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    4種誘抗劑誘導番茄抗晚疫病的初步效果

    2013-09-03 02:55:24李少波石延霞劉君麗謝學文李寶聚
    中國蔬菜 2013年12期
    關鍵詞:噻二唑晚疫病抗病

    李少波 石延霞 劉君麗 謝學文 李寶聚

    (1沈陽農業(yè)大學,遼寧沈陽 110866;2中國農業(yè)科 學院蔬菜花卉研究所,北京 100081)

    番茄晚疫病又稱番茄疫病、黑桿病,是由卵菌門卵菌綱霜霉目腐霉科疫霉屬的致病疫霉〔Phytophthora infestans(Mont)de Bary〕侵染所致,在 北京、山西、云南、貴州、重慶、山東、陜西、河南、河北等省市均普遍發(fā)生。番茄晚疫病是保護地番茄的重要病害,一旦發(fā)生就會迅速蔓延,是一種毀滅性的病害。

    生產中防治番茄晚疫病的方法主要為化學農藥。目前常用的殺菌劑主要有75%百菌清可濕性粉劑(WP)、50%甲霜靈WP、72%霜脲·錳鋅WP、68%精甲霜·錳鋅WP、10%氰霜唑懸浮劑(SE)和70%丙森鋅WP(石延霞 等,2007),但長期單一使用同類殺菌劑,使得病原菌對一些常用殺菌劑表現(xiàn)出抗藥性(沈國強 等,2006),且化學殺菌劑常用于病害發(fā)生后,不利于控制病害的大規(guī)模爆發(fā),易造成田間減產甚至絕收。近幾年迅速發(fā)展的植物誘抗劑對病害具有預防作用,通過加強植物自身免疫達到對病原菌的抗性作用。本試驗選用的4種誘抗劑在國內或者國外均有登記,其作用對象各不相同,本試驗通過葉面噴霧施藥,研究4種誘抗劑對番茄晚疫病的抗病反應,為其在田間番茄晚疫病的防治應用中提供相關參考。

    1 材料與方法

    1.1 試驗材料

    供試藥劑:1%苯并噻二唑水乳劑(EW),北京廣源益農化學有限責任公司生產。3%氨基寡糖素水劑(AS),購自大連奧德植保藥業(yè)有限公司。2%幾丁聚糖AS,購自山東科大創(chuàng)業(yè)生物有限公司。2%香菇多糖AS,購自黑龍江省大地豐農業(yè)科技開發(fā)有限公司。

    供試植株:番茄品種為中雜105。

    供試病原菌:番茄晚疫病菌P. infestans分離自番茄晚疫病發(fā)病植株,經致病性試驗鑒定為強致病菌株,菌株編號為FQWY,由中國農業(yè)科學院蔬菜花卉研究所分離鑒定保存。

    1.2 4種誘抗劑對番茄晚疫病菌的抑菌活性

    采用平皿法測定4種誘抗劑對番茄晚疫病菌的抑制活性,將4種誘抗劑分別稀釋配制成3種不同濃度(表1),對照殺菌劑為50%烯酰嗎啉WP。在無菌條件下,將預先融化的燕麥培養(yǎng)基(35 g燕麥,20 g瓊脂,1 000 mL H2O)定量加入無菌錐形瓶中,定量吸取藥液,分別加入錐形瓶后搖勻,等量倒入培養(yǎng)皿中,制成相應濃度的含藥平板。在無菌條件下用滅菌打孔器取菌餅,將菌餅接種于含藥平板中央,菌絲面朝上,置于光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng),培養(yǎng)條件:溫度28 ℃,光照12 h·d-1,光照強度10 000 lx。每個處理4次重復。3 d后調查病原菌菌絲生長情況,用卡尺測量菌落直徑,用十字交叉法垂直測量直徑各一次,取其平均值。

    1.3 4種誘抗劑對苗期番茄晚疫病的誘導抗性

    將4種誘抗劑分別配制成3種不同濃度,對照殺菌劑50%烯酰嗎啉WP稀釋成1 000倍液,選擇3~4片復葉期的番茄幼苗,將4種誘抗劑均勻噴施于番茄葉面,間隔5 d噴施1次,連續(xù)噴霧誘導3次,第3次誘導后24 h葉面噴霧接種晚疫病病原菌孢子懸浮液(1×106個·mL-1),每株接種孢子懸浮液3 mL。對照殺菌劑50%烯酰嗎啉WP采用葉面噴霧方式,施藥時間和次數(shù)同誘抗劑,另設只接種不施藥的清水對照處理,及不接種不施藥的空白對照。接種后將番茄放入保濕箱中保濕培養(yǎng),培養(yǎng)條件:晝溫25 ℃,夜溫18 ℃,濕度90%~100%。每處理4次重復,每重復20株番茄幼苗,待清水對照充分發(fā)病后調查病情指數(shù),計算誘導效果。

    番茄晚疫病病情分級標準(GB/T 17980. 31-2000):0級,無病斑;1級,病斑面積占整個葉面積5%以下;3級,病斑面積占整個葉面積6%~10%;5級,病斑面積占整個葉面積11%~20%;7級,病斑面積占整個葉面積21%~50%;9級,病斑面積占整個葉面積50%以上。

    1.4 4種誘抗劑對成株期番茄晚疫病的誘導抗性

    分別于2010年9月和2011年10月在中國農業(yè)科學院蔬菜花卉所試驗溫室對番茄進行誘導抗病性研究。在2010年9月中旬和2011年10月上旬番茄主莖7~9葉期,將不同濃度的4種誘抗劑均勻噴施于番茄植株上,施藥量為每小區(qū)1 L,間隔5 d誘導1次,連續(xù)誘導3次,對照殺菌劑50%烯酰嗎啉WP稀釋1 000倍液,施藥時間和次數(shù)同4種誘抗劑,另設不施藥清水對照,每處理4次重復,每重復1個小區(qū),每小區(qū)20株番茄苗,待對照發(fā)病后調查病情指數(shù),計算誘導抗病效果,調查分級標準及病情指數(shù)計算方法同1.3。

    式中:CK0為空白對照區(qū)誘導前病情指數(shù);CK1為空白對照區(qū)誘導后病情指數(shù);PT0為藥劑處理區(qū)誘導前病情指數(shù);PT1為藥劑處理區(qū)誘導后病情指數(shù)。

    1.5 數(shù)據(jù)處理

    利用SAS 9.0軟件Duncan’s 新復極差法比較數(shù)據(jù)之間的差異顯著性。

    2 結果與分析

    2.1 4種誘抗劑對番茄晚疫病菌的抑菌活性

    4種誘抗劑對番茄晚疫病菌的抑菌活性測定結果表明(表1),不同濃度1%苯并噻二唑EW、2%香菇多糖AS、2%幾丁聚糖AS和3%氨基寡糖素AS與對照殺菌劑50%烯酰嗎啉WP相比,并無明顯殺菌活性;4種誘抗劑的抑菌活性普遍低于30%,而對照殺菌劑抑菌活性為100%,證明這4種誘抗劑均無明顯的殺菌活性。

    表1 4種誘抗劑對致病疫霉菌菌絲生長的抑制效果

    2.2 4種誘抗劑對苗期番茄晚疫病的誘導抗性效果

    通過苗期盆栽試驗發(fā)現(xiàn)(表2),葉面噴施4種誘抗劑后,番茄對晚疫病均產生了很好的抗性,不同濃度產生的誘導抗性效果不同,平均效果均在60%以上,對照殺菌劑50%烯酰嗎啉WP在處理前期防治效果為94.12%,在處理后28 d防治效果有所下降;3%氨基寡糖素AS和2%幾丁聚糖AS誘導效果較好,不同濃度處理效果均達到了80%以上,其中100 mg·L-1的3%氨基寡糖素AS在處理后21 d和28 d的誘導效果分別為84.13%和88.42%,500 mg·L-1的2%幾丁聚糖AS在處理后21 d和28 d的誘導效果分別為88.85%和90.06%,持效性好于對照殺菌劑50%烯酰嗎啉WP(85.49%)。

    2.3 4種誘抗劑對成株期番茄晚疫病的誘導抗性效果

    通過田間溫室試驗發(fā)現(xiàn),不同濃度的4種誘抗劑對田間番茄晚疫病起到了很好的誘導抗性效果(表3),大部分誘導抗病效果高于對照50%烯酰嗎啉WP。2010年試驗中50 mg·L-1的1%苯并噻二唑EW的誘導抗病效果最佳,為94.71%,100 mg·L-1和50 mg·L-1的3% 氨基寡糖素 AS、500 mg·L-1的2%幾丁聚糖AS的誘抗效果也均超過了90%;2011年試驗中100 mg·L-1的3%氨基寡糖素AS的誘導抗病效果最佳,為95.89%,50 mg·L-1的1%苯并噻二唑EW和500 mg·L-1的2%幾丁聚糖AS的誘導抗病效果也超過了90%。

    表2 4種誘抗劑對苗期番茄晚疫病誘導抗性效果

    3 結論與討論

    本試驗以番茄晚疫病為試驗對象,研究4種誘抗劑對番茄晚疫病的誘導抗病性表達,通過抑菌活性測定證實4種誘抗劑對番茄晚疫病菌的菌絲生長沒有明顯的抑制作用,抑菌效果均在30%以下,證明這4種誘抗劑無明顯的抑菌活性;盆栽和田間試驗結果表明,4種誘抗劑對番茄晚疫病的防病效果為誘導抗病性,盆栽試驗結果表明不同濃度的4種誘抗劑對苗期番茄晚疫病的誘導抗病效果均超過了60%,田間試驗結果表明4種誘抗劑對成株期番茄晚疫病誘導抗病效果均超過了70%(除12.5 mg·L-1的2%幾丁聚糖AS處理外)。且和對照殺菌劑50%烯酰嗎啉WP相比持效性更好。

    在蔬菜生產中,通常采用噴施化學農藥的方法來控制病害的發(fā)生,但化學殺菌劑多施用于病害發(fā)生以后,具有不可控性,容易造成大面積減產,且長期大量的使用化學農藥,尤其單一的使用某種殺菌劑,易導致病原菌產生抗藥性、農產品中藥劑殘留和環(huán)境污染等一系列的問題,嚴重制約了農業(yè)的可持續(xù)發(fā)展。近年來,利用誘抗劑誘導果蔬產生抗病性逐漸成為作物病害防治的發(fā)展方向,目前有應用潛力的誘抗劑有很多,包括寡糖類生物農藥、苯并噻二唑、水楊酸等,這些誘抗劑本身沒有殺菌活性,但能激活植物體內防御機制,誘導植物抗病信號轉導和相關抗病基因的表達,從而起到抗病的作用,誘導抗病技術在園藝作物病害防治領域起著越來越重要重要的作用。

    表3 4種誘抗劑對成株期番茄晚疫病誘導抗性效果

    目前國外報道苯并噻二唑 可用來誘導番茄抗花葉病毒?。═obac co mosaic virus)、甘藍抗霜霉?。≒eronospora parasitica)、豌豆抗銹病(Uromyces pisi)、花椰菜抗霜霉?。≒eronospora parasitica)等(Anfoka,2000;Barilli et al.,2012),其中葉面噴施苯并噻二唑后霜霉病對甘藍的侵染由95%減少到15%,種子處理后對甘藍的侵染由99%減少到73%;5~75 mg·L-1苯并噻二唑處理的花椰菜種子對霜霉病的抗性效果均超過了69%(Godard,1999),在番木瓜上也可引起植株的系統(tǒng)抗性(Zhu et al.,2003)。葉面噴施幾丁聚糖對水稻紋枯病菌(Thanatephorus cucumeris)的誘導抗性效果均超過了60%(Liu et al.,2012),還能引起作物對鐮刀菌屬(Fusarium)和茄匍柄霉(Stemphylium solani)的誘導抗病性(Li et al.,2012),在煙草上可用來防治煙草黑脛病(Phytophtora parasiticavar.nicotianae)(Falcón-Rodríguez et al.,2011),也有報道稱幾丁聚糖和硼酸復配為可濕性粉劑對茄病鐮刀菌(Fusarium solani)具有直接的殺菌作用(Saita et al.,2012);苯并噻二唑對厚皮甜瓜的黑斑?。ˋlternaria alternata)、番茄和辣椒的細菌性斑點?。╔anthomonas campstrispv.Vesicatoria)、葡萄灰霉?。˙otrytis cinerea)、黃瓜蔓枯病(Didymella bryoniae)等多種果蔬病害均具有誘導抗性效果(Godard et al.,1999;Bokshi et al.,2003;Iriti&Faoro,2003),其中對霜霉病誘抗效果明顯,如10~70 mg·L-1的苯并噻二唑葉面處理黃瓜植株對霜霉病的誘導抗病效果均超過63%(王莉 等,2005;蔡洪生 等,2007)。本試驗選用的4種誘抗劑國內均有登記,但防治對象各不相同,國內登記的氨基寡糖素AS有0.5%、2%、3%和5%,防治對象為番茄晚疫?。≒. infestans)、西瓜枯萎?。∕ycosphaerella melonis)、白菜軟腐?。‥rwinia carotovorasubsp.carotovora)、煙草病毒病(TMV)、番茄病毒?。═MV)等;而2%幾丁聚糖AS防治對象則主要為番茄晚疫?。≒. infestans)、番茄病毒?。═MV)、黃瓜白粉?。≒odosphaera fusca)、黃瓜霜霉?。≒seudoperonospora cubensis);香菇多糖AS已登記有0.5%、1%和2%,防治對象為煙草花葉病毒?。═MV)、番茄病毒?。═MV)、辣椒病毒?。–apsicum mottle virus)等病毒性病害(http://www.chinapesticide.gov. cn)。

    番茄晚疫病是保護地番茄生產的毀滅性病害,近幾年在田間生產上常造成大面積減產,在晚疫病發(fā)生前或者發(fā)生初期使用誘導抗病劑,具有很好的預防作用,可以有效的減少田間損失,在未來園藝作物病害防治中,誘導抗病技術有著廣闊的應用前景。在田間實際應用中,由于誘抗劑需提前施藥預防病害的發(fā)生,對病害發(fā)生后防治有一定的難度,因此幾種誘抗劑在發(fā)病前的最佳施藥間隔期和施藥次數(shù)還有待進一步研究,以便達到對番茄晚疫病最經濟有效的預防和防治。

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