血塞通凍干粉對急性腦梗死患者血小板活化標(biāo)志物的影響

楊承志，孟新顏，蔚志剛

中醫(yī)中藥是我國醫(yī)藥體系的一大特色，中藥制劑臨床應(yīng)用較為廣泛，但關(guān)于中藥制劑療效的循證醫(yī)學(xué)研究較少。我們應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢測與血小板活化相關(guān)的標(biāo)志物，驗證了血塞通凍干粉的抗血小板作用?，F(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇我科2008年1月—2012年1月收治的首次腦梗死患者60例，均符合1995年第四次全國腦血管疾病會議制定的診斷標(biāo)準(zhǔn)［1］，并經(jīng)顱腦CT或MRI證實。發(fā)病至入院時間＜24h，既往有腦梗死或心肌梗死病史，或服用過抗血小板或抗凝藥物，或有嚴(yán)重肝腎功能異常者不予入組。其中男32例，女28例;年齡≥55歲，平均 (64.5±3.6)歲。將其隨機(jī)分為治療組和對照組，各30例，兩組間年齡、性別具有均衡性。

1.2 研究方法 所有患者入院后立即抽靜脈血送檢血常規(guī)、血生化、凝血功能、超敏C反應(yīng)蛋白 (hs－CRP)，應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢測血小板活化標(biāo)志物，抽血時不用止血帶，開始2ml血棄用，檢測時間在1h內(nèi)。抽血后對照組給予腸溶阿司匹林(拜耳公司生產(chǎn)，拜阿司匹靈)0.1g，2次/d，依達(dá)拉奉30mg靜脈滴注，2次/d;丁苯酞200mg，2次/d作為基礎(chǔ)治療，有高血壓或糖尿病者給予對癥治療。治療組在對照組治療的基礎(chǔ)上給予血塞通凍干粉 (黑龍江珍寶島藥業(yè)股份有限公司生產(chǎn))400mg靜脈滴注，1次/d。10d后復(fù)查血常規(guī)、血生化、凝血功能、hs－CRP及血小板活化標(biāo)志物。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS12.0統(tǒng)計軟件包進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，計量資料采用t檢驗，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組治療前后血常規(guī)、血生化指標(biāo)比較 兩組治療前后血糖、總膽固醇、低密度脂蛋白、白細(xì)胞計數(shù)及血小板計數(shù)比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義 (P＞0.05，見表1)。

2.2 兩組治療前后凝血功能各指標(biāo)比較 兩組治療前后凝血功能各指標(biāo)比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)差異 (P＞0.05，見表2)。

2.3 兩組治療前后超敏C反應(yīng)蛋白及血小板活化標(biāo)志物比較治療前兩組患者CD42b、CD61、血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa(PAC－1)、CD62p、血小板 －單核細(xì)胞聚集體 (PMA)及hs－CRP比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義 (P＞0.05);治療后PAC－1、CD62p、PMA比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義 (P＜0.05，見表3)。

表1 兩組治療前后血常規(guī)、血生化指標(biāo)比較 ()Table 1 Comparison of blood routine，blood biochemical index between two groups before and after treatment

表1 兩組治療前后血常規(guī)、血生化指標(biāo)比較 ()Table 1 Comparison of blood routine，blood biochemical index between two groups before and after treatment

血小板計數(shù) (×109/L)治療前組別 例數(shù) 血糖 (mmol/L)治療前總膽固醇 (mmol/L)治療前白細(xì)胞計數(shù) (×109/L)治療前治療后 治療后治療后治療組 30 7.64±0.56 6.82±0.48 5.11±0.27 5.02±0.25 4.87±0.12 4.56±0.15 6.56±0.32 6.22±0.30 187.低密度脂蛋白 (mmol/L)治療前 治療后 治療后75±6.43179.50±6.46對照組 30 7.75±0.44 6.68±0.51 4.92±0.23 4.97±0.28 4.65±0.16 4.52±0.15 6.69±0.40 6.55±0.36 185.86±6.62174.68±6.53

表2 兩組治療前后凝血功能各指標(biāo)比較 ()Table 2 Comparison of blood coagulation function index between two groups before and after treatment

表2 兩組治療前后凝血功能各指標(biāo)比較 ()Table 2 Comparison of blood coagulation function index between two groups before and after treatment

治療后治療組 30 10.60±1.32 11.82±1.48 0.89±0.24 1.12±0.36 25.00±3.56 28.88±3.45 16.35±3.23 19.37±3.組別 例數(shù) 凝血酶原時間(s)治療前 治療后PT國際標(biāo)準(zhǔn)化比值治療前 治療后活化部分凝血活酶時間(s)治療前 治療后凝血酶時間(s)治療前 治療后纖維蛋白原濃度(g/L)治療前22 3.18±0.53 3.24±0.48對照組 30 10.83±1.41 11.75±1.46 0.91±0.23 1.18±0.38 26.22±3.52 29.69±3.51 16.69±3.38 19.45±3.36 3.25±0.53 3.28±0.52

表3 兩組治療前后hs－CRP及血小板活化標(biāo)志物比較 ()Table 3 Comparison of C－reactive protein and platelet activation markers high－sensitivity C between two groups before and after treatment

表3 兩組治療前后hs－CRP及血小板活化標(biāo)志物比較 ()Table 3 Comparison of C－reactive protein and platelet activation markers high－sensitivity C between two groups before and after treatment

治療后治療組 30 87.49±11.5458.77±9.3672.92±9.1653.48±7.6849.81±6.8834.93±5.3232.50±7.7125.69±6.3525.00±6.0814.34±6.665.68±1.57 5.09±組別 例數(shù) CD42b(%)治療前 治療后CD61(%)治療前 治療后PAC－1(%)治療前 治療后CD62p(%)治療前 治療后PMA(%)治療前 治療后hs－CRP(mg/L)治療前1.25對照組 30 89.05±11.4861.65±8.3574.83±9.0956.36±6.3348.65±6.6159.56±6.7230.68±7.4248.41±6.2224.86±5.8242.84±8.27 5.56±1.48 5.18±1.45

3 討論

腦梗死的發(fā)病機(jī)制非常復(fù)雜，血小板活化是腦梗死的主要發(fā)病機(jī)制之一［2］，血小板的黏附、釋放、聚集等反應(yīng)統(tǒng)稱為血小板活化?；罨“迮c靜息血小板相比，其質(zhì)膜糖蛋白和顆粒膜糖蛋白常發(fā)生顯著的變化，這些變化的糖蛋白便成為活化血小板的檢測標(biāo)志物。我們檢測的膜糖蛋白有:(1)GPⅡb/Ⅲa，其CD單抗為CD41/CD61，主要與血小板的聚集有關(guān);(2)GPⅠb/Ⅳ，其CD單抗為CD42b，主要和血小板的黏附有關(guān);(3)血小板α－顆粒膜蛋白 (GMP－140)，其CD單抗為CD62p，是血小板激活晚期標(biāo)志物。另外還檢測了早期血小板活化標(biāo)志物PAC－1以及PMA。國內(nèi)外多項研究結(jié)果顯示，急性腦梗死患者CD42b、CD61、PAC－1、CD62p、PMA、hs－CRP表達(dá)均明顯高于正常對照組，且腦梗死患者的PMA與hs－CRP呈正相關(guān)［3］，提示血小板的活化與血小板－白細(xì)胞聚集體的形成在急性腦梗死發(fā)病中起重要作用。急性腦梗死患者服用腸溶阿司匹林后，CD42b和CD61明顯下降，說明血小板的黏附和聚集功能被抑制，而CD62p、PAC－1、PMA升高，提示腸溶阿司匹林對血小板的激活及PMA無抑制作用，與Sharpe等［4］的動物實驗結(jié)果一致，這可能是部分患者服用腸溶阿司匹林效果不佳的原因之一。

血塞通主要成分為三七總皂苷，具活血化瘀、通脈活絡(luò)、擴(kuò)張毛細(xì)血管、降低血管阻力、增加腦血供、降低血液黏稠度、抗血小板聚集、改善微循環(huán)等作用，從而防治腦缺血損傷。治療組加用血塞通后 CD42b、CD61、PAC－1、CD62p、PMA均下降，說明血塞通可以抑制血小板的激活及PMA的形成，與腸溶阿司匹林合用，增強(qiáng)了療效。兩組hs－CRP均有輕度的下降，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義，說明在腦梗死的發(fā)病過程中炎癥過程起作用，但腸溶阿司匹林及血塞通均不能明顯改變炎癥進(jìn)程。

腦動脈硬化、血管內(nèi)皮損傷、膠原暴露使血小板黏附，同時血管內(nèi)皮損傷造成局部血流動力學(xué)改變，產(chǎn)生高切變力以及脂肪斑塊破潰等使血小板活化。血小板活化后發(fā)生同源性聚集和異源性聚集，異源性聚集中最有意義的是血小板與白細(xì)胞的聚集。血小板和白細(xì)胞活化后，其表面的黏附分子表達(dá)增加，黏附分子與配體相互結(jié)合和 (或)通過纖維蛋白原的橋接作用形成血小板白細(xì)胞聚集體 (platelet－leukocyte aggregates，PLA)。PLA形成微血栓可以阻塞小血管，釋放多種炎性遞質(zhì)、細(xì)胞因子和血管活性物質(zhì)，使血管進(jìn)一步收縮，促使血栓形成而導(dǎo)致血管阻塞面積增大及神經(jīng)功能缺損加重，形成惡性循環(huán)［5］。血小板可與不同類別的白細(xì)胞結(jié)合分別形成 PNA、PMA和血小板－淋巴細(xì)胞聚集體 (PIyA)。多項研究表明，腦梗死患者PNA和PlyA并無顯著性增高，但PMA顯著增加，故我們選擇了PMA作為檢測PLA的指標(biāo)［3］。

抗血小板治療是目前國際上公認(rèn)有效的腦梗死治療方法，腸溶阿司匹林作為應(yīng)用最早最廣泛的抗血小板藥物，在心腦血管缺血性疾病治療及預(yù)防方面發(fā)揮著巨大的作用。但的確有部分患者長期服用腸溶阿司匹林仍然不能防止腦梗死的發(fā)生或復(fù)發(fā)。我們使用流式細(xì)胞儀檢測了急性腦梗死患者服用腸溶阿司匹林后與血小板活化相關(guān)的標(biāo)志物的變化，發(fā)現(xiàn)腸溶阿司匹林僅能抑制血小板的黏附與聚集，而對血小板的激活及PMA的形成無任何抑制作用，這與Lukasik等［6］的研究結(jié)果一致。說明對于急性腦梗死患者，單純應(yīng)用腸溶阿司匹林進(jìn)行抗血小板治療是不夠的［7］，而加用血塞通凍干粉后，血小板的激活及血小板－白細(xì)胞聚集體的形成明顯受到抑制［8］，提示血塞通和腸溶阿司匹林聯(lián)合應(yīng)用進(jìn)行抗血小板治療是合理可靠的。

1 中華神經(jīng)科學(xué)會，中華神經(jīng)外科學(xué)會.各類腦血管疾病診斷要點［J］.中華神經(jīng)科雜志，1996，29(6):37－380.

2 Marquardt L，Anders C，Buggle F，et al.Leukocyte－ platelet aggregates in acute and subacute ischemic stroke［J］.Cerebrovascular Disease，2009，28:276－282.

3 Cao YJ，Wang YM，Zhang J，et al.The effects of antiplatelet agents on platelet－leukocyte aggregations in patients with acute cerebral infarction ［J］.J Thromb Thrombolysis，2009，27(2):233－238.

4 Sharpe KS，Center SA，Randolph JF，et al.Influence of treatment with ultralow－dose aspirin on platelet aggregation as measured by whole blood impedance aggregometry and platelet P－selectin expression in clinically normal dogs［J］.Am J Vet Res，2010，71(11):1294 －1304.

5 Patrik H，Suzanne FM，Bernd T，et al.Course of platelet activation and platelet－leukocyte interaction in cerebrovascular ischemia［J］.Stroke，2006，37:2283－2287.

6 Lukasik M，Dworacki G，Michalak S，et al.Aspirin treatment influences platelet－related inflammatory biomarkers in healthy individuals but not in acute stroke patients［J］.Thromb Res，2011，128(5):e73－80.

7 Serebruany VL，Malinin AI，Ziai W，et al.Effects of clopidogrel and aspirin in combination versus aspirin alone on platelet activation and major receptor expression in patients after recent ischemic stroke:for the Plavix Use for Treatment of Stroke(PLUTO － Stroke)trial［J］.Stroke，2005，36(10):2289－2292.

8 龐德意.注射用血塞通 (凍干)治療腦梗死的療效觀察 ［J］.實用心腦肺血管病雜志，2012，20(12):2019.