抗核抗體檢測(cè)在乙肝患者中的應(yīng)用價(jià)值

鄭紅霞 郭飛飛

抗核抗體檢測(cè)在乙肝患者中的應(yīng)用價(jià)值

鄭紅霞 郭飛飛

目的 分析乙肝患者血清中抗核抗體(ANA)的陽(yáng)性率, 探討其臨床應(yīng)用價(jià)值。 方法 采用間接免疫熒光法(IIF)對(duì)90例乙肝患者和90例健康體檢者血清中的ANA進(jìn)行檢測(cè), 并測(cè)定其ALT、AST。結(jié)果 90例乙肝患者中ANA的陽(yáng)性率為18.9%, 熒光模型以核顆粒型為主；ANA陽(yáng)性組的ALT、AST高于ANA陰性組, 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論 HBV可誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生低滴度的抗核抗體, 自身抗體的產(chǎn)生與肝臟的損傷程度存在一定的相關(guān)性。

抗核抗體；乙型病毒性肝炎

乙肝病毒(HBV)是導(dǎo)致乙型病毒性肝炎的病原體。近些年的研究表明乙肝患者的肝細(xì)胞損傷并不是由HBV直接作用引起的, 而是通過(guò)誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生針對(duì)HBV的免疫應(yīng)答引起肝細(xì)胞免疫損傷, 表現(xiàn)為CD8+CTL對(duì)受感染肝細(xì)胞的細(xì)胞毒效應(yīng)［1］。在乙型肝炎的發(fā)生和發(fā)展過(guò)程中可能涉及針對(duì)自身抗原的免疫應(yīng)答?？购丝贵w(antinuclear antibody, ANA)是一組將自身真核細(xì)胞的各種成分例如核糖核蛋白、DNA、可提取的核抗原(ENA)和RNA等作為靶抗原的自身抗體的總稱(chēng), 能與所有動(dòng)物的細(xì)胞核發(fā)生反應(yīng)［2,3］。隨著研究的不斷深入, 科學(xué)家們開(kāi)始在乙肝患者的血液中發(fā)現(xiàn)多種非特異性自身抗體［4］。為進(jìn)一步了解自身免疫性抗體在乙肝發(fā)生和發(fā)展中的臨床意義, 本研究采用間接免疫熒光(IIF)和免疫印跡法(western blot)檢測(cè)90例乙肝患者和90例正常人血清中的ANA, 探索自身抗體在乙肝發(fā)生和發(fā)展中的作用。

1 資料與方法

1.1 一般資料 本研究選取2012年6月～2013年5月在本院感染科和消化科住院的乙肝患者90例作為實(shí)驗(yàn)組, 其中男性48例, 年齡30～65歲；女性42例, 年齡32～63歲。所有乙肝病例的診斷均符合2000年中華醫(yī)學(xué)會(huì)制定的診斷標(biāo)準(zhǔn)。對(duì)照組為來(lái)本院體檢健康體檢者, 其中男性45例, 年齡29～62歲；女性45例, 年齡30～58歲。所有對(duì)照均排除其他自身免疫性疾病。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 ANA檢測(cè) 以Hep-2細(xì)胞和猴肝組織的冰凍切片作為抗原。所有待檢血清自1:100起稀釋, 與生物薄片作用,熒光顯微鏡下觀察結(jié)果。組織或細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)特征性的綠色熒光、血清稀釋度≥1:100為陽(yáng)性。試劑為歐蒙公司生產(chǎn), 實(shí)驗(yàn)嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

1.2.2 ALT、AST檢測(cè) 在日立7600生化分析儀檢測(cè)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS16.0進(jìn)行數(shù)據(jù)分析, 計(jì)量資料采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料采用卡方檢驗(yàn), 以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 血清ANA檢測(cè) 實(shí)驗(yàn)組90例, 陽(yáng)性17例, 陰性73例, ANA陽(yáng)性率為18.9%, 對(duì)照組90例, 陽(yáng)性3例, 陰性87例, ANA陽(yáng)性率為3.3%。經(jīng)卡方檢驗(yàn), 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義, 即實(shí)驗(yàn)組ANA的陽(yáng)性率要高于對(duì)照組。

2.2 血清ALT、AST水平檢測(cè) ANA陽(yáng)性組血清中AST和ALT的水平分別為(120.6±59.1) U/L、(187.2±65.1)U/L；ANA陰性組血清中AST、ALT的水平分別為(73.4±50.3)U/L、(105.1±55.3)U/L。經(jīng)兩樣本t檢驗(yàn), P＜0.05, 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義, 即ANA陽(yáng)性組的AST、ALT水平高于ANA陰性組。

2.3 ANA陽(yáng)性患者熒光模型 ANA陽(yáng)性患者熒光模型情況見(jiàn)表1, 結(jié)果顯示, 實(shí)驗(yàn)組的熒光核型以核顆粒型為主, 其他核型較少。ANA陽(yáng)性組僅兩例標(biāo)本ANA血清稀釋度為1:320,其余均為1:100；對(duì)照組陽(yáng)性血清稀釋度均為1:100。

表1 ANA陽(yáng)性熒光模型分布情況

3 討論

本文通過(guò)對(duì)90例HBV感染者和正常體檢者血清中ANA的檢測(cè), 發(fā)現(xiàn)HBV感染者的ANA陽(yáng)性率為18.9%, 對(duì)照組僅為3.3%, 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義, 并且多以低滴度(1:100)為主, 核型主要是核顆粒型。生化指標(biāo)顯示, ANA陽(yáng)性組的ALT、AST水平均高于ANA陰性組, 說(shuō)明自身抗體陽(yáng)性的患者肝功能更容易受到損害。越來(lái)越多研究表明［5］, 乙肝病毒可通過(guò)多種途徑損害免疫系統(tǒng), 誘發(fā)自身免疫反應(yīng), 導(dǎo)致肝臟損傷。而患者體內(nèi)出現(xiàn)自身抗體則可能是疾病發(fā)展過(guò)程中的一種特征性表現(xiàn), 對(duì)疾病的診斷和轉(zhuǎn)歸有預(yù)示意義。

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532 nm激光全視網(wǎng)膜激光光凝治療糖尿病性視網(wǎng)膜病變療效分析

吳迪 梁越

【摘要】 目的 532 nm黃綠激光全視網(wǎng)膜激光光凝治療糖尿病性視網(wǎng)膜病變的療效評(píng)價(jià)。 方法 對(duì)95 例(138 眼)糖尿病性視網(wǎng)膜病變(DR)患者行VISUCAS 532 nm黃綠激光全視網(wǎng)膜激光光凝治療。術(shù)后密切隨訪, 末次光凝結(jié)束時(shí)開(kāi)始計(jì)時(shí), 術(shù)后3個(gè)月行熒光素眼底血管造影檢查。與激光治療前造影結(jié)果相比較, 主要觀察患者的視力、眼底無(wú)灌注區(qū)、新生毛細(xì)血管、玻璃體積血以及有無(wú)纖維增殖膜形成等情況, 對(duì)于原有毛細(xì)血管無(wú)灌注區(qū)或新生毛細(xì)血管仍未消退的患者要追加光凝治療。隨訪6個(gè)月～1年。 結(jié)果 末次治療6個(gè)月后65只眼(47.1%)視力提高2 行以上, 58只眼(42.0%)視力無(wú)明顯變化, 其余15只眼(10.9%)視力下降超過(guò)2 行。129只眼(93.5%)可見(jiàn)視網(wǎng)膜新生毛細(xì)血管消退, 9只眼(6.5%)出現(xiàn)玻璃體積血。對(duì)于少量玻璃體積血的患者, 通過(guò)采取玻璃體腔內(nèi)注射曲安奈德、補(bǔ)充視網(wǎng)膜激光光凝治療后, 患者玻璃體積血明顯吸收, 對(duì)于玻璃體積血量大的患者, 采取玻璃體切割術(shù), 術(shù)后患者視力均未受影響。 結(jié)論 532 nm黃綠激光全視網(wǎng)膜激光光凝治療糖尿病性視網(wǎng)膜病變安全有效。

【關(guān)鍵詞】 532 nm黃綠激光； 糖尿病性視網(wǎng)膜病變； 全視網(wǎng)膜激光光凝

作為糖尿病的最主要并發(fā)癥之一, 糖尿病性視網(wǎng)膜病變(DR)是臨床上最常見(jiàn)的視網(wǎng)膜血管病變, DR可導(dǎo)致反復(fù)的視網(wǎng)膜及玻璃體出血、難治性新生血管性青光眼、視網(wǎng)膜脫離等嚴(yán)重的并發(fā)癥, 可導(dǎo)致視力不同程度的下降甚至喪失,是非常嚴(yán)重的致盲性眼病。選擇恰當(dāng)?shù)臅r(shí)機(jī)合理進(jìn)行全視網(wǎng)膜激光光凝術(shù)( PRP)可有效防止糖尿病性視網(wǎng)膜病變所導(dǎo)致的嚴(yán)重并發(fā)癥, 是目前臨床上治療DR最有效的方法?，F(xiàn)將吉林省人民醫(yī)院眼科眼科自2011 年1 月～2012年12 月首次進(jìn)行532 nm激光光凝治療的95 例(138 眼)DR患者的治療情況進(jìn)行回顧性分析, 報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 DR患者共95例(138 眼), 其中男39例(52眼), 女56例(86 眼), 年齡35 ～75歲, 平均(55.2 ± 2.2)歲?；颊咭暳Γ?只眼視力低于0.1, 42 只眼視力0.1～0.3, 其余95 只眼視力在0.4 及以上, 其中9只眼為白內(nèi)障術(shù)后人工晶體眼, 所有患者均為2 型糖尿病, 糖尿病病史5～34 年, 平均11.9 年。所有患者術(shù)前常規(guī)檢查裂隙燈、眼底鏡、眼壓、眼底熒光素血管造影(FFA)、血壓、心電圖等。

1.2 方法

1.2.1 器械設(shè)備 德國(guó)蔡司VISULAS 532S眼底激光治療儀。

1.2.2 術(shù)前復(fù)方托品卡胺散瞳(美多麗P)、奧布卡因(倍諾喜)表麻。

1.2.3 光凝方法 黃斑區(qū)血管弓外全視網(wǎng)膜黃綠激光光凝。具體參數(shù)：功率180～300 mW, 光斑直徑200～500 μm, 曝光時(shí)間0.2 s, III級(jí)激光反應(yīng)斑。對(duì)具有臨床意義的黃斑水腫, 進(jìn)行格柵光凝治療, 具體參數(shù)為：功率100 mW, 光斑直徑為50～100 μm, 曝光時(shí)間0.1～0.2 s, I級(jí)激光反應(yīng)斑。以上治療每周進(jìn)行1 次, 共計(jì)1500 ～2000 個(gè)點(diǎn), 分3～4 次完成單眼的激光光凝治療。治療后給予普拉洛芬眼藥水點(diǎn)眼, 4次/d, 共計(jì)3 d。末次激光光凝治療后半個(gè)月、1個(gè)月、2個(gè)月進(jìn)行隨訪, 3 個(gè)月詳查視力、眼底鏡檢查及FFA, 必要時(shí)進(jìn)行補(bǔ)充激光光凝治療, 隨訪6個(gè)月～1年。

1.3 療效標(biāo)準(zhǔn)

1.3.1 視力 以末次激光治療后6個(gè)月時(shí)的視力為評(píng)價(jià)指標(biāo), 視力檢測(cè)統(tǒng)一采用國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)對(duì)數(shù)視力表, 治療后視力增加2 行及以上為“視力提高”, 視力下降2 行及以上為“視力下降”, 否則為“視力不變”。

1.3.2 眼底檢查 ①治療有效：視網(wǎng)膜散在清晰的激光斑,原有的視網(wǎng)膜出血、滲出及水腫減少或消失。無(wú)新發(fā)的視網(wǎng)膜出血、滲出, 未出現(xiàn)玻璃體積血。 ②治療無(wú)效：原有的視網(wǎng)膜出血、滲出及水腫加重, 玻璃體積血形成, 新生毛細(xì)血管網(wǎng)增加, 纖維增殖膜形成。

1.3.3 末次治療 3個(gè)月后復(fù)查FFA①治療有效：與治療前FFA相比較, 原有視網(wǎng)膜的出血、無(wú)灌注區(qū)、新生毛細(xì)血管網(wǎng)減少或消失, 且無(wú)新發(fā)病變；②治療無(wú)效：原有視網(wǎng)膜的出血、無(wú)灌注區(qū)、新生毛細(xì)血管網(wǎng)增加, 甚至出現(xiàn)玻璃體積血, 纖維增殖膜形成, 出現(xiàn)黃斑水腫或水腫加重, 視網(wǎng)膜脫離。

2 結(jié)果

2.1 治療后6個(gè)月視力變化 65只眼(47.1%)視力提高, 58只眼(42.0%)視力未見(jiàn)明顯變化, 其余15 只眼(10.9%)視力下降。

2.2 視網(wǎng)膜變化 129只眼(93.5%)可見(jiàn)視網(wǎng)膜新生毛細(xì)血管消退, 9只眼(6.5%)出現(xiàn)玻璃體積血者經(jīng)玻璃體腔內(nèi)注射曲安奈德及補(bǔ)充視網(wǎng)膜激光光凝治療后玻璃體積血明顯吸收, 或行玻璃體切割術(shù)切除玻璃體內(nèi)積血, 患者視力未受到影響。

3 討論

血糖增高可引起多種生化、生理改變, DR的形成是就是由于血糖代謝異常使視網(wǎng)膜毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞受損, 周細(xì)胞減少、基底膜增厚, 毛細(xì)血管腔減小, 毛細(xì)血管內(nèi)屏障失代償, 毛細(xì)血管閉塞, 導(dǎo)致組織缺血、缺氧, 刺激視網(wǎng)膜釋放新生血管生長(zhǎng)因子, 從而產(chǎn)生視網(wǎng)膜新生毛細(xì)血管。新生毛細(xì)血管非常脆弱, 易引起滲漏及出血, 從而導(dǎo)致出現(xiàn)多種嚴(yán)重并發(fā)癥。通過(guò)激光光凝治療, 視網(wǎng)膜缺血缺氧區(qū)域被破壞, 遏制了新生血管刺激因子的生成, 使視網(wǎng)膜的營(yíng)養(yǎng)供給狀況得以改善［1］, 并且可加強(qiáng)脈絡(luò)膜血液向視網(wǎng)膜的流通,還可能增強(qiáng)外層血管視網(wǎng)膜屏障功能, 利于液體由視網(wǎng)膜流向脈絡(luò)膜［2］。從而遏制了新生毛細(xì)血管刺激因子的生成, 防止新生毛細(xì)血管的生長(zhǎng), 促進(jìn)已形成的新生毛細(xì)血管的消退。因此, 適時(shí)恰當(dāng)?shù)腜RP治療, 是抑制視網(wǎng)膜新生血管、防止玻璃體出血的重要手段［3］。影響DR 激光光凝治療療效的因素很多, 關(guān)鍵是根據(jù)DR嚴(yán)重程度選擇適當(dāng)?shù)腜RP, 即合理的激光參數(shù)(輸出功率、激光波長(zhǎng)、曝光時(shí)間、光斑大小)、激光范圍及激光密度。532 nm波長(zhǎng)的黃綠光, 穿透力強(qiáng)而散射力少, 易被視網(wǎng)膜色素上皮及血紅蛋白吸收, 同時(shí)患者疼痛感發(fā)生率小, 非常適用于大面積的視網(wǎng)膜光凝。全視網(wǎng)膜光凝至少需1500～2000 點(diǎn), 分3～4次完成, 每周1次, 激光反應(yīng)光斑III級(jí), 格柵光凝I級(jí)(淺灰白斑)為宜, 為有效光斑。對(duì)于視網(wǎng)膜新生毛細(xì)血管網(wǎng), 切勿直接光凝, 應(yīng)在其周?chē)M(jìn)行密集光凝, 視盤(pán)周?chē)?個(gè)PD范圍內(nèi)勿行光凝。全視網(wǎng)膜光凝術(shù)后定期隨訪也是保證其療效的重要環(huán)節(jié)。光凝結(jié)束3個(gè)月后復(fù)查FFA, 如發(fā)現(xiàn)有毛細(xì)血管無(wú)灌注區(qū)、新生毛細(xì)血管未消退或有新形成的毛細(xì)血管, 都需及時(shí)補(bǔ)充PRP治療。綜上所述, 532 nm視網(wǎng)膜激光光凝治療是DR安全有效的治療手段。對(duì)于糖尿病患者, 尤其是病史5～10年以上者,應(yīng)定期進(jìn)行眼底檢查, 早期發(fā)現(xiàn)DR, 把握最佳治療時(shí)機(jī), 選擇合理的視網(wǎng)膜激光光凝方法, 術(shù)后嚴(yán)密隨訪, 3個(gè)月有復(fù)查FFA, 必要時(shí)補(bǔ)充激光光凝治療, 可有效阻止DR的進(jìn)展速度, 極大提高患者的生存質(zhì)量及視覺(jué)質(zhì)量。

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450000 河南省鄭州市鄭州大學(xué)附屬鄭州市中心醫(yī)院

作者單位：130021 吉林省人民醫(yī)院眼科