萬(wàn)磊
Sonic Hedgehog(Shh)信號(hào)通路在胚胎發(fā)育過(guò)程中起到重要作用,參與調(diào)控細(xì)胞增殖、分化和組織形成,該信號(hào)通路的異常激活與腫瘤的發(fā)生密切相關(guān)[1]。胃癌是我國(guó)常見(jiàn)的惡性腫瘤之一,細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)異常參與其發(fā)生發(fā)展,Shh蛋白是Sonic Hedgehog信號(hào)通路的重要組成部分。本研究通過(guò)免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)Shh蛋白在胃癌組織中的表達(dá),分析Shh信號(hào)通路在胃癌發(fā)生中的作用。
1.1 一般資料 隨機(jī)選取2009年1月至2012年1在我院普外科住院經(jīng)過(guò)病理證實(shí)胃癌手術(shù)患者71例,其中男49例、女22例,平均年齡51歲。按國(guó)際抗癌聯(lián)盟TNM組織學(xué)分級(jí)標(biāo)準(zhǔn),Ⅰ期3例,Ⅱ期21例,Ⅲ期34例,Ⅳ期13例;高分化腺癌15例,中分化腺癌13例,低分化腺癌43例;另外取正常胃粘膜組織10例。
1.2 主要試劑和方法 兔抗人Shh單克隆抗體、EDTA(PH=9.0)修復(fù)液、超敏SP(鼠/兔)免疫組化染色試劑盒、濃縮型DAB試劑盒等。組織標(biāo)本按照免疫組織化學(xué)染色(SP法)的實(shí)驗(yàn)步驟進(jìn)行免疫組化染色。每次染色均設(shè)有對(duì)照作為質(zhì)量控制,以PBS替代一抗作為陰性對(duì)照。
1.3 結(jié)果判斷 Shh蛋白主要在胞漿及細(xì)胞膜中著色,免疫組化結(jié)果按染色強(qiáng)度分為:無(wú)色,淡黃,棕黃色,棕褐色;定義淡黃、棕黃色、棕褐色的組織標(biāo)本為表達(dá)陽(yáng)性,無(wú)色或基本無(wú)色為陰性。
1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,利用χ2檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
2.1 Shh蛋白在胃癌與正常胃組織中表達(dá)如表1。
表1
2.2 Shh蛋白在不同分化程度胃癌中的表,如表2。
表2
2.3 Shh蛋白表達(dá)與胃癌TNM分期的關(guān)系,表3。
表3
胃癌在我國(guó)是發(fā)病率和致死率均較高的惡性腫瘤[2],其發(fā)生是多基因多信號(hào)多系統(tǒng)共同參與的結(jié)果。Sonic Hedgehog信號(hào)通路與胃癌分化、轉(zhuǎn)移及預(yù)后密切相關(guān)。Hedgehog信號(hào)通路由三種Hedgeho的同源基因分別是Sonic Hedgehog、Indian Hedgehog和Desert Hedgehog編碼的相應(yīng)蛋白和下游的相關(guān)分子組成,其中Sonic Hedgehog對(duì)哺乳動(dòng)物的骨骼、皮膚、胰腺和神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)育發(fā)展起到重要作用,并在胃腸生理功能形成和癌變中起作用[3]。研究表明在正常成人體內(nèi)Hedgehog信號(hào)通路不表達(dá)或很少表達(dá),但在腫瘤組織中可見(jiàn)Hedgehog信號(hào)通路的異常激活,過(guò)多的Shh蛋白表達(dá)使Shh蛋白與Ptch蛋白結(jié)合,解除了Ptch蛋白對(duì)Smo的抑制,Smo被激活,繼而激活轉(zhuǎn)錄因子Gli,進(jìn)而啟動(dòng)下游基因的表達(dá),Hedgehog信號(hào)通路通路不僅參與了腫瘤的發(fā)生,還在腫瘤的分化與侵潤(rùn)中起作用[4]。
本研究表明,Shh蛋白在胃癌組織中表達(dá)明顯高于正常胃組織,具有顯著性意義,并且在低分化胃癌的表達(dá)高于高中分化胃癌組織的表達(dá),且TNM分期越差表達(dá)陽(yáng)性率越高,顯示Shh蛋白有可能作為胃癌的診斷標(biāo)志物之一,并有可能成為基因治療的靶位點(diǎn)。
[1] Samarzija I,Beard P.Hedgehog pathway regulators influence cervical cancer cell proliferation,survival and migration.Biochem Biophys Res Commun,2012,425(1):64-69.
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