathological diagnsis of partial and complete hydatidiform mole in the first trimester of pregnancy［J］.Pediatr Der Pathol，2003，6(1):69-77.

［2］楊紹敏，由江峰，張小為，等.P57KIP2表達結合流式細胞術分析對葡萄胎的輔助診斷價值［J］.中華病理學雜志，2009，38(9):580-584.

［3］陳云新，沈丹華，顧依群，等.P57和P53蛋白在水腫性流產(chǎn)及葡萄胎鑒別診斷中的作用［J］.中華病理學雜志，2011，40(10)，694-697.

［4］蔣莉萍，袁金蘭，肖鳳，等.P57和P53在完全性和部分性葡萄胎中的表達及意義［J］.中國實驗診斷學，2011，15(10):1755-1757.

［5］Garxia C A，Ahmadian A.Mutation detection by pyrosequencmg:Sequencing of exona 5-8 of the tumor suppressor gene［J］.Gene(Amsterdam)，2000，253(2):249.

［6］康安靜，孫潤芹，黃鶯，等.妊娠滋養(yǎng)細胞疾病P16和P53蛋白表達及意義［J］.西安醫(yī)科大學學報，2002，23(3)，233-235.