川明參中重金屬測定

徐 琴， 李 彬， 楊 軍， 張 美， 陳 幸*

(1.四川省中醫(yī)藥科學(xué)院藥學(xué)研究所，四川成都 610041;2.瀘州醫(yī)學(xué)院，四川瀘州 646000)

川明參別名明參、明沙參、土明參、沙參，為傘形科Umbelliferae植物川明參Chuanminshen violaceumSheh et Shan的干燥根，是我國特有單種屬植物，乃四川道地藥材［1-2］。川明參具有潤肺化痰、和胃、生津、解毒等功效，主治肺熱咳嗽、熱病傷陰，為滋陰藥材［3-4］。適用于病后補虛和強壯身體，為一藥食同源植物［5］。近年來，川明參的研究主要集中在化學(xué)成分、藥理作用等方面，對其重金屬含有量研究較少。而重金屬超標(biāo)是中藥不良反應(yīng)中最突出的問題之一，已嚴重影響到中藥的聲譽及出口［6］。因此，考察川明參中重金屬的量，可為川明參生產(chǎn)中的質(zhì)量控制提供科學(xué)依據(jù)，也可充分地開發(fā)利用四川寶貴的中藥資源，提高川明參出口能力，促進地區(qū)經(jīng)濟發(fā)展［7］。據(jù)此，本實驗通過原子吸收法對青白江、巴中、閬中、金堂等主要產(chǎn)地的22個川明參樣品分析檢測其含重金屬量，并進行方法評價，以確保川明參的質(zhì)量，為人們的食用安全提供科學(xué)依據(jù)。

1 實驗材料

1.1 主要儀器 日立Z—2000原子吸收分光光度計;SKML-1.5-4數(shù)顯型電熱板 (北京中興偉業(yè)儀器有限公司);JA2003N型電子天平 (上海精密科學(xué)儀器有限公司);高腳燒杯等玻璃儀器用15%硝酸浸泡24 h以上用純水沖洗陰干備用。

1.2 主要試劑 銅Cu單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液 (1 000 μg/mL，批號10060732)，鉛Pb單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液(1 000 μg/mL，國家標(biāo)準(zhǔn)溶液，批號10050642)，鎘 Cd單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液 (1 000 μg/mL，批號GBW08612 7061);硝酸，高氯酸均為優(yōu)級純;其余試劑為分析純;試驗用水均為樂百氏純凈水。

1.3 供試藥材 目前川產(chǎn)道地藥材川明參以青白江、金堂、巴中、閬中、蒼溪等幾個地方為主要產(chǎn)地，本實驗的22個川明參藥材均產(chǎn)于以上產(chǎn)地，且每個產(chǎn)地均有制過和未制過兩種樣品。生藥川明參經(jīng)過洗凈，晾干即為未制過川明參，其顏色大多為黃棕色;生藥經(jīng)過修制、水制、火制、水火共制、其他制法等為制過藥材，川明參洗凈，晾干后再用硫磺熏蒸，即為制過川明參，其顏色多為黃白色。川明參藥材由四川省中醫(yī)藥科學(xué)院中藥資源與種植研究所張美助理研究員、方青茂教授采集鑒定，標(biāo)本保留在中藥資源與種植研究所。

2 實驗方法

參照文獻［8-10］，本實驗采用石墨爐原子吸收分光光度法測定鉛與鎘，采用火焰原子吸收測定銅。

2.1 供試品溶液的制備 先將藥材挑選去雜，不銹鋼粉碎機粉碎，過60目尼龍篩，制成藥材粉末，備用。取供試品粉末1 g，精密稱定，置于高腳燒杯中，加硝酸-高氯酸 (4∶1，V/V)混合溶液10 mL，混勻，瓶口加蓋表面皿，浸泡過夜。置電熱板上加熱消解，保持微沸，若變棕黑色，再加硝酸-高氯酸 (4∶1，V/V)混合溶液適量，持續(xù)加熱至溶液澄明后，揭蓋除酸，加熱至冒濃煙，并分4次加入20 mL水，直至白煙散盡，消解液呈無色透明或略帶黃色，放冷，轉(zhuǎn)入50 mL量瓶中，用2%硝酸溶液洗滌容器，洗液合并于量瓶中，加入相應(yīng)濃度的對應(yīng)掩蔽劑，并稀釋至刻度，搖勻，靜置，待測。同法同時制備試劑空白溶液。

2.2 重金屬元素標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制 分別移取銅(10 μg/mL)、鎘 (1 μg/mL)、鉛 (1 μg/mL)的貯備液 (Cu 0，1，2，4，6，8 mL;Cd 0，0.1，0.2，0.4，0.6，0.8 mL;Pb 0，1，2，3，4，6，8 mL)置于100 mL量瓶中，并用2%的稀硝酸定容，配成適當(dāng)質(zhì)量濃度的標(biāo)準(zhǔn)系列溶液。其中，銅標(biāo)準(zhǔn)系列質(zhì)量濃度為 0、0.1、0.2、0.4、0.6、0.8 μg/mL，鉛為 0、10.0、20.0、40.0、60.0、80.0 ng/mL，鎘為 0、1.0、2.0、4.0、6.0、8.0 ng/mL。

2.3 儀器工作參數(shù) 該試驗中，不同重金屬元素測定時的儀器最佳工作參數(shù)見表1、表2。

表1 儀器工作參數(shù) (石墨爐原子吸收法)Tab.1 Optimal working parameters of the apparatus(graphite furnace atomic absorption spectrometry)

表2 儀器工作參數(shù) (火焰原子吸收法)Tab.2 Optimal working parameters of the apparatus(flame atomic absorption spectrometry)

2.4 方法學(xué)考察

2.4.1 線性關(guān)系考察 吸取Cu、Pb、Cd標(biāo)準(zhǔn)系列溶液適量，加入適量相應(yīng)的掩蔽劑，分別按2.3項的工作條件測定吸光度值，以標(biāo)準(zhǔn)系列質(zhì)量濃度(x)為橫坐標(biāo)，測得的吸光度值 (y)為縱坐標(biāo)，建立線性回歸方程。由表3可知，3種元素的相關(guān)系數(shù)0.997＜r≤1.000 0，說明鉛質(zhì)量濃度在0～80 ng/mL、鎘質(zhì)量濃度在0～8 ng/mL，銅質(zhì)量濃度在0.0～0.8 μg/mL范圍內(nèi)，與吸光度值呈良好的線性關(guān)系。

表3 重金屬元素檢測方程Tab.3 Equation for heavy metals detection

2.4.2 精密度試驗 取3種元素適當(dāng)濃度的對照品各一份，分別重復(fù)進樣6次，測定吸光度值，計算相對標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD。測得對照品Cu、Pb、Cd吸光度值的RSD分別為0.46%、1.80%、2.33%，均符合石墨原子吸收分光光度法允許的誤差，表明該儀器的精密度良好。

2.4.3 重復(fù)性試驗 稱取同一編號藥材6份，按2.1項的方法制備供試品并測定吸光度值，重復(fù)6次，計算RSD［8］。測得川明參藥材中Cu、Pb、Cd的RSD分別為2.04%、3.96%、2.43%，考慮到稱樣量和檢測方法的限制，其均符合石墨原子吸收分光光度法允許的誤差，表明該方法的重復(fù)性良好。

2.4.4 加樣回收率試驗 取已測定含有量的20號樣品8份，精密稱取1 g，分別加入銅，鉛，鎘的對照品適量，使其為樣品中被測組分的0.8～1.2倍，按2.1項方法制備供試品溶液，測定吸光度值，計算回收率和RSD。川明參樣品中 Cu、Pb、Cd的回收率分別為 103.11%、92.10%、103.27%;RSD分別為6.01%、6.98%、5.96%。考慮到稱樣量和檢測方法的限制，試驗結(jié)果均符合石墨原子吸收分光光度法允許的回收率和誤差，表明該方法準(zhǔn)確度高，且可靠。

2.5 樣品測定 按照2010年版《中國藥典》配制各元素成梯度的標(biāo)準(zhǔn)溶液。據(jù)2.3項方法檢測樣品中重金屬元素銅、鉛、鎘的吸光度及質(zhì)量分數(shù)，按m=(C樣品－C空白) ×50/M樣品計算，即得重金屬量。

3 結(jié)果與分析

由表4、5可知，不同產(chǎn)地的川明參藥材Cu、Pb、Cd的量均符合國家GAP藥用植物標(biāo)準(zhǔn) (Cu≤20.0 μg/g，Pb≤5.0 μg/g，Cd≤0.3 μg/g)。

表4 川明參樣品中重金屬測定結(jié)果Tab.4 Determination results of heavy metals content inChuanminshen violaceum samples

表5 川明參樣品中重金屬測定結(jié)果分析Tab.5 Results analysis in the determination of heavy metals in Chuanminshen violaceum samples

4 結(jié)論與討論

研究結(jié)果表明不同產(chǎn)地的川明參藥材重金屬含有量差異較大，據(jù)近年來對藥材中重金屬的研究報道，其含有量差異大可能受到土壤，栽培方法，和環(huán)境等多個因素的影響［11］。同一產(chǎn)地的藥材制過的比未制過的重金屬量少。

由于重金屬為微量元素，試驗中應(yīng)避免污染，注意稱量與操作的準(zhǔn)確以及儀器的正確使用。用過的容器用水洗后，需要超聲，水洗，用15%硝酸浸泡24 h，再用純水沖洗5遍，陰干。在樣品處理過程中應(yīng)注意:(1)樣品粉末＜60目;(2)消解適宜溫度為200～220℃之間;(3)除酸時應(yīng)盡量把高氯酸除盡，液體不宜過干，可以加適當(dāng)?shù)募兯喑欢螘r間，避免測定時酸度過高損壞石墨管，導(dǎo)致測定結(jié)果錯誤或產(chǎn)生較大的誤差。

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