實驗性子宮肌瘤模型的建立及姜黃素的干預(yù)

林宇星

福建省立醫(yī)院藥學(xué)部，福建 福州 350001

實驗性子宮肌瘤模型的建立及姜黃素的干預(yù)

林宇星

福建省立醫(yī)院藥學(xué)部，福建 福州 350001

目的：研究姜黃素對子宮肌瘤大鼠的影響及作用機制。方法：采用雌二醇及孕酮誘導(dǎo)雌性W istar大鼠子宮肌瘤模型，進行20周的藥物干預(yù)，觀察大鼠血的生化指標、雌二醇、孕酮及子宮病理變化。結(jié)果：姜黃素與米非司酮均能降低W istar大鼠子宮系數(shù)、宮頸直徑及宮體直徑，減輕子宮病理損害。姜黃素能降低血清中雌二醇和孕酮的含量。結(jié)論：姜黃素能改善大鼠子宮肌瘤病變，其作用機制可能與降低血漿雌二醇和孕酮有關(guān)。

實驗性子宮肌瘤；姜黃素；干預(yù)

姜黃是姜科植物姜黃Curcuma longa L.的干燥根莖，臨床用于治療乳腺癥、子宮肌瘤、子宮內(nèi)膜異位癥等婦科疾患，取得很好的治療效果［1，2］，本研究通過在實驗性高雌、孕激素大鼠模型［3］上觀察姜黃的最主要有效成分姜黃素對大鼠子宮體指標、子宮肌瘤病理學(xué)、雌、孕激素水平的影響，探討姜黃對子宮肌瘤大鼠的保護作用機制。

1 實驗材料及方法

1.1 實驗材料 清潔級雌性Wistar大鼠，體重150～180g，由福建省立醫(yī)院實驗動物中心提供；苯甲酸雌二醇（國藥準字H12020530，1m l：5mg）天津金耀氨基酸有限公司生產(chǎn)，批號1203251；孕酮（國藥準字H11022340，1m l：20mg），山西晉新雙鶴藥業(yè)有限責(zé)任公司生產(chǎn)，批號201206161；市售花生油，高壓滅菌備用。米非司酮片（國藥準字H20083780，20mg），湖北葛店人福藥業(yè)有限責(zé)任公司生產(chǎn)，批號201207113。姜黃素，西安和霖生物技術(shù)有限公司，99%純度。雌二醇（E2酶聯(lián)免疫試劑盒購自上海勁馬實驗設(shè)備有限公司；孕酮 （Pg）檢測試劑盒 （酶聯(lián)免疫吸附試驗法）購自北京樂博生物科技有限公司。

1.2 動物分組及模型建立 60只清潔級雌性Wistar大鼠，隨機分為正常對照組、子宮肌瘤模型組、米非司酮對照組和姜黃素高、中、低治療組，每組10只動物。子宮肌瘤模型組、米非司酮對照組和姜黃素治療組每周隔日肌肉注射苯甲酸雌二醇0.2mg／d，共20周。第14周起每周肌肉注射孕酮1次0.7mg／d，共7周。正常對照組每周隔日肌肉注射高壓滅菌花生油0.2ml，共20周。

1.3 實驗方法 治療組第11周起分別給予姜黃素10、20、40mg／kg灌胃；米非司酮對照組第11周起給予米非司酮3mg／kg灌胃，正常對照組和子宮肌瘤模型組給予等量生理鹽水灌胃，連續(xù)10周。用藥第10周末，大鼠稱重后給予腹腔注射30mg／kg戊巴比妥鈉，頸正中切口，頸動脈取血，2000r／min離心10min，取上清，－20℃保存，用于雌二醇和孕酮檢測。取出子宮，稱重，計算子宮系數(shù)。測量宮頸和宮體處的最大直徑。用10%中性福爾馬林固定子宮組織，石蠟包埋、切片后，行常規(guī)HE及過碘酸Schiff（PAS）染色。

1.4 檢測指標

1.4.1 一般指標 子宮重量除以大鼠的體重即為子宮系數(shù)。同時測量宮頸和宮體處的最大直徑。

1.4.2 子宮組織病理學(xué)檢查 每張PAS染色切片在光鏡下（×200）觀察并測定子宮直徑、子宮壁厚度、肌層厚度、子宮壁平滑肌增生狀況、內(nèi)皮細胞類型及增生情況及子宮壁炎細胞浸潤的程度。子宮壁平滑肌增生及肥大狀況由輕到重分別評為1分、2分、3分、4分。宮壁擴張、肌細胞萎縮者根據(jù)萎縮程度由輕到重評分。累積每組評分，并計算出±sd，分值越高提示子宮平滑肌增生程度越嚴重。

1.4.3 生化指標 大鼠血清采用酶聯(lián)免疫法進行檢測雌二醇和孕酮的含量。

1.5 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS 10.0軟件進行統(tǒng)計學(xué)分析，計量資料均數(shù)用X＋SD表示，組間比較采用方差分析和P檢驗。

2 實驗結(jié)果

2.1 一般情況的比較 實驗期間，子宮肌瘤模型組有2只大鼠，陽性藥組、治療組低劑量組各有1只大鼠因感染等原因而死亡，未納入最后統(tǒng)計。子宮肌瘤模型組大鼠較正常對照組子宮系數(shù)、宮頸直徑、宮體直徑增加（P＜0.01），表明子宮肌瘤大鼠模型復(fù)制成功。治療組能降低大鼠子宮系數(shù)、宮頸直徑、宮體直徑，和模型組比較有統(tǒng)計學(xué)差異 （P＜0.001），說明藥物對子宮肌瘤有抑制作用。結(jié)果見表1。

表1 大鼠子宮系數(shù)、宮頸直徑、宮體直徑的比較（mean±sd）

2.2 子宮病理學(xué)變化的比較 病理組織學(xué)觀察結(jié)果表明，模型組大鼠子宮壁肌層增厚，平滑肌細胞排列紊亂，呈環(huán)行或局灶性，并向系膜區(qū)延伸，增生的平滑肌細胞體積變大，胞核大，核仁大而明顯。內(nèi)膜上皮也較正常上皮增生，呈柱狀，并出現(xiàn)鱗狀細胞化生，宮內(nèi)膜腺體數(shù)目減少，有部分子宮肌瘤病變嚴重，宮壁組織壞死，局部有大量炎細胞浸潤 （化膿性改變），治療組及陽性組未見化膿性改變，子宮平滑肌增生程度減輕，提示治療組及陽性對子宮肌瘤有治療作用。結(jié)果見表2。

2.3 大鼠激素水平的比較 實驗結(jié)果顯示，模型組與正常組比較，大鼠血清中雌二醇的含量明顯上升，而治療組能抑制雌二醇和孕酮的上升趨勢。見表2。

表2 大鼠子宮病理學(xué)和激素水平變化的比較（mean±sd）

3 討論

現(xiàn)代醫(yī)學(xué)認為，乳腺增生、子宮內(nèi)膜異位癥、子宮肌瘤等病癥與機體雌激素水平過高而孕酮拮抗不足密切相關(guān)，設(shè)法降低雌激素、孕激素濃度是治療措施的首選［4－8］。西醫(yī)常采用米非司酮這一雌激素受體部分激動劑與雌二醇競爭雌激素受體，從而達到減弱雌激素作用的目的［9，10］。

我們的實驗結(jié)果表明，治療組與米非司酮組能降低大鼠子宮系數(shù)、宮頸直徑、宮體直徑，有統(tǒng)計學(xué)差異，減少子宮平滑肌增生程度，降低雌二醇和孕酮含量的趨勢。傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)把姜黃認為是活血化瘀藥，因此原先的研究多是從活血，改善微循環(huán)等角度出發(fā)研究姜黃對子宮肌瘤的作用［11，12］，從新的角度揭示了姜黃的治療作用機制，提示姜黃素是治療雌二醇和孕酮水平異常升高致子宮肌瘤、子宮內(nèi)膜異位癥、乳腺增生等癥的有效藥物。為將來開發(fā)有效的子宮肌瘤藥物提供了新的思路。

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［11］盛順良，莫湘瓊，歐陽新平，何平平，李卓，周建斌.姜黃素對人子宮肌瘤細胞增殖、凋亡的影響及機制探討［J］.山東醫(yī)藥，2012，（34）：27－29.

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R737.33

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1007－8517（2013）11－0016－02

2013.03.28）

林宇星 （1964－），男，福建省立醫(yī)院藥學(xué)部副主任藥師。