精氨酸對籠養(yǎng)生長期蛋鴨生長性能及免疫功能的影響

東北農(nóng)業(yè)大學(xué)動物營養(yǎng)研究所 譚玲芳 王 安＊ 李 越 田世勛 劉凱玉

精氨酸是家禽的必需氨基酸，其不僅是機(jī)體蛋白質(zhì)的組成成分，而且還是多種生物活性物質(zhì)的合成前體，可通過多種途徑參與調(diào)節(jié)動物體營養(yǎng)物質(zhì)和機(jī)體特異性免疫調(diào)節(jié)等生物學(xué)過程。目前，有關(guān)精氨酸在蛋鴨上的應(yīng)用研究較少，本試驗(yàn)擬在玉米-豆粕型飼糧中添加精氨酸，以探討精氨酸對籠養(yǎng)生長期蛋鴨的生長性能和免疫功能的影響，確定精氨酸的最適添加量，為蛋鴨飼糧的配制提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動物 試驗(yàn)選用5周齡平均體重為（594.47±2.61）g的金定蛋鴨180只，各組之間體重經(jīng)方差分析，差異不顯著（P＞0.05）。采用單因子試驗(yàn)設(shè)計(jì)，隨機(jī)分為5組，每組6個重復(fù)，每個重復(fù)6只試鴨。試驗(yàn)期為6周。

1.2 試驗(yàn)飼糧及飼養(yǎng)管理 參照中國飼料及營養(yǎng)價值表（2011）營養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)和蛋鴨營養(yǎng)需要量配制玉米-豆粕型基礎(chǔ)飼糧。對照組（Ⅰ組）飼喂基礎(chǔ)飼糧（含精氨酸0.93%），試驗(yàn)組（Ⅱ ～Ⅴ組）分別在基礎(chǔ)飼糧上添加精氨酸0.12%、0.24%、0.36%、0.48%，則各組飼糧精氨酸的含量分別為0.93%、1.05%、1.17%、1.29%、1.41%，各組除精氨酸水平之外其他營養(yǎng)水平保持一致。在飼養(yǎng)期間保證足夠的通風(fēng)和光照，全期自由采食和飲水，并按照正常免疫程序進(jìn)行免疫。基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平見表1。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平（風(fēng)干基礎(chǔ)）

1.3 樣品采集與處理 試驗(yàn)結(jié)束時從各重復(fù)組中抽取1只健康、體重接近平均值的試鴨，頸靜脈空腹采血5 mL，靜置后3000 r/min離心15 min，收集血清樣品存放于EP管中，于-20℃保存?zhèn)溆?。采血后將試鴨放血處死?/p>

1.4 檢測指標(biāo)與方法

1.4.1 生長性能指標(biāo) 試驗(yàn)開始時稱每組試鴨初始體重，以后每周稱一次，每次稱重前一晚20∶00撤料，空腹12 h后第二天早08∶00稱重。每周統(tǒng)計(jì)各組試鴨耗料量，余料回收并作詳細(xì)記錄。計(jì)算平均日增重（ADG）平均日采食量（ADFI）和料重比（F/G）。

1.4.2 免疫指標(biāo) 免疫球蛋白IgG、IgA、IgM含量采用日本島津UV-2401PC紫外可見分光光度計(jì)測定，試劑盒由中生北控生物科技股份有限公司提供。血清中總蛋白（TP）、白蛋白（ALB）含量采用意大利FULLY全自動生化分析儀測定，試劑盒由中生北控生物科技股份有限公司提供。

1.5 統(tǒng)計(jì)分析 試驗(yàn)數(shù)據(jù)通過Excel軟件進(jìn)行初步整理后，采用SPSS 20.0軟件的ANOVA程序進(jìn)行單因素方差分析，差異顯著則進(jìn)行Duncan’s多重比較，顯著水平設(shè)定為P＜0.05，數(shù)據(jù)結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤”表示。對相應(yīng)的指標(biāo)用二次曲線進(jìn)行回歸分析，采用曲線估計(jì)法建立二次回歸模型：Y=aX2+bX+c，當(dāng)獲得顯著性二次效應(yīng)時，以曲線拐點(diǎn)對應(yīng)值的Y值來確定飼糧中精氨酸的最適宜含量。

2 結(jié)果與分析

2.1 飼糧添加不同水平精氨酸對生長期蛋鴨生長性能的影響 由表2可見，飼糧中添加不同水平精氨酸能夠顯著提高各試驗(yàn)組蛋鴨平均日增重，其中Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組顯著高于對照組Ⅰ組（P＜0.05），Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組顯著高于Ⅴ組（P ＜ 0.05）；Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組平均日采食量顯著高于Ⅰ組 （P＜0.05），其中Ⅲ組顯著高于Ⅴ組（P ＜ 0.05）；Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組料肉比與對照組相比差異顯著 （P＜0.05），分別降低 13.07%、16.58%、15.45%、9.17%，其余各組之間差異均不顯著（P＞0.05）。

表2 飼糧精氨酸水平對籠養(yǎng)生長期蛋鴨生長性能的影響

2.2 飼糧添加不同水平精氨酸對生長期蛋鴨血清生化指標(biāo)的影響 由表3可見，各血清生化指標(biāo)均隨著飼糧精氨酸含量的上升呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢。飼糧中不同精氨酸水平對各處理組免疫球蛋白 IgG、IgA含量影響不顯著 （P＞0.05）；Ⅲ、Ⅳ組IgM含量分別比對照組提高75.36%和 60.87%，且差異顯著（P ＜ 0.05），其余各組間差異不顯著（P＞0.05）；Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組血清TP含量顯著高于Ⅰ組（P＜0.05），分別較Ⅰ組提高 27.54%、33.33%、27.26%，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組之間差異不顯著（P＞0.05）；對照組血清ALB含量顯著低于其他各組（P＜ 0.05），Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組之間無顯著差異（P ＞ 0.05）。

表3 飼糧精氨酸水平對生長期蛋鴨血清生化指標(biāo)的影響mg/mL

2.3 二次曲線回歸模型估測飼糧精氨酸最適宜添加水平 經(jīng)上述試驗(yàn)數(shù)據(jù)分析，本試驗(yàn)中有效評價精氨酸營養(yǎng)需要的指標(biāo)為ADG、ADFI和IgM，通過二次曲線回歸模型，建立飼糧精氨酸不同濃度與各個敏感指標(biāo)之間的二次回歸方程，式中，X為飼糧精氨酸水平，Y為各個敏感指標(biāo)，曲線擬合方程見表4。根據(jù)回歸方程，飼糧中精氨酸最適添加水平為1.19%～1.21%。

表4 擬合曲線模式估測生長期蛋鴨飼糧精氨酸適宜添加水平

3 討論

3.1 精氨酸對蛋鴨生長性能的影響 本試驗(yàn)結(jié)果顯示，與對照組相比飼糧中添加不同濃度的精氨酸均可顯著提高生長期蛋鴨的ADG和ADFI，但隨精氨酸濃度的增加表現(xiàn)出先升高后降低的趨勢，并且添加精氨酸后各組料重比與對照組相比均顯著降低。說明飼糧中添加適宜水平的精氨酸能夠顯著提高生長期籠養(yǎng)蛋鴨的生長性能。劉鳳菊等（2011）研究報道，精氨酸對生長性能的影響主要是通過合成肌肉蛋白質(zhì)和通過精氨酸的主要代謝產(chǎn)物多胺等來發(fā)揮作用的。精氨酸可以被甘氨酸轉(zhuǎn)脒基酶和精氨酸分解酶降解為鳥氨酸和尿素（Wu，1997）；鳥氨酸是合成多胺類物質(zhì)（如精脒、精胺）的前體，它在P252C還原酶 （PR）和P252C脫氨酶（PD）的作用下最終分別轉(zhuǎn)化為腐胺、脯氨酸和谷氨酰胺，腐胺可以生成亞精胺和精胺（三者統(tǒng)稱為多胺）（Wu 和 Knabe，1995）。 多胺是調(diào)節(jié)細(xì)胞生長的重要物質(zhì)，其可以穩(wěn)定細(xì)胞結(jié)構(gòu)，與核酸分子結(jié)合，并且增強(qiáng)核酸與蛋白質(zhì)的合成，是細(xì)胞增殖的促進(jìn)劑。方勇軍等（2010）試驗(yàn)表明，精氨酸缺乏時嚴(yán)重影響肉鴨的生長，當(dāng)添加量為1.12%時獲得最佳飼料報酬。麻名文和李福昌（2010、2009）研究指出，當(dāng)日糧中精氨酸含量為1.15%時能夠顯著提高斷奶至2月齡肉兔的日增重和日采食量，但是對料肉比影響不顯著，當(dāng)日糧中精氨酸含量為0.95%時，2～3月齡生長肉兔日糧中已不需要再額外添加精氨酸。閆偉等（2010）研究結(jié)果表明，飼料中添加1.82%的精氨酸對免疫應(yīng)激有一定的緩解作用，并且可以增加免疫應(yīng)激期機(jī)體對飼料的利用率。本試驗(yàn)通過ADG、ADFI與各精氨酸濃度之間的二次回歸方程計(jì)算得出當(dāng)飼糧中精氨酸濃度分別為1.20%、1.19%時生長性能最佳，這與前人研究結(jié)果有所不同，可能與動物種類、研究方法以及動物生理狀況有關(guān)。

3.2 精氨酸對蛋鴨免疫功能的影響 免疫球蛋白是具有抗體活性或化學(xué)結(jié)構(gòu)與抗體相似的一類球蛋白，在機(jī)體的免疫應(yīng)答過程中占據(jù)重要的地位（廖明和丘鶴英，1996）。免疫球蛋白廣泛存在于動物的血液、組織液、淋巴液中，是由B細(xì)胞接受抗原刺激后增殖分化為漿細(xì)胞所產(chǎn)生的介導(dǎo)體液免疫的重要免疫分子。其中IgG在家禽血清中含量最高，對于提高家禽的免疫力和增重起著首要作用。IgM的調(diào)理、殺菌和凝集作用均強(qiáng)于IgG，但是產(chǎn)生的時間早，半衰期較短，作用范圍窄，主要在感染疾病早期起先鋒免疫的作用。IgA能夠抵抗蛋白酶的消化，是機(jī)體黏膜局部，尤其是消化道和呼吸道免疫的主要力量。麻名文和李福昌（2010）研究發(fā)現(xiàn)，在日糧中添加精氨酸，2～3月齡肉兔血清IgA含量極顯著增高，并指出日糧適宜精氨酸水平有利于生長肉兔體液免疫的發(fā)揮，但是IgG和IgE無顯著變化。喬世峰等（2005）在重癥急性胰腺炎大鼠腸道黏膜免疫的研究中指出，精氨酸可提高機(jī)體的細(xì)胞及體液免疫功能，顯著提高IgG、IgA含量。本試驗(yàn)結(jié)果表明，飼糧中添加不同濃度的精氨酸可以顯著提高血清中免疫球蛋白IgM的含量，通過分析得出精氨酸最適宜添加量為1.21%。精氨酸對血液中免疫球蛋白IgG、IgA的含量影響不顯著。這與前人研究結(jié)果不一致，可能與動物種屬，飼養(yǎng)方式和生理狀況有關(guān)，具體原因以及添加水平有待進(jìn)一步研究。

血清TP主要在肝臟中合成，其含量的高低直接反映出動物生長發(fā)育情況和生理狀態(tài)。ALB能維持機(jī)體滲透壓的平衡，并可用于修補(bǔ)組織及提供能量，與機(jī)體免疫功能相關(guān)。岑瑛等（1999）在大鼠中的研究結(jié)果顯示，飼糧中補(bǔ)充精氨酸使燒傷后大鼠負(fù)氮平衡減輕，并且獲得了正氮平衡。劉玉蘭等（2008）研究表明，仔豬飼糧中含1.76%或2.26%精氨酸在一定程度上緩解了脂多糖刺激所導(dǎo)致的TP、ALB含量的降低，指出精氨酸可促進(jìn)機(jī)體蛋白質(zhì)的合成，維持血液中抗體正常適度的合成和分泌。本試驗(yàn)結(jié)果表明，這與對照組相比飼糧中添加精氨酸顯著提高血清中TP、ALB水平，這與前人研究結(jié)果一致。

4 結(jié)論

4.1 玉米-豆粕型飼糧中原有精氨酸含量已不能夠滿足5～10周齡金定蛋鴨的生長需要。在本試驗(yàn)條件下，飼糧中適量添加精氨酸能夠顯著提高籠養(yǎng)生長期蛋鴨的生長性能及免疫能力。

4.2 結(jié)合各項(xiàng)指標(biāo)，通過二次回歸模型分析可知在籠養(yǎng)條件下，5～10周齡金定蛋鴨飼糧中精氨酸的最適含量為1.19%～1.21%。

[1]方勇軍，郭小陽，吳靈英.飼糧精氨酸對0～21日齡櫻桃谷肉鴨生長和免疫器官指數(shù)的影響[J].飼料工業(yè)，2010，31（6）：40 ～ 43.

[2]劉玉蘭，黃晶晶，范偉，等.L-精氨酸對脂多糖刺激斷奶仔豬生長性能、血液生化指標(biāo)和內(nèi)臟器官重量的影響[J].動物營養(yǎng)學(xué)報，2008，20（2）：140～145.

[3]劉鳳菊，咼于明，王磊.1～3周齡雌性肉仔雞精氨酸需要量[J].動物營養(yǎng)學(xué)報，2011，2（4）：571 ～ 577.

[4]麻名文，李福昌.日糧精氨酸水平對斷奶～2月齡肉兔生長性能、免疫器官指數(shù)及血清指標(biāo)的影響[J].動物營養(yǎng)學(xué)報，2009，21（3）：405 ～ 410.

[5]麻名文，李福昌.日糧精氨酸水平對2～3月齡肉兔生長性能、免疫、血液生化指標(biāo)及激素水平的影響[J].中國獸醫(yī)學(xué)報，2010，30（11）：1533 ～ 1536.

[6]喬世峰，孫家邦，李非，等.重癥胰腺炎大鼠腸道免疫功能改變及精氨酸調(diào)節(jié)作用[J].中國醫(yī)學(xué)雜志，2005，8：761 ～ 763.

[7]閆偉，施壽榮，王志躍，等.L-精氨酸對免疫應(yīng)激揚(yáng)州鵝生長發(fā)育的影響[J].營養(yǎng)飼料，2010，46（11）：42 ～ 45.

[8]楊平.飼糧添加L-精氨酸或N-氨甲酰谷氨酸對感染PRRSV妊娠母豬繁殖性能及免疫功能的影響：[碩士學(xué)位論文][D].雅安：四川農(nóng)業(yè)大學(xué)，2011.

[9]廖明，丘鶴英.家禽免疫學(xué)基礎(chǔ)知識[J].中國獸醫(yī)雜志，1996，22（2）：55 ～ 56.

[10]岑瑛，羅旭松，任林森，等.精氨酸對大鼠深Ⅱ度燒傷的治療作用[J].華西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報，1999，30（2）：198 ～ 201.

[11]Wu G，Knabe D A.Arginine synthesis in enterocytes of neonatal pigs[J].AM J Physiol，1995，269：621 ～ 629.

[12]Wu G.Synthesis of citrulline and arginine from proline in enterocytes of postnatal pigs[J].Am J Physiol，1997，272：1382 ～ 1390.