針刺對(duì)肥胖大鼠胰島素抵抗?fàn)顟B(tài)的干預(yù)作用

老錦雄 鄧 聰

(佛山市中醫(yī)院針灸科，廣東 佛山 528000)

肥胖的發(fā)生，除與不良生活習(xí)慣和遺傳因素有關(guān)外，胰島素抵抗是導(dǎo)致肥胖的最主要原因〔1〕。針灸治療雖顯示出良好的減肥及糾正IR的臨床效果，但是防治肥胖、糾正IR的機(jī)制尚不十分明確。本文通過(guò)針刺對(duì)肥胖模型大鼠進(jìn)行治療性干預(yù)，同時(shí)動(dòng)態(tài)觀察胰島素抵抗相關(guān)指標(biāo)的變化，闡明針刺治療肥胖的作用機(jī)制，探討其糾正胰島素抵抗的機(jī)制，為針灸治療肥胖提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 動(dòng)物與飼料 選用健康SD大鼠60只，雌雄各半，SPF級(jí)，體重200～250 g，廣州中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用許可證號(hào):syxk(粵)2008-0001。動(dòng)物合格證號(hào):0099165。高脂飼料的配置:基礎(chǔ)飼料50%，豬油23%，蔗糖15%，雞蛋黃12%，廣州市花都區(qū)花東信華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物養(yǎng)殖場(chǎng)提供。

1.2 分組與造模 在室內(nèi)適應(yīng)性喂養(yǎng)1 w后，隨即數(shù)字表法選取10只，雌雄各半，用普通飼料喂養(yǎng)，作為空白組(CG);另外50只，雌雄各半，用高脂飼料喂養(yǎng)，喂養(yǎng)60 d，制作單純性肥胖大鼠模型。大鼠的體重超過(guò)同期普通飼料喂養(yǎng)大鼠體重的20%作為單純性肥胖癥實(shí)驗(yàn)肥胖大鼠。

將造模成功的肥胖大鼠隨機(jī)分為模型組(MG)、穴位組(AG)、非穴位組(NG)，每組10只，雌雄各半。

穴位組:將大鼠捆綁于自制的固定器中，取中脘、足三里(雙側(cè))、三陰交(雙側(cè))穴位〔2〕，用0.25 mm ×13 mm 毫針刺約2 mm、7 mm、4 mm，平補(bǔ)平瀉后，同側(cè)穴位接通G6805-1A型低頻電子脈沖治療儀，采用疏密波，采用頻率5～10 Hz，強(qiáng)度以針柄震動(dòng)引起穴位局部輕輕抽動(dòng)為度，留針20 min，每日1次，連續(xù)進(jìn)行1個(gè)月。

非穴位組:選取大鼠以上穴位旁開(kāi)0.5 cm處的非經(jīng)非穴點(diǎn)針刺，余加電、強(qiáng)度、時(shí)間等均同穴位組。

空白組、模型組:用同樣方式每日將大鼠捆綁于自制的固定器中，捆綁時(shí)間同針刺組，以排除應(yīng)激因素引起的實(shí)驗(yàn)偏倚，其余不作處理。

實(shí)驗(yàn)期間，每天觀察各組大鼠攝食、飲水情況及活動(dòng)狀態(tài)。每周測(cè)量各組大鼠的體質(zhì)量、體長(zhǎng)，并據(jù)此計(jì)算Lee's指數(shù)〔Lee's指數(shù)=體重(g)1/3×103/體長(zhǎng)(cm)〕，Lee's指數(shù)的大小反映大鼠體脂的含量。

1.3 標(biāo)本采集及檢測(cè) 造模成功后，取正常飼料組與高脂飼料組大鼠眼眶采血;實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，各組大鼠禁食12 h過(guò)夜，次日各組大鼠經(jīng)10%水合氯醛麻醉〔(0.3～0.4)ml/100 g〕后，摘除眼球取血，收集血液樣本，分離血清，以3 500 r/min轉(zhuǎn)速離心后取上清液，密封于-4℃冰箱內(nèi)，備用。

血清用于檢測(cè)INS、FBG、C肽值等指標(biāo)。血清空腹葡萄糖測(cè)定采用葡萄糖氧化酶法，胰島素測(cè)定采用ELISA法，操作嚴(yán)格按照試劑盒步驟進(jìn)行。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS17.0軟件進(jìn)行分析。計(jì)量資料以x±s表示。多個(gè)樣本均數(shù)比較采用方差分析，多個(gè)樣本均數(shù)間兩兩比較采用q檢驗(yàn)。兩變量相關(guān)性采用Pearson相關(guān)分析。

2 結(jié)果

2.1 各組大鼠的一般情況 實(shí)驗(yàn)前8 w，飼養(yǎng)高脂飼料組大鼠體質(zhì)量增加迅速，活動(dòng)稍減少，毛色白中帶油亮，較普通飼料組大鼠的粗糙，糞便較普通飼料組的黏、味臭。實(shí)驗(yàn)第9、10周，模型組大鼠活動(dòng)明顯減少，體型肥胖。第11、12周穴位組、非穴位組大鼠體質(zhì)量增加減慢，尤以穴位組大鼠較明顯。

2.2 各組大鼠體質(zhì)量、體長(zhǎng)、與Lee's指數(shù) 各組大鼠的體質(zhì)量、體長(zhǎng)與Lee's指數(shù)隨著周齡增長(zhǎng)而增加。第8周末，MG、AG、NG組的體質(zhì)量與Lee's指數(shù)均較同周齡的CG組大鼠明顯增高(P＜0.05)，表明造模成功;而MG、AG、NG組之間體質(zhì)量與Lee's指數(shù)比較，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。見(jiàn)表1。

在第9周，穴位組、非穴位組大鼠的體質(zhì)量與Lee's指數(shù)增長(zhǎng)的幅度隨著周齡增長(zhǎng)而減少，而空白組無(wú)明顯變化，模型組則繼續(xù)增長(zhǎng)。第12周末，即治療結(jié)束后，穴位組與模型組比較明顯下降(P＜0.01)，但非穴位組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。見(jiàn)表2。

2.3 各組大鼠的FBG、INS、ISI比較 針刺前，非穴位組、穴位組與模型組大鼠的FBG、INS均較空白組升高(P＜0.05)，ISI降低(P＜0.05);而非穴位組、穴位組與模型組之間則無(wú)差異(P＞0.05)。見(jiàn)表3。

表1 第8周末各組大鼠體質(zhì)量、體長(zhǎng)與Lee's指數(shù)比較(x±s)

與空白組相比:1)P＜0.05，2)P＜0.01;與模型組相比:3)P＜0.01，4)P＜0.05;與非穴位組相比:5)P＜0.05，6)P＜0.01

表3 第8周末各組大鼠FBG、INS與ISI的比較(x±s)

表4 針刺后各組大鼠FBG、INS與ISI的比較(x±s)

實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，模型組的FBG、INS均較空白組顯著升高(P＜0.01)，ISI顯著降低(P＜0.01);穴位組、非穴位組大鼠的FBG、INS較模型組有不同程度的降低(P＜0.01，P＜0.05)，ISI升高(P＜0.05);穴位組較非穴位組FBG降低(P＜0.01)，INS降低，ISI增高(P＜0.05);穴位組各指標(biāo)與空白組比較，差異均無(wú)顯著性意義(P＞0.05)。針刺后模型組的C肽〔(315.53±19.73)mmol/L〕較空白組〔(280.11±11.20)mmol/L〕高(P ＜0.01)，穴位組 〔(289.84 ±18.66)mmol/L〕較非穴位組〔(295.31±19.29)mmol/L〕及模型組低(P ＜0.05，P ＜0.01)。

3 討論

肥胖，根據(jù)中醫(yī)基礎(chǔ)理論，其病機(jī)在于脾虛為本，痰濕為標(biāo)，治療應(yīng)以健脾利濕化痰為主〔3〕?！端貑?wèn)·調(diào)經(jīng)論》日:“形有余則腹脹，涇溲不利;不足則四肢不用……形有余則瀉其陽(yáng)經(jīng)，不足則補(bǔ)其陽(yáng)絡(luò)?！逼⒅骷∪?，形有余則肥胖，脾與胃相表里，瀉其陽(yáng)經(jīng)即瀉陽(yáng)明胃經(jīng)，說(shuō)明治療肥胖病，應(yīng)以瀉陽(yáng)明經(jīng)為主，這為針灸減肥取脾胃經(jīng)穴位以瀉胃健脾奠定了理論基礎(chǔ)。本實(shí)驗(yàn)選擇中脘、足三里(后三里)、三陰交。脾為足太陰經(jīng)，胃為足陽(yáng)明經(jīng)，二者同居中焦，承上啟下，互為表里，脾主升清，胃主通降，系全身氣機(jī)升降之樞;樞機(jī)通暢，則三焦條暢，樞機(jī)不利，則上下不寧。加上任脈理中焦，調(diào)升降。中脘、足三里健脾化濕，三陰交能調(diào)節(jié)三陰，健脾和胃，養(yǎng)肝益腎;如此配合運(yùn)用具有健脾利濕，豁痰降濁之功，使脾胃功能健運(yùn)，飲食水谷得以輸布暢達(dá)，則身輕體健;相輔相成，相得益彰。

胰島素抵抗是指胰島素在促進(jìn)葡萄糖攝取方面功能受損，導(dǎo)致一定量的胰島素產(chǎn)生的生物學(xué)效應(yīng)低于預(yù)計(jì)正常水平。它不僅與肥胖、高血壓、糖尿病以及心腦血管疾病、脂質(zhì)代謝異常等病的發(fā)生密切相關(guān)，而且還存在于妊娠、腫瘤、感染等多種生理或病理中。針刺可以改善胰島素抵抗，是眾多學(xué)者在研究針刺治療非胰島素依賴型糖尿病、肥胖、高血壓等疾病的過(guò)程中發(fā)現(xiàn)的。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)針刺可以逆轉(zhuǎn)胰島素抵抗模型大鼠的高血糖、高胰島素血癥，提高胰島素敏感性指數(shù)。而本文觀察的C肽是一個(gè)頗具臨床意義的重要指標(biāo)，C肽是含31個(gè)氨基酸的多肽，它和胰島素是胰島β細(xì)胞以1∶1等分子分泌后進(jìn)入門靜脈血，經(jīng)過(guò)肝臟時(shí)，C肽幾乎不被攝取(＜5% ～10%)，而胰島素大部分被肝臟所攝取，外周血中的胰島素只代表肝臟釋出的胰島素量，所以測(cè)定外周血中的C肽可大體反映β細(xì)胞的分泌量〔4〕。臨床上2型糖尿病早期表現(xiàn)為胰島素抵抗，以高胰島素血癥為主，C肽也有所上升，而進(jìn)一步發(fā)展至胰島β細(xì)胞功能衰竭時(shí)，胰島素和C肽均下降〔5〕。本文結(jié)果提示針刺可顯著降低胰島素抵抗?fàn)顟B(tài)肥胖模型大鼠的血清C肽值，這可能與針刺具有良好的調(diào)節(jié)內(nèi)分泌的作用有關(guān)。

1 曲 伸.2型糖尿病現(xiàn)代治療進(jìn)展〔J〕.上海醫(yī)學(xué)，2010;33(8):731-6.

2 李忠仁.實(shí)驗(yàn)針灸學(xué)〔M〕.北京:中國(guó)中醫(yī)藥出版社，2008:255-6.

3 孟云鳳，周美啟.肥胖病針灸從脾論治〔J〕.針灸臨床雜志，2003;19(7):35.

4 王國(guó)洪，許瑞吉，張中書，等.血清C肽濃度測(cè)定臨床意義探討〔J〕.放射免疫學(xué)雜志，2006;19(1):15-7.

5 葛 軍，俞春芳，孫衛(wèi)東，等.不同空腹血糖狀態(tài)人群的C肽值意義〔J〕.上海醫(yī)藥，2005;28(6):472-4.