甲狀腺疾病患者乳汁與血清中甲狀腺激素水平的關(guān)系

張 茜，連小蘭，柴曉峰，白 耀，戴為信

中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院 北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院 北京協(xié)和醫(yī)院內(nèi)分泌科衛(wèi)生部?jī)?nèi)分泌重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，北京 100730

甲狀腺疾病患者乳汁與血清中甲狀腺激素水平的關(guān)系

張 茜，連小蘭，柴曉峰，白 耀，戴為信

中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院 北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院 北京協(xié)和醫(yī)院內(nèi)分泌科衛(wèi)生部?jī)?nèi)分泌重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，北京 100730

目的研究甲狀腺疾病患者的母乳與血清中游離三碘甲狀腺原氨酸(FT3)、游離甲狀腺素(FT4)、三碘甲狀腺原氨酸(T3)、甲狀腺素(T4)和促甲狀腺激素(TSH)的關(guān)系。方法留取56例受試者60份母乳樣本及其血清，測(cè)定FT3、FT4、T3、T4和TSH水平。以血清甲狀腺激素為自變量，母乳中甲狀腺激素為因變量進(jìn)行直線回歸分析。結(jié)果母乳FT3、FT4、T3、T4、TSH和T3/T4水平分別為(2.30±0.82)pg/ml、(0.45±0.26)ng/dl、(0.35±0.20)ng/ml、(2.96±1.55)μg/dl、(0.12±0.08)μU/ml和0.12±0.04。血清與母乳中FT3(r=0.778，P=0.000)、T3(r=0.603，P=0.000)、T4(r=0.485，P=0.004)和TSH(r=0.605，P=0.000)水平呈顯著正相關(guān)。FT3、FT4、T3、T4和TSH的透過(guò)率分別為78%、32%、26%、30%和8%。結(jié)論母乳中存在甲狀腺激素，母乳與血清中的甲狀腺激素水平呈正相關(guān)。

甲狀腺激素；母乳；化學(xué)發(fā)光法

ActaAcadMedSin，2013,35(4)：427-431

育齡期女性容易發(fā)生甲狀腺疾病[1-2]，其中甲狀腺功能低下和Grave’s病最為常見(jiàn)[3-4]。大量研究顯示，母乳對(duì)于嬰兒是有益的。新生兒免疫系統(tǒng)尚不成熟，需要母親提供特定的保護(hù)因子，母親可以通過(guò)母乳向嬰兒傳遞IgA抗體。此外，母乳中還包括很多非特異性保護(hù)因子，具有抗微生物的作用[5-6]。甲狀腺激素是嬰幼兒腦神經(jīng)發(fā)育的必需激素，甲狀腺激素缺乏可導(dǎo)致嬰兒腦發(fā)育障礙。目前對(duì)甲狀腺疾病史女性是否會(huì)通過(guò)母乳將甲狀腺激素傳遞給嬰兒尚不完全清楚，本研究探討了甲狀腺疾病患者的母乳與血清中游離三碘甲狀腺原氨酸(free triiodothyronine，F(xiàn)T3)、游離甲狀腺素(free thyroxine，F(xiàn)T4)、三碘甲狀腺原氨酸(triiodothyronine，T3)、甲狀腺素(thyroxine，T4)和促甲狀腺激素(thyrotrophin，TSH)的關(guān)系。

對(duì)象和方法

對(duì)象2010年2月至2012年10月在北京協(xié)和醫(yī)院內(nèi)分泌科就診的哺乳期婦女56例，年齡27.1～34.3歲，孕周37.3～40.3周；嬰兒出生體重2756.2～3674.8 g，身長(zhǎng)48.0～51.2 cm，男女比例26/30。其中，5例有甲狀腺功能亢進(jìn)史，孕產(chǎn)期未用治療甲狀腺功能亢進(jìn)藥物，甲狀腺功能正常；1例甲狀腺功能亢進(jìn)，服用丙硫氧嘧啶治療；50例甲狀腺功能低下，采用L-T4替代治療。

方法共采集60份乳汁標(biāo)本，其中產(chǎn)后1～30 d乳汁14份，產(chǎn)后31～90 d乳汁15份，產(chǎn)后91～180 d乳汁18份，產(chǎn)后181～360 d乳汁13份；同時(shí)留取母親血標(biāo)本。將采集的乳汁裝入塑料采血管(BD Vacutainer?)中，放入-20℃冰箱保存，測(cè)定前放至室溫溶解，4℃、3000 r/min(r=16 cm)離心10 min，去掉上層油脂，取下層液體測(cè)定。血標(biāo)本抽取后立即4℃、3000 r/min(r=16 cm)離心10 min，分離血清，放入-20℃冰箱保存，測(cè)定前放至室溫溶解。FT3、FT4、T3、T4、TSH均采用化學(xué)發(fā)光法測(cè)定(Siemens Adivia Centaur，德國(guó))。為了驗(yàn)證方法的重復(fù)性，對(duì)每份標(biāo)本進(jìn)行6次檢測(cè)，保存3 d后再次檢測(cè)6次。此外，還進(jìn)行了回收實(shí)驗(yàn)，以驗(yàn)證方法的可靠性。具體如下：取200μl低、中、高濃度的標(biāo)準(zhǔn)品FT3、FT4、T3、T4、TSH，分別加入200μl同一份乳汁樣本，混勻后同上述處理方法進(jìn)行測(cè)定，標(biāo)準(zhǔn)品濃度見(jiàn)表1，回收率計(jì)算公式如下[7]：回收率=(加標(biāo)準(zhǔn)品的樣本中含激素量-未加標(biāo)準(zhǔn)品的樣本中激素量)/所加標(biāo)準(zhǔn)品的激素量×100%[7]。

統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS 10.0統(tǒng)計(jì)軟件，符合正態(tài)分布數(shù)據(jù)的組間比較采用t檢驗(yàn)；不符合正態(tài)分布的數(shù)據(jù)，經(jīng)log轉(zhuǎn)換后采用用t檢驗(yàn)；以血清甲狀腺激素為自變量，母乳甲狀腺激素為因變量，做一元線形回歸分析，符合正態(tài)分布的數(shù)據(jù)采用Pearson相關(guān)分析，不符合正態(tài)分布的數(shù)據(jù)采用Spearman相關(guān)分析；P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

化學(xué)發(fā)光法測(cè)定乳汁甲狀腺激素濃度的重復(fù)性同一份乳汁標(biāo)本檢測(cè)FT3、FT4、T3、T4和TSH后，批內(nèi)變異系數(shù)均<5%，批間變異系數(shù)均<10%(表2)。

表 1 甲狀腺激素標(biāo)準(zhǔn)品的濃度Table 1 Concentrations of the standard samples of thyroid hormones

FT3：游離三碘甲狀腺原氨酸；FT4：游離甲狀腺素；T3：三碘甲狀腺原氨酸；T4：甲狀腺素；TSH：促甲狀腺激素

FT3：free triiodothyronine；FT4：free thyroxine；T3：triiodothyronine；T4：thyroxine；TSH：thyrotrophin

表 2 化學(xué)發(fā)光法測(cè)定乳汁甲狀腺激素濃度的重復(fù)性(%)Table 2 Repeatability of milk thyroid hormones measured by chemiluminescence assay(%)

化學(xué)發(fā)光法測(cè)定乳汁甲狀腺激素水平的回收率運(yùn)用化學(xué)發(fā)光法測(cè)定母乳加標(biāo)準(zhǔn)品中甲狀腺激素，回收率為81.3%～93.8%之間(表3)。

母乳及血中FT3、FT4、T3、T4和TSH的動(dòng)態(tài)變化所有母乳標(biāo)本均能測(cè)出FT3、FT4、T3、T4含量，但有些母乳標(biāo)本中TSH為0。產(chǎn)后31～90 d、91～180 d和181～360 d乳汁中的FT3、FT4、T3、T4和TSH含量，以及T3/T4比與產(chǎn)后1～30 d均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P均>0.05)(表4)。產(chǎn)后31～90 d、91～180 d和181～360 d血清中的FT3、FT4、T3含量與產(chǎn)后1～30 d也均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P均>0.05)。產(chǎn)后31～90 d、91～180 d和181～360 d血清T4水平較產(chǎn)后1～30 d顯著降低(P<0.05或P<0.01)。產(chǎn)后31～90 d血清TSH水平較產(chǎn)后1～30 d顯著降低(P<0.05)。產(chǎn)后91～180 d T3/T4比值較產(chǎn)后1～30 d顯著升高(P<0.05)(表5)。

血清與母乳中甲狀腺激素含量的相關(guān)性對(duì)血清和母乳中甲狀腺激素水平的相關(guān)性分析結(jié)果顯示，血清和母乳中的FT3(r=0.778，P=0.000)、T3(r=0.603，P=0.000)、T4(r=0.485，P=0.004)、TSH水平(r=0.605，P=0.000)呈顯著正相關(guān)。以血清甲狀腺激素水平為自變量，母乳狀腺激素水平為因變量，進(jìn)行一元直線回歸分析，結(jié)果顯示FT3直線回歸擬合方程為y=0.399x+0.956；T3為y=0.112x+0.149；T4為y=0.167x+1.144；TSH為y=0.399x+0.952(表6)。

甲狀腺激素的透過(guò)率FT3、FT4、T3、T4和TSH的透過(guò)率分別為78%、32%、26%、30%和8%(表7)。

表 3 化學(xué)發(fā)光法測(cè)定母乳中甲狀腺激素水平回收實(shí)驗(yàn)(%)Table 3 Recovery test of milk thyroid hormones measured by chemiluminescence assay(%)

表 4 產(chǎn)后不同時(shí)間母乳中FT3、FT4、T3、T4和TSH的含量及T3/T4比Table 4 Concentrations of milk thyroid hormones at different time points postpartum

表 5 產(chǎn)后不同時(shí)間母親血中FT3、FT4、T3、T4和TSH的含量及T3/T4Table 5 Serum thyroid hormone concentrations at different time points postpartum

與1～30 d比較，aP<0.05，bP<0.01

aP<0.05，bP<0.01 compared with 1～30 d

表 6 血清與母乳FT3、FT4、T3、T4相關(guān)性及直線回歸分析(n=60)Table 6 Linear regression analysis of milk(Y)and serum(X)FT3，F(xiàn)T4，T3，T4，and TSH concentrations(n=60)

表 7 產(chǎn)后不同時(shí)間母乳中甲狀腺激素與母親血清中的比值Table 7 Ratios thyroid hormones between milk and serum at different time points postpartum

討 論

任何一種甲狀腺激素或其代謝產(chǎn)物只要能到達(dá)母血循環(huán)都可出現(xiàn)在母乳中。母乳可能將甲狀腺激素傳遞給嬰兒。不同的物種間，乳汁中的甲狀腺激素有一定差異[8]。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，產(chǎn)后31～90 d、91～180 d和181～360 d乳汁中的甲狀腺激素含量與1～30 d無(wú)顯著差異，母乳FT3、FT4、T3、T4、TSH和T3/T4水平分別為(2.30±0.82)pg/ml、(0.45±0.26)ng/dl、(0.35±0.20)ng/ml、(2.96±1.55)μg/dl、(0.12±0.08)μU/ml和0.12±0.04，與以往研究測(cè)定乳汁甲狀腺激素濃度有一定差異[9- 13]。很多研究者都試圖探討使用不同方法提取和測(cè)定母乳中甲狀腺激素濃度。Sack等[10]采用放射免疫法測(cè)定19名甲狀腺功能正常母親的乳汁，結(jié)果發(fā)現(xiàn)產(chǎn)后第1周乳汁T4為(0.38±0.07)mg/100 ml，產(chǎn)后8～48 d升至(4.27±0.50)mg/100 ml，產(chǎn)后50 d降至(1.11±0.25)mg/100 ml。Strbák等[11]使用競(jìng)爭(zhēng)性蛋白結(jié)合分析法測(cè)定45名足月兒母親的乳汁T4，發(fā)現(xiàn)產(chǎn)后第3天乳汁T4為(1.3±0.3)mg/100 ml，產(chǎn)后第3周升至(7.6±2.5)mg/100 ml，產(chǎn)后第2個(gè)月升至(12.9±1.3)mg/100 ml。Slebodzinski等[14]采用放免法測(cè)定<24 d的母乳，其中T3為 0.2 μg/L，T4 為1.6 μg/L。Nabukhotnyi等[15]測(cè)定初乳、過(guò)度乳和成熟乳中的T3/T4值分別為0.33 μg/L/79.5 μg/L、6.13 μg/L/214.8 μg/L和7.4 μg/L/321 μg/L，但其他研究結(jié)果顯示母乳中T4的濃度很低[16- 19]。

母乳甲狀腺激素測(cè)定濃度的差異可能是由于提取和測(cè)定方法的不同。競(jìng)爭(zhēng)性蛋白結(jié)合分析方法和放射免疫法不能去除母乳中脂質(zhì)的影響，可導(dǎo)致所測(cè)濃度比實(shí)際要高。乳腺組織發(fā)生炎癥(如乳腺炎)時(shí)可明顯降低乳汁中T3的含量。當(dāng)母親甲狀腺功能異常時(shí)母乳中可能無(wú)法測(cè)到T4，但T3的濃度則與正常者無(wú)異。這就導(dǎo)致有關(guān)母乳對(duì)新生兒血漿甲狀腺激素影響的研究結(jié)論是不一致的。本研究進(jìn)行了方法學(xué)的重復(fù)性實(shí)驗(yàn)和回收實(shí)驗(yàn)，結(jié)果證明運(yùn)用化學(xué)發(fā)光法測(cè)定乳汁中甲狀腺激素方法是可靠的。

本研究結(jié)果顯示，母乳中FT3、T3、T4和TSH的含量與血清中的含量顯著相關(guān)，F(xiàn)T3的透過(guò)率高達(dá)78%，F(xiàn)T4、T3、T4和TSH的透過(guò)率分別為32%、26%、30%和8%，提示母親血中的甲狀腺激素可以進(jìn)入乳汁。本研究中，母乳T4含量為(29.6±15.5)μg/L。假設(shè)1名1000 g的早產(chǎn)兒每天可攝入120 ml/kg的母乳，那么其每天從母乳中攝入的T4為(3.55±1.86)μg。而早產(chǎn)兒為預(yù)防或治療短暫性甲狀腺功能低減，每天應(yīng)補(bǔ)充8～10 μg/kg T4。可見(jiàn)，母乳可以從一定程度上為早產(chǎn)兒補(bǔ)充T4，但不能完全補(bǔ)充。

綜上，本研究結(jié)果顯示，母乳中存在甲狀腺激素，母乳與血清中的甲狀腺激素水平呈正相關(guān)。

[1] De Groof L，Abalovich M，Alexander EK，et al.Management of thyroid dysfunction during pregnancy and postpartum：an Endocrine Society clinical practice guideline[J].J Clin Endocrinol Metab，2012，97(8)：2543- 2565.

[2] Stuckey BG，Kent GN，Allen JR.The biochemical and clinical course of postpartum thyroid dysfunction：the treatment decision[J].Clin Endocrinol，2001，54(3)：377- 383.

[3] Yazbeck CF，Sullivan SD.Thyroid disorders during pregnancy[J].Med Clin North Am，2012，96(2)：235- 256.

[4] Jasson A，Alm J，Bremme K，et al.Cooperation reduces the rosks of throid disease in pregnancy.Also mild maternal hypothyroidism can threaten the neurological development of the fetus[J].Lakartidningen，2002，99(9)：899- 903.

[5] Madi A，Bransburg-Zabary S，Kenett DY，et al.The natural autoantiby repertoire in newborns and adults：a current overview[J].Adv Exp Med Biol，2012，750：198- 212.

[6] Prieto PA.Profiles of human milk oligosaccharides and production of some human milk oligosaccharides in transgenic animals[J].Adv Nutr，2012，3(3)：456S- 464S.

[7] 任成忠，毛麗芬.加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)的實(shí)施及回收率計(jì)算的研究[J].工業(yè)安全與環(huán)保，2006，32(2)：9- 11.

[8] 王宗義，楊定忠，冀夢(mèng)瑤，等.高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜檢測(cè)牛奶中的甲狀腺素[J].色譜，2013，31(3)：270- 274.

[9] Koldovsky O，Thornburg W.Hormones in milk[J].J Pediat Gastroenterol Nutr，1987，6(2)：172- 196.

[10] Sack J，AmadoO，Lunenfeld B.Thyroxine concerntration in human milk[J].J Clin Endocrinol Metab，1977，45(1)：171.

[11] Strbák V，Macho L，Kovác R，et al.Thyroxine(by competitive protein binding analysis)in human and cow milk and in infant formulas[J].J Endocrinol Exp，1976，10(3)：167- 174.

[12] Strbák V，Macho L，Knop PJ，et al.Thyroxine content in mother milk and regulation of thyroid function of suckling rats[J].Endocrinol Exp，1974，8(1)：59- 69.

[13] Varma SK，Collins M，Row A，et al.Thyroxine，tri-iodothyronine，and reverse tri-iodothyronine concentrations in human milk[J].J Pediatr，1978，93(5)：803- 806.

[14] Slebodzinsli AB，Nowak G，Gawecka H，et al.Thyroid hormones and insulin in milk：a comparative study[J].Endocrinol Exp,1986，20(2- 3)：247- 255.

[15] Nabukhotnyi TK，Pavliuk VP，Gozhenko AI，et al.Role of breast feeding in providing the newborn infant with thyroid hormones[J].Vopr Pitan，1987， 1：29- 31.

[16] Sack J，F(xiàn)rucht H，Amado O，et al.Breast milk thyroxine and not cow’s milk may mitigate and delay the clinical picture of neonatal hypothyroidism[J].Acta Paediatrica Scandinavica Supplement，1979，277：54- 56.

[17] Sato T，Suzuki Y.Presence of triiodothyronine，no detectable thyroxine and reverse triiodothyronine in human milk[J].Endocrinol Jpn，1979，26(4)：507- 513.

[18] Mizuta H，Amino N，Ichihare K，et al.Thyroid hormones in human milk and their influence on thyroid function of breast-fed babies[J].Pediat Res，1983，17(6)：468- 471.

[19] Van Wassenaer AG，Stul PMR，Valianpour F，et al.The quantity of thyroid hormone in human milk is too low to influence plasma thyroid hormone levels in the very preterm infant[J].Clin Endocrinol(Oxf)，2002，56(5)：621- 627.

RelationshipbetweenMaternalMilkandSerumThyroidHormonesinPatientswithThyroidRelatedDiseases

ZHANG Qian，LIAN Xiao-lan，CHAI Xiao-feng，BAI Yao，DAI Wei-xin

Ministry of Health Key Laboratory of Endocrinology，Department of Endocrinology，PUMC Hospital，CAMS and PUMC，Beijing 100730，China

LIAN Xiao-lan Tel：010- 69155084，E-mail：lianlanx@126.com

ObjectiveTo explore the relationship between maternal milk and serum thyroid hormones in patients with thyroid-related diseases.MethodsSerum and breast milk samples were collected from 56 breastfeeding mothers.Milk and serum free triiodothyronine(FT3)，free thyroxine(FT4)，triiodothyronine(T3)，thyroxine(T4)，and thyrotrophin(TSH)were determined，and T3/T4 was calculated.Using the serum thyroid hormones as the independent variables and milk thyroid hormones as the dependent variables，we performed linear regression analysis.ResultsThe milk FT3，F(xiàn)T4，T3，T4，TSH，and T3/T4 were(2.30±0.82)pg/ml，(0.45±0.26)ng/dl，(0.35±0.20)ng/ml，(2.96±1.55)μg/dl，(0.12±0.08)μU/ml，and 0.12±0.04，respectively.Milk FT3(r=0.778，P=0.000)，T3(r=0.603，P=0.000)，T4(r=0.485，P=0.004)，and TSH(r=0.605，P=0.000)concentrations were positively correlated with those in serum.ConclusionThyroid hormones are present in human milk and are positively correlated with those in serum.

thyroid hormone；milk；chemilumenscence

連小蘭 電話：010- 69155084，電子郵件：lianlanx@126.com

R581.1；R581.2

A

1000- 503X(2013)04- 0427- 05

2012- 11- 23)

國(guó)家自然科學(xué)基金(81250014)、衛(wèi)生部行業(yè)科研專項(xiàng)項(xiàng)目(201002002)和國(guó)家臨床重點(diǎn)?？芐upported by the National Natural Sciences Foundation of China(81250014)，the Health Industry Scientific Research Project(201002002)，and the National Key Program of Clinical Science

10.3881/j.issn.1000- 503X.2013.04.013