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    犢牦牛腐敗梭菌病診斷

    2013-08-15 00:47:43張西云李生慶胡國(guó)元
    四川畜牧獸醫(yī) 2013年2期
    關(guān)鍵詞:雙球菌小白鼠梭菌

    張西云,李生慶,胡國(guó)元

    (青海省畜牧獸醫(yī)科學(xué)院獸醫(yī)研究所,青海 西寧 810006)

    1 發(fā)病情況

    本病呈散發(fā)?;寂I(yíng)養(yǎng)不良,30多頭牛中有18頭出現(xiàn)咳嗽癥狀,6頭出現(xiàn)腹瀉癥狀?;寂?人猿跗?,用青、鏈霉素治療,6頭好轉(zhuǎn),另12頭仍有咳嗽癥狀,并死亡2頭。

    2 癥狀及剖檢變化

    病牛精神萎頓,食欲不振,咳嗽,體溫達(dá)40~41℃。剖檢見(jiàn)咽喉部和氣管周?chē)械S色的水腫液,氣管黏膜充血,心包內(nèi)有滲出液,肺氣腫,大面積瘀血,小葉邊緣呈黑色,表面呈灰白色或白色,部分組織充血,肺門(mén)淋巴結(jié)形態(tài)、色澤、質(zhì)地?zé)o變化,其他器官無(wú)眼觀變化。

    3 實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)

    3.1 臟器觸片 無(wú)菌取病死牛肝、脾、肺觸片,瑞特氏染色,鏡檢,結(jié)果見(jiàn)粗大桿菌和雙球菌。

    3.2 臟器培養(yǎng) 無(wú)菌取病死牛肝、脾、肺接種于鮮血斜面和厭氣肝湯中,37℃培養(yǎng)24h,結(jié)果鮮血斜面和厭氣肝湯培養(yǎng)基中均有細(xì)菌生長(zhǎng)。對(duì)培養(yǎng)物進(jìn)行抹片,沙黃染色,鏡檢,結(jié)果見(jiàn)鮮血斜面培養(yǎng)物以雙球菌為主,厭氣肝湯培養(yǎng)物以大桿菌為主。鮮血斜面培養(yǎng)物經(jīng)劃平板接種得到雙球菌,厭氣肝湯培養(yǎng)物經(jīng)加熱得到梭狀芽孢桿菌。

    3.3 動(dòng)物接種 無(wú)菌取病死牛肺臟剪碎、研磨,按1∶5加入無(wú)菌生理鹽水混勻后靜置,取靜置后的上清液,以0.2 mL/只的量,皮下注射于2只小白鼠,結(jié)果,2只小白鼠分別于注后15h、17h死亡。剖檢小鼠,其皮下充血,有膠凍樣滲出,腹腔滲出物較多,消化道漿膜充血,肝、脾、腎腫脹,心、肺無(wú)眼觀變化。肝被膜觸片,染色,鏡檢,見(jiàn)長(zhǎng)絲狀、短鏈狀或單個(gè)存在的大桿菌。接種小白鼠肝臟于厭氣肝湯后鏡檢,見(jiàn)與病死牛臟器鏡檢相同的結(jié)果,厭氣肝湯培養(yǎng)物培養(yǎng)至48 h開(kāi)始形成芽孢,芽孢呈檸檬狀,培養(yǎng)至72h,幾乎全部形成芽孢體。

    3.4 動(dòng)物試驗(yàn) 分別將雙球菌和大桿菌接種于普通肉湯和厭氣肝湯中,37℃培養(yǎng)24h。

    將雙球菌培養(yǎng)物分別以0.2~0.4 mL/只的量皮下注射于2只小白鼠,結(jié)果,2只小白鼠一周后仍健活。

    將大桿菌培養(yǎng)物原液以0.2 mL/只的量皮下注射于2只小白鼠后,觀察其發(fā)病死亡情況,同時(shí)將該培養(yǎng)物用生理鹽水稀釋后,在毒力范圍內(nèi)皮下注射于小白鼠,并測(cè)定最小致死劑量。結(jié)果,注射原液的小白鼠在注射后12h左右死亡,同時(shí)測(cè)得該菌的最小致死劑量為500MLD/mL。剖檢死亡小白鼠,其皮下及腹腔病變與前述接種小白鼠相同。

    4 診斷

    臨床癥狀和實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)結(jié)果表明犢牦牛死亡是由腐敗梭菌引起的。

    5 小結(jié)

    5.1 腐敗梭菌為土壤常在菌,氣溫多變、多雨潮濕季節(jié)及轉(zhuǎn)群造成犢牦牛體質(zhì)下降時(shí),其可引起發(fā)病。適時(shí)接種疫苗,尤其在牦牛轉(zhuǎn)群或進(jìn)入換季草場(chǎng)前進(jìn)行加強(qiáng)免疫是預(yù)防本病的有效方法。

    5.2 病牛死亡后應(yīng)及時(shí)采取病料送檢,因?yàn)楦瘮∷缶4嬖谟趧?dòng)物消化道內(nèi),其可在動(dòng)物死后的數(shù)小時(shí)內(nèi)大量繁殖并進(jìn)入臟器,若不及時(shí)送檢則可造成誤診從死亡動(dòng)物臟器分離到的腐敗梭菌必須通過(guò)接種試驗(yàn)才能確定其致病性。

    5.3 腐敗梭菌培養(yǎng)物離心上清液皮下和靜脈注射小白鼠時(shí)毒力較弱,表明其代謝產(chǎn)物中的抗原成分較少,故只有采用菌液制備滅活菌苗進(jìn)行免疫才能保證免疫效果。

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