加味五苓散對(duì)高尿酸血癥大鼠總膽固醇及低密度脂蛋白膽固醇的調(diào)節(jié)作用

★ 張玉珊 余瓊瓊 楊亞龍 黃海

(1.泉州醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校 泉州 362000 ;2.福建中醫(yī)藥大學(xué) 福州 350108)

加味五苓散對(duì)高尿酸血癥大鼠總膽固醇及低密度脂蛋白膽固醇的調(diào)節(jié)作用

★ 張玉珊1余瓊瓊1楊亞龍1黃海2

(1.泉州醫(yī)學(xué)高等專科學(xué)校 泉州 362000 ;2.福建中醫(yī)藥大學(xué) 福州 350108)

目的：觀測(cè)加味五苓散(五苓散加味萆薢、茵陳)對(duì)高尿酸血癥大鼠代謝性指標(biāo)總膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇的調(diào)節(jié)作用機(jī)理 方法：以腺嘌呤和鹽酸乙胺丁醇混懸液灌胃，制造大鼠高尿酸血癥動(dòng)物模型。采取邊造模邊給藥，加味五苓散大、中、小劑量組灌胃給藥。第8、15、22d眼眶取血，分別檢測(cè)總膽固醇(TC)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)等指標(biāo)。結(jié)果：加味五苓散中劑量組能有效降低高尿酸血癥大鼠的TC、LDL-C水平(P<0.05)。結(jié)論：加味五苓散具有明顯降低大鼠總膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇的作用。

加味五苓散；總膽固醇；低密度脂蛋白膽固醇

近年來，隨著人們生活水平的提高，飲食結(jié)構(gòu)的變化，高嘌呤、高蛋白食物大量攝入，高尿酸血癥正日益成為威脅我國(guó)人民健康的常見病。2007年陳玉群[1]重慶調(diào)查發(fā)現(xiàn)高尿酸血癥患病率男性57.1%，女性為12.7%，已經(jīng)高于歐美地區(qū)2%～18%的水平?，F(xiàn)代研究表明，高尿酸血癥患者常伴有血脂紊亂等代謝異常，并和代謝綜合征(MS)與許多傳統(tǒng)心血管疾病危險(xiǎn)因素，包括：老年、男性、高血壓、2型糖尿病、高甘油三酯血癥、肥胖和胰島素抵抗相關(guān)聯(lián)。本研究通過實(shí)驗(yàn)觀察，探討中醫(yī)經(jīng)典方劑五苓散對(duì)高尿酸血癥大鼠代謝性指標(biāo)總膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇的調(diào)節(jié)作用，為臨床應(yīng)用加味五苓散治療高尿酸血癥提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材料

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 健康成年雄性Wistar大鼠，SPF級(jí)，體重180-220 g，由上海斯萊克實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限責(zé)任公司提供，許可證號(hào)SCXK(滬)2007-0005。分籠(每籠4只)飼養(yǎng)于福建中醫(yī)藥大學(xué)動(dòng)物中心SPF級(jí)鼠類實(shí)驗(yàn)室，人工光照環(huán)境(明12h，暗12h)，空調(diào)調(diào)節(jié)室溫20±2℃，濕度50-60%，通風(fēng)良好，自由進(jìn)食與飲水，飼料為全價(jià)顆粒飼料。

1.2 實(shí)驗(yàn)用藥 腺嘌呤：規(guī)格100g/瓶，BBT公司，批號(hào)AD0013。鹽酸乙胺丁醇：規(guī)格0.25g/片，沈陽(yáng)紅旗制藥有限公司，批號(hào)071117。別嘌醇片，廈門邁克制藥有限公司產(chǎn)品，批號(hào)08100101?？偰懝檀?TC)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)試劑盒：北京北化康泰臨床試劑有限公司。

1.3 主要儀器設(shè)備

半自動(dòng)生化分析儀(BT224)，意大利生物技術(shù)公司。離心機(jī)(DDL-5)，上海安亭科學(xué)儀器廠。

2 方法

2.1 中藥的制備

加味五苓散由澤瀉15g、茯苓9g、豬苓9g、白術(shù)9g、桂枝6g、茵陳10g、萆薢10g組成(五苓散原方劑量參考第七版方劑學(xué)教材)，將生藥加水浸泡30min，煎煮濃縮至每mL含生藥2g。

2.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組

雄性Wistar大鼠48只適應(yīng)性飼養(yǎng)7d后，隨機(jī)分為6組：空白組8只、模型組8只、加味五苓散小劑量組8只、加味五苓散中劑量組8只、加味五苓散大劑量組8只、西藥組8只。

2.3 造模方法

后5組以腺嘌呤和鹽酸乙胺丁醇混懸液灌胃，(按鹽酸乙胺丁醇250mg/kg、腺嘌呤100mg/kg的劑量溶于蒸餾水中，配制成鹽酸乙胺丁醇、腺嘌呤濃度分別為2.5%、1%的混懸液)，制造大鼠高尿酸血癥動(dòng)物模型?？瞻捉M按10mL/kg給予0.9%的生理鹽水灌胃。

2.4 治療給藥

采取邊造模邊給藥的方法，每日1次，上午9：15開始，加味五苓散大、中、小劑量組分別按10,7,4 mL/kg灌胃給藥，別嘌醇組按45mg/kg，10 mL/(kg·d)灌胃給藥。

2.5 標(biāo)本采集與制備

于第8、15、22d上午9：30開始同時(shí)對(duì)大鼠進(jìn)行眼眶靜脈取血(采血當(dāng)天不予灌胃)，眼眶取血?jiǎng)?chuàng)傷較小，對(duì)大鼠的活動(dòng)力及喂藥情況、用藥療效均無明顯影響。分離血清，置-20℃冰箱保存待測(cè)。

2.6 指標(biāo)檢測(cè)

采用磷鎢酸法分別檢測(cè)各組大鼠的血清總膽固醇(TC)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)：用于觀察隨著高尿酸血癥大鼠尿酸的增高，其血脂代謝出現(xiàn)的異常。

各指標(biāo)使用全自動(dòng)生化分析儀方法檢測(cè)，具體操作按試劑盒說明書進(jìn)行。

2.7 統(tǒng)計(jì)處理

3 結(jié)果

見表1、2。

表1 實(shí)驗(yàn)各組動(dòng)物總膽固醇TC變化比較

表2 實(shí)驗(yàn)各組動(dòng)物低密度脂蛋白膽固醇LDL-C變化比較

4 討論

根據(jù)高尿酸血癥的好發(fā)人群及病理生理特點(diǎn)，結(jié)合歷代各醫(yī)家的論述，認(rèn)為無癥狀性高尿酸血癥是“濕濁內(nèi)阻”作用于人體的結(jié)果?；颊咚伢w多有肥胖多痰，或有先天稟賦不足，脾腎虧虛，加上飲食不節(jié)，嗜食膏脂厚味，脾腎功能失調(diào)，水濕代謝紊亂，釀生“濕濁”。 濕濁內(nèi)郁，熱從內(nèi)生，氣血不暢，蓄積日久化瘀、化熱，濕熱痰濁阻滯脈道，符合高尿酸血癥合并脂質(zhì)代謝紊亂的病機(jī)上的演變。針對(duì)“濕濁內(nèi)阻”或兼濕熱痰濁，治療時(shí)堅(jiān)守 “泄化濕濁”審證加減。

五苓散具健脾化氣利濕之功，調(diào)節(jié)水液代謝，各醫(yī)家均認(rèn)為此方是治療水濕內(nèi)停之證的常用方劑[2]，該方清利濕熱、祛邪扶正，針對(duì)高尿酸血癥濕濁內(nèi)阻的主要病理基礎(chǔ)。加萆薢、茵陳以加強(qiáng)利濕清熱排濁祛瘀之力。合而成方，具有健脾化氣利濕、清熱泄?jié)犰铕鲋σ赃_(dá)到防治高尿酸血癥合并脂質(zhì)代謝紊亂的目的?，F(xiàn)代藥理學(xué)證明[3]，五苓散通過化濕利尿，能有效降低總膽固醇(TC)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)，并且可以促進(jìn)糖、脂肪代謝，防止動(dòng)脈粥樣硬化、高血壓等并發(fā)癥的發(fā)生，推測(cè)其作用機(jī)理可能與改善肝臟的脂肪代謝，加速其運(yùn)轉(zhuǎn)與清除，影響了血清總膽固醇、甘油三酯的吸收及合成有關(guān)。

本次實(shí)驗(yàn)選擇總膽固醇(TC)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)做為觀察指標(biāo)，實(shí)驗(yàn)后第8、15d各組間的TC、LDL-C水平均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，但可看出兩指標(biāo)的模型組均有升高的趨勢(shì)，而模型組至實(shí)驗(yàn)后第22dTC、LDL-C水平即明顯升高，與空白組比較差異有顯著性(P<0.05)，說明當(dāng)大鼠血尿酸升高到一定水平時(shí)可導(dǎo)致血脂TC、LDL-C的升高；且實(shí)驗(yàn)第22d時(shí)，加味五苓散中劑量組與模型組比較，TC、LDL-C均有下降(P<0.05)。結(jié)果表明，所用加味五苓散在降低血尿酸的同時(shí)能有效降低高尿酸血癥大鼠的TC、LDL-C水平，特別是中劑量組的效果最佳(P<0.05)。加味五苓散能有效干預(yù)大鼠高尿酸血癥代謝性指標(biāo)總膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇的異常，對(duì)無癥狀高尿酸血癥具有預(yù)防作用，臨床運(yùn)用可切實(shí)做到治療未病的作用。

[1]陳玉群.重慶市城市體檢人群高尿酸血癥的患病情況及相關(guān)因素分析[J].第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào)，2008，30(11)：1 013-1 014.

[2]熊曼琪.傷寒學(xué)[M].北京:中國(guó)中醫(yī)藥出版社,2003，129．

[3]鄭惠敏.五苓散的實(shí)驗(yàn)研究和臨床應(yīng)用的新進(jìn)展[J]，江西中醫(yī)院，2007，38(4)：70-71.

TheRegulatingEffectoftheSupplementedWulingPowderonTotalCholesterolandLDLCholesterolinHyperuricemiaModelRats

ZHANGYu-shan1,YUQiong-qiong1,YANGYa-long1,HUANGHai2

1.Quanzhoumedicalcollege,Quanzhou362000,China；2.FujianUniversityofTraditionalChineseMedicine,Fuzhou350108,China

Objective: To Observe the regulating effect mechanism of the Supplemented Wuling Powder (the Wuling Powder supplemented with Bixie and Yinchen) on the metabolic indicators as total cholesterol and low-density lipoprotein cholesterol in hyperuricemia model rats. Method: To establish the hyperuricemia model rats by gavageing the rats with adenine and ethambutol hydrochloride suspension. The large, middle and low dose of the Supplemented Wuling Powder was intragastric administration to the rats groups during the establishment. The indicators of total cholesterol (TC) and low-density lipoprotein cholesterol (LDL-C) of the Orbital blood, which took respectively at day 8, 15, 22, were measured. Results: The middle dose group of the Supplemented Wuling Powder could effective reducing the TC, LDL-C level in hyperuricemia model rats (P<0.05). Conclusion: The Supplemented Wuling Powder could have significantly effect on reducing the total cholesterol and low density lipoprotein cholesterothe in rats.

Supplemented Wuling Powder；Total Cholesterol；Low Density Lipoprotein Cholesterol

R 285.5

A

2013-06-29)