曾 勁 (廣東省廣州市番禺區(qū)中醫(yī)院,廣東 廣州 511400)
輸血是臨床搶救患者的重要手段之一,其安全性關(guān)系到患者的生命安全[1]。同時血液的保存時間是有限的,觀察血液儲存時間和紅細(xì)胞免疫功能的變化的研究,和患者的輸血效果關(guān)系密切[2]。筆者通過我院血液儲存時間對紅細(xì)胞免疫功能影響情況進(jìn)行分析,現(xiàn)報告如下。
1.1 一般資料:選取2012年6月中心血站采集的無償獻(xiàn)血標(biāo)本80份作為本次觀察對象,血液標(biāo)本的各項指標(biāo)均符合獻(xiàn)血標(biāo)準(zhǔn)。男女比例、年齡分布狀態(tài)等一般性資料差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。將所采集的血液和CPD保養(yǎng)液進(jìn)行充分的混勻,向血管細(xì)管小辮內(nèi)注入,留取0.5 ml/份作為新鮮的血液標(biāo)本進(jìn)行當(dāng)天的檢測,其余通過封閉成3段,4℃保存進(jìn)行備檢。
1.2 儀器與方法
1.2.1 儀器:全自動生化分析儀(日立7180全自動生化分析儀 )、放射免疫分析儀(羅氏2010全自動發(fā)光免疫分析儀 )。紅細(xì)胞C3b受體(RBC-C3b)花環(huán)率、紅細(xì)胞免疫復(fù)合物(RBC-IC)花環(huán)率均通過郭峰法進(jìn)行測定,試劑(上海長海醫(yī)院輸血科,生產(chǎn)批號20110909),紅細(xì)胞超氧化物歧化酶(RBC-SOD)試劑(南京建成生物制品研究所,生產(chǎn)批號20111015),白介素8(IL-8)通過放射免疫法進(jìn)行測定,試劑盒(北方生物技術(shù)研究所,生產(chǎn)批號201112)
1.2.2 方法:紅細(xì)胞C3b受體花環(huán)率試驗[3]:取清滌后的紅細(xì)胞0.1ml配制成濃度為1.25×107/ml的紅細(xì)胞懸液。取紅細(xì)胞懸液50 μl加補(bǔ)體致敏酵母菌懸液50 μl,在試管內(nèi)充分混勻,置37℃水浴30 min,加生理鹽水100 ml稀釋混勻,加0.25%戊二醛50 ml固定,取出涂片做瑞氏染色,高倍鏡下計數(shù)200個紅細(xì)胞,以一個紅細(xì)胞結(jié)上2個或2個以上酵母菌的細(xì)胞為陽性花環(huán),換算成百分率為RBC-C3b受體活性指標(biāo)。RBC-SOD、RBC-IC測定:參照RBC-C3b酵母花環(huán)實驗進(jìn)行測定。IL-8仿真試驗:通過放射免疫試劑盒操作步驟進(jìn)行測定IL-8。
1.3 觀察指標(biāo):觀察血液儲存1天、15天、30天時 RBCC3b、RBC-IC、RBC-SOD和IL-8情況。
1.4 統(tǒng)計學(xué)分析:采用統(tǒng)計學(xué)軟件SPSS 15.0建立數(shù)據(jù)庫,血液儲存1天、15天、30天紅細(xì)胞免疫指標(biāo)通過t檢驗分析,P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
血液儲存1天、15天、30天時 RBC-C3b、RBC-IC、RBC-SOD和IL-8情況見表1。
表1 血液儲存1天、15天、30天時RBC-C3b、RBC-IC、RBC-SOD、IL-8情況()
表1 血液儲存1天、15天、30天時RBC-C3b、RBC-IC、RBC-SOD、IL-8情況()
天數(shù) 例數(shù)RBC-C3b(%)RBC-IC(%)RBC-SOD(U/gHb)IL-8(ng/ml)1天80 20.3±2.8 5.0±1.6 16258±453163.7±36.715天 80 15.4±2.2 6.5±2.0 13456±407880.8±40.830天80 10.3±1.9 9.5±3.1 10552±3967110.2±36.7
紅細(xì)胞補(bǔ)體受體Ⅰ型分子(CR1)普遍存在于紅細(xì)胞、B淋巴細(xì)胞、粒細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞等細(xì)胞上,但由于體內(nèi)紅細(xì)胞總數(shù)遠(yuǎn)大于其他細(xì)胞總數(shù),故紅細(xì)胞上CR1分子占體內(nèi)所有CR1分子總數(shù)的90%左右。在正常狀態(tài)下,人紅細(xì)胞CR1可將大部分IC黏附并將其帶至肝臟、脾臟,最后由巨噬細(xì)胞予以清除,因此CR1是紅細(xì)胞免疫功能的重要物質(zhì)基礎(chǔ)。研究表明,在疾病等外界因素作用下,產(chǎn)生的IC在肝臟、腎臟等組織器官大量沉積[4],將激活補(bǔ)體系統(tǒng),引起炎性反應(yīng),導(dǎo)致肝、腎損傷等,因此RBC-CR1與IC的結(jié)合能力對清除循環(huán)中的IC,保護(hù)肝功能、腎功能有著重要的作用。近年來隨著醫(yī)學(xué)水平的不斷發(fā)展,對于輸血安全的程度也在逐步的提高。臨床輸血過程中,不僅要對組織細(xì)胞供氧生理特點,同時還要注意觀察紅細(xì)胞免疫功能測定,從而保證輸血安全性。筆者通過對中心血站采集的無償獻(xiàn)血標(biāo)本80份進(jìn)行分析,觀察無償獻(xiàn)血標(biāo)本80份1天、15天、30天 RBC-C3b、RBC-IC、RBCSOD和IL-8情況,結(jié)果表明,血液儲存15天、30天 RBCC3b、RBC-IC、RBC-SOD和IL-8均低于血液儲存1天,同時血液儲存30天時 RBC-C3b、RBC-IC、RBC-SOD和IL-8均低于血液儲存15天時。綜上所述,血液在貯存期間隨著儲存時間的延長,變化明顯增強(qiáng),為指導(dǎo)臨床安全輸血提供了可靠地理論依據(jù)。
[1]張雅西.血液儲存時間對紅細(xì)胞免疫功能影響及臨床安全輸血分析[J]. 中外醫(yī)療,2012,5(9):2.
[2]雷雨激,彭 益,呂海濤.血液儲存時間對消化道腫瘤手術(shù)患者紅細(xì)胞免疫功能的影響[J].中國現(xiàn)代醫(yī)生,2011,49(32):41.
[3]郭 峰,錢寶華,張樂之.現(xiàn)代紅細(xì)胞免疫學(xué)[M].上海:第二軍醫(yī)大學(xué)出版社,2002:22-182.
[4]彭 益,曹曉娟,雷雨激,等.血液儲存時間對紅細(xì)胞免疫功能的影響與臨床安全輸血的研究[J].中國輸血雜志,2010,23(4):269.