中藥促黑素合成及其機(jī)理的研究進(jìn)展

徐漫遠(yuǎn),閔仲生,沈斐斐

(1.南京中醫(yī)藥大學(xué)第一臨床醫(yī)學(xué)院,江蘇南京210029;2.江蘇省中醫(yī)院,江蘇南京210029)

白癜風(fēng)是一種有遺傳性、與自身免疫性疾病相關(guān)的常見皮膚病。近年來中醫(yī)藥在治療白癜風(fēng)上顯示出良好的前景,綜述如下。

1 白癜風(fēng)的發(fā)病機(jī)制

1.1 西醫(yī)病機(jī) 1)遺傳學(xué)說[1];2)免疫損傷[2];3)氧化應(yīng)激機(jī)制[3];4)神經(jīng)體液學(xué)說:精神緊張誘導(dǎo)神經(jīng)遞質(zhì)兒茶酚胺類物質(zhì)釋放增多,而酪氨酸和多巴均是黑素和神經(jīng)遞質(zhì)的前體,二者可發(fā)生競(jìng)爭(zhēng)抑制;5)近年來還提出了黑素細(xì)胞經(jīng)皮丟失學(xué)說[4]。有缺陷的黑色細(xì)胞在各種內(nèi)外環(huán)境因素的作用下,出現(xiàn)功能性黑素細(xì)胞的損害,繼而被免疫清除[5]。

1.2 中醫(yī)病機(jī) 白癜風(fēng)病因病機(jī)是由于肝腎不足,致精血不能榮養(yǎng)肌膚,外邪易客于肌膚;肝氣郁結(jié),氣機(jī)不暢,血脈瘀阻,導(dǎo)致血不滋養(yǎng)肌膚[6]。

2 酪氨酸酶家族成員、MITF與黑素合成的關(guān)系

2.1 酪氨酸酶家族成員 酪氨酸酶家族成員是黑素合成的主要限速酶。黑素合成的速率與酪氨酸酶的量和活性直接相關(guān)。酪氨酸酶相關(guān)蛋白-1和2(TRP-1/2)與酪氨酸酶在結(jié)構(gòu)上相似,三者組成復(fù)合體在黑素合成中發(fā)揮作用。研究發(fā)現(xiàn),白癜風(fēng)患者皮損處TRP-1表達(dá)減少,在非皮損處表達(dá)增多,可與干擾素-γ(IFN-γ)誘導(dǎo)表達(dá)的GILT發(fā)生抗原抗體反應(yīng)。Jacobs等[7]實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),抗黑素瘤疫苗誘導(dǎo)的T細(xì)胞可識(shí)別白癜風(fēng)皮損處的 TYR抗原,繼發(fā)出現(xiàn)白癜風(fēng)。TRP-2是多巴色素互變異構(gòu)酶,白癜風(fēng)患者的血清中有較高滴度的抗TRP-2抗體。

2.2 小眼相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子(MITF) 研究發(fā)現(xiàn),MITF可提高黑素細(xì)胞的存活率,并促進(jìn)其發(fā)育成熟。MITF作用于TYR和TRP-l,通過與酪氨酸酶家族啟動(dòng)子中的特殊部位結(jié)合(如M-Box),刺激啟動(dòng)子的轉(zhuǎn)錄活性,進(jìn)而調(diào)控黑素生成[8]。Rab27是黑素小體傳輸中重要蛋白之一,Pmel17對(duì)于黑素小體基質(zhì)的形成亦是必需的。MITF是Rab27和Pmel17的關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子[8-9]。因此,MITF在黑素合成、黑素小體的生成和傳輸?shù)亩鄠€(gè)黑素生成環(huán)節(jié)可能有重要的作用。

3 中藥促黑色合成及其機(jī)制的研究概況

3.1 促進(jìn)黑色細(xì)胞增殖 涂彩霞等[10]研究發(fā)現(xiàn),沙苑子、苦參、甘草、黃芩、山慈姑、黑芝麻、薄荷、夏枯草、墨早蓮的乙醇提取物可明顯促進(jìn)黑素瘤細(xì)胞增殖。姚莉等[11]發(fā)現(xiàn),驅(qū)蟲斑鳩菊的3個(gè)不同部位提取物(母液、乙酸乙酯提取物及萃取后物質(zhì))均對(duì)B16黑素瘤細(xì)胞有一定的增殖作用。唐曉琴等[12]研究認(rèn)為,補(bǔ)骨脂含藥血清可促進(jìn)A375黑素瘤細(xì)胞增殖。

3.2 對(duì)酪氨酸酶活性和黑素含量的作用 涂彩霞等[10]研究提示,甘草、薄荷、苦參、山慈菇、黑芝麻、夏枯草、墨旱蓮、何首烏乙醇提取物可明顯增加黑色素的含量,山慈姑、苦參、薄荷、黑芝麻、夏枯草、墨旱蓮的乙醇提取物可明顯增加酪氨酸活性。張迪敏等[13]發(fā)現(xiàn),女貞子單體酪醇和齊墩果酸可增強(qiáng)酪氨酸酶活性。李劍等[14]研究芪白合劑對(duì)黑素細(xì)胞的影響,結(jié)果發(fā)現(xiàn)較滅活組,未滅活組含藥血清可以上調(diào)酪氨酸酶活性及增加黑素合成。解士海等[15]的研究結(jié)果認(rèn)為,紫草素對(duì)于培養(yǎng)的人黑素瘤細(xì)胞酪氨酸酶活性及黑素生成有較強(qiáng)的劑量相關(guān)性。姚莉等[11]研究結(jié)果認(rèn)為,驅(qū)蟲斑鳩菊的母液和萃取后物質(zhì)對(duì)酪氨酸酶均有不同程度的激活作用并可促進(jìn)黑素合成,萃取后提取物有濃度依賴性。楊柳等[16]實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),刺蒺藜對(duì)黑素細(xì)胞增殖及黑素含量的影響與劑量相關(guān),有低濃度抑制、高濃度激活的雙向調(diào)節(jié)作用。

3.3 對(duì)TYR及MITF等的活性表達(dá)作用 王輝等[17]研究發(fā)現(xiàn),中藥滋補(bǔ)肝腎方能上調(diào)B16黑素細(xì)胞酪氨酸酶mRNA表達(dá)。張迪敏[13]發(fā)現(xiàn),女貞子單體酪醇和齊墩果酸可以上調(diào)TYR和TRP-1 mRNA的表達(dá),以增強(qiáng)正常人黑素細(xì)胞的黑素合成和酪氨酸酶活性。涂彩霞等[18]研究發(fā)現(xiàn),山慈姑、苦參、黑芝麻和墨旱蓮的乙醇提取物顯著上調(diào)細(xì)胞酪氨酸酶mRNA的表達(dá);苦參對(duì)TRP-2 mRNA有明顯上調(diào)作用。楊慧蘭等[19]研究發(fā)現(xiàn),復(fù)方中藥白癜沖劑有上調(diào)黑色素細(xì)胞酪氨酸酶與MITFmRNA表達(dá)水平作用。梅寒芳等[20]研究發(fā)現(xiàn),蟛蜞菊乙醇提取物可通過增強(qiáng)酪氨酸酶和MITF的基因表達(dá),促進(jìn)B16細(xì)胞黑色素生成。

3.4 其它 李永偉等[21]研究發(fā)現(xiàn),加味桃紅四物湯治療白癜風(fēng)的作用機(jī)制可能是提高酪氨酸激酶受體蛋白含量。張雷等[22]研究結(jié)果認(rèn)為,滋補(bǔ)肝腎方可能通過提高黑素細(xì)胞cAMP的水平,以促進(jìn)B16細(xì)胞合成黑素的功能。

4 討論

中醫(yī)藥治療白癜風(fēng)療效肯定。臨床以疏肝解郁、活血祛風(fēng)為主要治則。治療時(shí)依據(jù)辨證兼用滋肝補(bǔ)腎、調(diào)節(jié)免疫的藥物,同時(shí)可酌情加入富含呋喃香豆素類物質(zhì)的藥物,如:白芷、獨(dú)活、補(bǔ)骨脂、北沙參、防風(fēng)等。近來大量實(shí)驗(yàn)以體外培養(yǎng)的黑素瘤細(xì)胞為模型,采用MTT比色法、左旋多巴氧化法及NaOH裂解法,評(píng)價(jià)藥物對(duì)黑色合成的效用;同時(shí)采用Western Blot、PCR等實(shí)驗(yàn)方法了解復(fù)方中藥及中藥單體可能的作用通路,以闡明中藥治療白癜風(fēng)的機(jī)制。

[1]Spritz R A.Recent progress in the genetics of generalized vitiligo[J].J Genet Genomics,2011,38(7):271-278.

[2]Le Poole I C,Luiten R M.Autoimmune etiology of generalized vitiligo[J].Curr Dir Autoimmun,2008(10):227-243.

[3]Glassman SJ.Vitiligo,reactive oxygen species and Tcells[J].Clin Sci(Lond),2011,120(3):99-120.

[4]Kumar R,Parsad D,Kanwar AJ.Role of apoptosis andmelanocytorrhagy:a comparative study of melanocyte adhesion in stable and unstable vitiligo[J].Br J Dermatol,2011,164(1):187-191.

[5]周暉,韓建德,曹光玲,等.白癜風(fēng)發(fā)病機(jī)制研究進(jìn)展[J].皮膚性病診療學(xué)雜志,2012,19(2):112.

[6]李曉睿,李詠梅.活血補(bǔ)腎合劑聯(lián)合NB-UVB治療白癜風(fēng)臨床觀察[J].長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào),2011,27(1):119.

[7]Jacobs JF,Aarntzen EH,Sibelt LA,et al.Vaccine-specific local T cell reactivity in immunotherapy-saaociated vitiligo in melanoma patients[J].Cancer Immunol Immunother,2009,58(2):145-151.

[8]Goding CR.Mitf from neural crest to melanoma signal transduction andtranscription in the melanocyte lineage[J].Genes,2000,14(14):1712-1728.

[9]Du J,Miller AJ,Widlund HR,et al.MLANA/MART1 and SILV/PMEL17/GP10are transcriptionally regulated by MITF in melanoeytes andmelanoma[J].Am J Pathol,2003,163(1):333-343.

[10]涂彩霞,張榮鑫,劉亞玲,等.18味中藥乙醇提取物對(duì)小鼠B16黑素瘤細(xì)胞增殖及黑色生成的影響[J].中華皮膚科雜志,2006,39(7):400.

[11]姚莉,李茜,尚靖.驅(qū)蟲斑鳩菊不同提取部位對(duì)小鼠B16細(xì)胞黑素合成及酪氨酸酶活性的影響[J].新疆醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào),2010,33(10):1191.

[12]唐曉琴,閆明,高莉,等.補(bǔ)骨脂對(duì)A375人黑素瘤細(xì)胞增殖及黑素合成的影響[J].中國(guó)中醫(yī)藥信息雜志,2010,17(3):41.

[13]張迪敏,李永偉,尉曉冬,等.女貞子對(duì)培養(yǎng)的黑素細(xì)胞酪氨酸酶活性和黑素合成的影響[J].中華皮膚科雜志,2006,39(4):197.

[14]李劍,傅雯雯,付文煥,等.芪白合劑對(duì)黑素細(xì)胞作用的研究[J].中國(guó)麻風(fēng)皮膚病雜志,2007,23(7):554.

[15]解士海,黃榮云,趙衛(wèi)華等.紫草素對(duì)人黑素瘤細(xì)胞增殖及黑素合成的影響[J].臨床合理用藥,2010,9(3):10.

[16]楊柳,謝家寶,洪遜強(qiáng),等.刺蒺藜血清對(duì)小鼠 B16黑素瘤細(xì)胞增殖及黑素合成的影響[J].中國(guó)美容醫(yī)學(xué),2011,20(1):63.

[17]王輝,王莒生,王萍,等.中藥滋補(bǔ)肝腎方對(duì)鼠B16黑素瘤細(xì)胞酪氨酸酶mRNA表達(dá)的調(diào)節(jié)[J].中國(guó)皮膚性病學(xué)雜志,2003,17(4):230.

[18]涂彩霞,張榮鑫,馬景昕,等.6味中藥乙醇提取物對(duì)B16黑素瘤細(xì)胞酪氨酸酶及其相關(guān)蛋白-1、-2 mR NA表達(dá)的影響[J].中華皮膚科雜志,2007,40(2):104.

[19]楊慧蘭,陳波,梁潔.復(fù)方中藥對(duì)小鼠B16黑素瘤細(xì)胞酪氨酸酶與MITF mRNA表達(dá)的調(diào)節(jié)[J].中國(guó)美容醫(yī)學(xué),2009,18(10):1477.

[20]梅寒芳,林密,朱家勇.蟛蜞菊乙醇提取物促進(jìn)黑色素生成及其機(jī)理的初步研究[J].廣東藥學(xué)院學(xué)報(bào),2012,28(2):188.

[21]李永偉,許愛娥,Ruth Halaban.加味桃紅四物湯對(duì)黑素細(xì)胞酪氨酸酶和酪氨酸激酶受體基因蛋白表達(dá)的影響[J].中華皮膚科雜志,2004,37(12):727.

[22]張蕾,趙京霞,李萍,等.滋補(bǔ)肝腎方含藥血清對(duì) B16黑素細(xì)胞活性黑素含量及cAMP水平的影響[J].遼寧中醫(yī)雜志,2009,36(3):1467.