氣相色譜法測(cè)定珍珠明目滴眼液中龍腦含量

林 琦

(浙江省舟山市口腔醫(yī)院，浙江 舟山 316000)

珍珠明目滴眼液由珍珠液、冰片、氯化鈉和羥苯乙酯組成，具有清熱瀉火、養(yǎng)肝明目的功效，用于視力疲勞癥和慢性結(jié)膜炎。其藥品標(biāo)準(zhǔn)[1]中有冰片的含量測(cè)定方法，但該方法提取溶劑乙酸乙酯極易乳化，且2mL溶劑難以將有效成分龍腦提凈，更不能準(zhǔn)確測(cè)出其含量。為更好地控制該藥品的內(nèi)在質(zhì)量，保證其療效，筆者建立了冰片中龍腦含量測(cè)定的氣相色譜(GC)法，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 儀器與試藥

Agilent6890N型氣相色譜儀(FID檢測(cè)器)。龍腦對(duì)照品(中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)110881－200202，含量測(cè)定用);環(huán)己烷為分析純;珍珠明目滴眼液(杭州天目山藥業(yè)有限公司，批號(hào)為 20110920，20111017，20111204)。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件[2－4]

毛細(xì)管柱:聚乙二醇(PEG)－20M彈性石英毛細(xì)管柱(30m×0.25mm，0.25μm);程序升溫:初次溫度 90℃，以 8℃ /min升溫至180℃，保持5min;載氣:N2;流速:1.8 mL/min;進(jìn)樣體積:1μL，分流進(jìn)樣，分流比為 3 ∶1。

2.2 溶液制備

精密稱取龍腦對(duì)照品22.72mg，置50mL容量瓶中，用環(huán)己烷溶解并稀釋至刻度，搖勻，配置成質(zhì)量濃度為454.4μg/mL的對(duì)照品貯備液。精密量取對(duì)照品貯備液10mL，置20mL容量瓶中，加環(huán)己烷至刻度，搖勻，制成質(zhì)量濃度為227.2μg/mL的對(duì)照品溶液。精密量取樣品10 mL，用環(huán)己烷振搖提取3次，每次7 mL，提取液并入25mL量瓶中，加環(huán)己烷至刻度，搖勻，即得供試品溶液[5]。

2.3 方法學(xué)考察

專屬性試驗(yàn):取缺冰片空白樣品，按供試品溶液制備方法同法制成陰性對(duì)照品溶液，取1μL注入氣相色譜儀。結(jié)果在與龍腦對(duì)照品峰相同保留時(shí)間處未出現(xiàn)色譜峰，表明陰性對(duì)照品溶液中的組分不干擾龍腦的測(cè)定。

線性關(guān)系考察:分別精密吸取2.2項(xiàng)下的對(duì)照品貯備液1.0，2.0，5.0，8.0，10.0 mL，置 10 mL 容量瓶中，加環(huán)己烷至刻度，搖勻，制成質(zhì)量濃度為 45.44，90.88，227.20，363.52，454.40μg/mL的系列對(duì)照品溶液。照2.1項(xiàng)下色譜條件測(cè)定，每一質(zhì)量濃度平行進(jìn)樣3次，依法進(jìn)樣測(cè)定，以峰面積為縱坐標(biāo)(Y)、對(duì)照品溶液為橫坐標(biāo)(X)進(jìn)行線性回歸，回歸方程為Y=8.7447X－18.96，r=1.000 0，線性范圍為0.045 4～0.454 4 μg。

精密度試驗(yàn):取同一對(duì)照品溶液(批號(hào)20110920)，按2.1項(xiàng)下色譜條件，連續(xù)進(jìn)樣6次。結(jié)果龍腦峰面積 RSD為0.51%(n=6)，表明儀器精密度良好。

圖1 氣相色譜圖

穩(wěn)定性試驗(yàn):取同一供試品溶液(批號(hào)20110920)，分別在0，2，4，6，8，12，24，26 h 時(shí)進(jìn)樣。結(jié)果龍腦峰面積 RSD 為 0.71%(n=6)，表明供試品溶液在26 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

重復(fù)性試驗(yàn):取同一批(批號(hào)為20110920)樣品6份，按2.2項(xiàng)下方法制備并精密吸取供試品溶液1μL，測(cè)定峰面積并計(jì)算龍腦的含量(g/L)。結(jié)果龍腦平均含量為 0.223 g/L，RSD為1.2%(n=6)。

加樣回收試驗(yàn):精密量取已知含量的樣品(批號(hào)為20110920)5mL，精密加入龍腦對(duì)照品溶液適量，按2.2項(xiàng)下方法制備待測(cè)溶液6份，依法測(cè)定峰面積并計(jì)算含量。結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 龍腦加樣回收試驗(yàn)結(jié)果(n=6)

2.4 樣品含量測(cè)定

按擬訂方法測(cè)定3批樣品，結(jié)果龍腦的含量分別為0.223，0.306，0.281 g/L。

3 討論

曾比較了分別以環(huán)己烷、正己烷[6]為提取溶劑，各萃取3次，定容至25mL，結(jié)果兩種溶劑提取后樣品中龍腦的含量測(cè)定結(jié)果相當(dāng)?？紤]到環(huán)己烷毒性小且價(jià)格便宜，故選擇環(huán)己烷作為提取溶劑。

[1]WS3－B－3281－98，衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)·中藥成方制劑(第十七冊(cè))[S].

[2]李美月.毛細(xì)管氣相色譜法測(cè)定牛黃解毒片中冰片含量[J].中國(guó)藥業(yè)，2009，18(5):25 －26.

[3]楊瑞瑞，吳 芳，郄留霞.含冰片制劑中冰片質(zhì)量控制[J].陜西中醫(yī)，2012，33(1):94 －96.

[4]周文梟，曾立威，周嵩煜，等.兩種氣相色譜法測(cè)定珍珠明目滴眼液中冰片的含量[J].華西藥學(xué)雜志，2004，19(2):137－139.

[5]馮明霞，王桂蘭，聞京偉.氣相色譜法同時(shí)測(cè)定醒腦靜氯化鈉注射液中冰片及麝香酮的含量[J].中國(guó)藥事，2006，20(9):38－40.

[6]李惠珍，周 蘭.氣相色譜法測(cè)定冰片的含量[J].湖南中醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2003，9(5):70.