• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    酶反應(yīng)提取技術(shù)在中藥化學(xué)成分提取中的應(yīng)用

    2013-08-15 00:50:23王忠雷楊麗燕曾祥偉李朋收張小華
    世界中醫(yī)藥 2013年1期
    關(guān)鍵詞:果膠酶烏頭酶法

    王忠雷 楊麗燕 曾祥偉 李朋收 張小華

    (1北京中醫(yī)藥大學(xué)中藥學(xué)院,北京,100102;2中國石油大學(xué)(北京)理學(xué)院;3北京豐泰金源藥業(yè)有限公司)

    隨著中藥研究與開發(fā)現(xiàn)代化的進(jìn)程,經(jīng)典的提取方法如溶劑提取法、水蒸氣蒸餾法、壓榨法及升華法等因有效成分提取率不高、雜質(zhì)清除率低等弊端,已經(jīng)難以滿足社會發(fā)展的需求。而一些新型、高效的提取新技術(shù)、新方法,已在近年的中藥研究中陸續(xù)顯現(xiàn)出各自的優(yōu)勢。筆者僅以酶反應(yīng)提取技術(shù)為例,論述其在中藥化學(xué)成分提取中的應(yīng)用進(jìn)展及方法特點,以期中藥提取新技術(shù)能夠更加合理有效地應(yīng)用于中藥研發(fā)過程[1]。

    1 酶的古代應(yīng)用及酶提取技術(shù)的形成

    一方面,人類在生產(chǎn)活動中有目的地利用生物酶已有幾千年歷史,例如釀酒、制作飴糖、制醬等。從龍山文化遺存的大量陶制貯酒可以推知,遠(yuǎn)在5000年前,我們祖先已開始人工釀酒了;早在3000多年前國人已應(yīng)用微生物發(fā)酵方法進(jìn)行麻纖維的漚漬脫膠;另外,在1000多年前的《齊民要術(shù)》中已有用“魚醬汁”來調(diào)味的論述。但由于歷史原因和科技的限制,當(dāng)時的人們沒有意識到、也不可能意識到這是“酶”在起作用[2]。

    另一方面,酶反應(yīng)提取技術(shù)真正形成則源于近代。酶化學(xué)是從1814年,Kirchhoff發(fā)現(xiàn)淀粉酶以后開始的。1926年,Sumner首次得到尿酶結(jié)晶以及Northorp對蛋白水解酶的研究,逐步建立酶化學(xué)的基礎(chǔ)。20世紀(jì)50年代中期,多學(xué)科的互相滲透使酶化學(xué)迅速發(fā)展。人們通過對氨基酸排列結(jié)構(gòu),酶的生物催化活性本質(zhì)以及酶的專一性等的研究,使生物酶的應(yīng)用逐步發(fā)展成為制藥工業(yè)的重要手段之一。然而酶法在中藥提取中的應(yīng)用到20世紀(jì)90年代才陸續(xù)見報。21世紀(jì)以來,酶反應(yīng)提取技術(shù)在中藥化學(xué)成分提取中的應(yīng)用日益普遍,并取得了較好的效果[3]。

    2 酶反應(yīng)提取技術(shù)的原理及特點

    植物類藥材約占中藥總量的90%,其活性成分主要存在于植物細(xì)胞壁內(nèi)。因此,細(xì)胞壁的多糖類物質(zhì)所構(gòu)成的致密結(jié)構(gòu)自然成為了中藥有效成分提取的主要屏障。而酶反應(yīng)提取技術(shù),即向待提取的中藥液中加入某些特定的酶,通過破壞構(gòu)成細(xì)胞壁的纖維素的基本單元的β-葡萄糖苷鍵等,導(dǎo)致細(xì)胞壁等處的纖維素、果膠等物質(zhì)降解,從而使其致密性降低,以減少細(xì)胞原生質(zhì)中的有效成分向溶媒擴(kuò)散時細(xì)胞壁及細(xì)胞間質(zhì)的阻力,進(jìn)而有利于有效成分的提取。以上內(nèi)容即為酶反應(yīng)提取技術(shù)的基本原理。

    酶反應(yīng)提取技術(shù)在中藥有效成分提取中得到越來越廣泛的應(yīng)用源于其如下特點:在較溫和的條件下提取,提取產(chǎn)物活性較高,穩(wěn)定性較好。但是,酶反應(yīng)提取技術(shù)同時受到最佳反應(yīng)溫度、pH值、酶及底物濃度、抑制劑和激動劑對提取物的影響等條件的制約[4]。

    3 酶提取技術(shù)在中藥中的應(yīng)用

    中藥品種繁多,有效成分的類型差異較大,因此需要按實際情況選擇不同種類的酶來提取。常用的酶反應(yīng)提取方法有復(fù)合酶法、纖維素酶法、果膠酶、超聲酶法及轉(zhuǎn)苷酶法等。

    3.1 纖維素酶法 植物細(xì)胞壁主要成分是纖維素,干燥植物體中纖維素占1/3~1/2,是形成植物細(xì)胞壁的框架。纖維素是β-葡萄糖以β-1,4-糖苷鍵連成的直鏈分子,而纖維素酶可降解β-1,4-糖苷鍵從而破壞植物細(xì)胞壁[5]。韓偉等[6]采用纖維素酶、果膠酶、蛋白酶等酶法提取積雪草中的積雪草苷,結(jié)合正交試驗,結(jié)果發(fā)現(xiàn),在纖維素酶與底物積雪草質(zhì)量比m(E)∶m(S)=1∶50的時候,具有較理想的提取率。與傳統(tǒng)提取方法相比,酶法提取速率快,工藝條件溫和,得率高,是一種良好的提取方法。馬桔云等[7]在從中藥飲片中提取穿心蓮內(nèi)酯之前,先對原藥材飲片進(jìn)行纖維素酶解處理以破壞β-葡萄糖苷鍵,其他條件與原工藝相同,結(jié)果發(fā)現(xiàn)穿心蓮內(nèi)酯的含量和提取量均較原提取工藝高,且對所提取有效成分沒有影響,并考慮將它用于穿心蓮提取的工業(yè)化生產(chǎn)中。李永生等[8]通過比較纖維素酶、半仿生、乙醇回流提取方法對川烏中烏頭堿、烏頭總堿的影響,篩選最佳方法,利用纖維素酶輔助提取川烏生物堿,以烏頭堿、烏頭總堿提取率為指標(biāo),正交試驗優(yōu)化纖維素酶的最佳提取條件,再與半仿生、乙醇提取方法進(jìn)行比較。實驗證明,酶用量8mg/g時烏頭堿提取率高達(dá)0.002 447%,烏頭總堿提取率高達(dá)0.244 410%,而半仿生提取烏頭堿、烏頭總堿的提取率分別為0.001 735%、0.189 340%,乙醇回流提取烏頭堿、烏頭總堿提取率分別為0.001 869%、0.200 720%,可知纖維素酶提取法具有明顯的優(yōu)勢。張華芳[9]等研究表明,用纖維素酶法提取羊棲菜多糖,以褐藻膠得率和羊棲菜粗多糖為定量指標(biāo),采用正交設(shè)計優(yōu)選酶法提取條件,所得的多糖的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為4.89%,較水提醇沉法、堿提醇沉法等有顯著提高。

    3.2 果膠酶 果膠酶由黑曲霉發(fā)酵所得,是分解果膠復(fù)合物的酶的總稱,可分為果膠甲酯酶和多聚半乳糖醛酸酶。藍(lán)峻峰等[10]通過添加果膠酶提取葉下珠有效成分,以沒食子酸提取率為考察指標(biāo),用高效液相色譜法測其含量,利用正交試驗設(shè)計優(yōu)選其提取工藝,結(jié)果發(fā)現(xiàn),在果膠酶濃度為1.5g/L時,葉下珠沒食子酸的平均提取率高達(dá)1.053%。因該工藝條件在較低的溫度下、較短的時間內(nèi)可較大程度提高葉下珠有效成分提取效率,故而有效地降低了提取能耗,而且提取過程中不使用有機(jī)溶劑,對環(huán)境友好,易于實現(xiàn)綠色工業(yè)化生產(chǎn)。李玲等[11]研究采用果膠酶提取川芎多糖的最佳工藝條件,方法為采用單因素實驗和正交設(shè)計進(jìn)行優(yōu)選,考察酶用量、pH、反應(yīng)時間和反應(yīng)溫度對川芎多糖提取的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn),在果膠酶用量為1%條件下,川芎多糖的平均得率高達(dá)11.3%。

    3.3 復(fù)合酶法 復(fù)合酶法因其操作簡單、高效、穩(wěn)定等優(yōu)點近幾年已被廣泛應(yīng)用在中藥活性成分的提取中。劉穎新等[12]以毛脈酸模的根為原料,采用復(fù)合酶提取,通過正交試驗優(yōu)選條件,實驗表明,在所用酶量為3%時對其有效成分有較理想的提取。王穎莉等[13]研究酶法結(jié)合傳統(tǒng)回流法提取遠(yuǎn)志總皂普工藝條件,利用可見分光光度法測定遠(yuǎn)志總皂苷含量,考察植物復(fù)合酶的酶解時間、酶解溫度對傳統(tǒng)提取工藝的強(qiáng)化效果,通過顯微結(jié)構(gòu)圖和紅外光譜圖說明了復(fù)合酶法強(qiáng)化傳統(tǒng)提取法的作用方式及提取物的結(jié)構(gòu)。結(jié)果表明酶用量為0.4%時,可提高遠(yuǎn)志總皂普提取率、縮短提取時間、減少乙醇使用量,這對于遠(yuǎn)志流浸膏的高效提取具有一定指導(dǎo)意義。另外,劉國際等[14]以復(fù)合酶法提取薯蕷皂苷元,結(jié)果發(fā)現(xiàn),復(fù)合酶法較其他酶法具有一定優(yōu)勢。且本實驗所選用的酶為粗制品,價格廉價,有助于薯蕷皂苷元大規(guī)?;a(chǎn)。張明春等[15]以水提工藝為對照,研究了纖維素酶與果膠酶復(fù)合酶法提取酸棗仁黃酮新工藝。結(jié)果發(fā)現(xiàn),在纖維素酶與果膠酶比為1∶1.30U/g酸棗仁時提取。該工藝的酸棗仁黃酮提取率比傳統(tǒng)水提工藝提高了54.67%。張明[16]以山東大青葉為材料,以復(fù)合酶水解、乙醇沉淀法提取其中的多糖。通過正交試驗,結(jié)果發(fā)現(xiàn)在纖維素酶1.5%、果膠酶2.0%、胰蛋白酶1.5%的條件下大青葉多糖的平均得率可高達(dá)18.24%。

    3.4 轉(zhuǎn)苷酶法 轉(zhuǎn)苷酶是葡萄糖苷轉(zhuǎn)移酶的簡稱,轉(zhuǎn)苷酶法在中藥提取與啤酒發(fā)酵等已有應(yīng)用并顯示了明顯的優(yōu)勢。許明淑等[17]以銀杏葉為原料,利用 Suhong475轉(zhuǎn)苷酶將黃酮苷元轉(zhuǎn)為黃酮苷以提高其水溶性,再以低濃度的乙醇溶液提取,結(jié)果表明,總黃酮的提取率比未加酶的對照組增加了44%。其實,早在上世紀(jì)90年代,日本學(xué)者高根芳春就已采用轉(zhuǎn)苷酶對黃酮苷元進(jìn)行提取,通過糖基轉(zhuǎn)移獲得了更高活性、更便于人體吸收利用的銀杏葉的有效成分槲皮素苷,使其黃酮提取率從原先的0.22%提升為0.38%。另外,轉(zhuǎn)苷酶法還有更廣泛的應(yīng)用,如李峰等[18]用跳躍式糖化與加轉(zhuǎn)苷酶相結(jié)合的方法,生產(chǎn)出了更加優(yōu)質(zhì)的低醇啤酒。

    3.5 超聲―酶法 賁永光等[19]以黃芪飲片為原料,結(jié)合單因素實驗,采用超聲―酶法提取黃芪總多糖,并通過正交試驗優(yōu)化其提取工藝。結(jié)果發(fā)現(xiàn),在超聲提取時間30min、酶量10mg等條件下,黃芪多糖的提取率為24.2%,較傳統(tǒng)水提工藝有明顯提高。陶濤等[20]以九華山黃精為原料,水為提取溶劑,采用超聲波協(xié)同纖維素酶方法對其多糖和皂苷進(jìn)行綜合提取。通過單因素和正交試驗研究,結(jié)果發(fā)現(xiàn),在纖維素酶與底物質(zhì)量比為1%時,多糖和皂苷提取率分別是39.36%和11.69%。相比傳統(tǒng)提取方法,多糖和皂苷的提取率均有了提高。另外,徐艷等[21]研究超聲―酶法在黃柏的小檗堿提取中的應(yīng)用效果,同樣采用單因素實驗和正交實驗,結(jié)果發(fā)現(xiàn)在超聲功率為80%、加酶25mL時黃柏小檗堿的提取率高,且具有高效、節(jié)能等優(yōu)勢。周琳等[22]研究報道了超聲―酶法提取三七總皂苷,以三七提取液中總皂苷的含量和提取物得率為指標(biāo),并采用四因素、三水平正交設(shè)計法,結(jié)果發(fā)現(xiàn)在纖維素酶與果膠酶用量比為3∶28時,三七提取液中總皂苷得率高達(dá)35.17%。

    4 結(jié)語

    隨著現(xiàn)代科學(xué)的迅猛發(fā)展與中藥現(xiàn)代化步伐的加快,酶反應(yīng)提取技術(shù)因其高效節(jié)能、方法簡便等優(yōu)勢而在中藥提取中的應(yīng)用日益頻繁。雖然目前該方法在實驗條件及酶種類等方面存在一定的局限性,但隨著技術(shù)的不斷進(jìn)步,相信該方法將在中藥的提取方面展示更加廣泛的應(yīng)用前景。

    [1]沈文娟,岳亮,何英翠,等.天然藥物常用提取技術(shù)與方法研究概況[J].中南藥學(xué),2011,9(2):127 -130.

    [2]姜彬慧,胡筱敏,左小紅,等.酶技術(shù)與中藥現(xiàn)代化[J].世界科學(xué)技術(shù)—中醫(yī)藥現(xiàn)代化,2004,6(2):46 -48.

    [3]楊慶隆,許順榮.淺談酶在中藥制劑中的應(yīng)用[J].中成藥,1995,17(6):4-5.

    [4]劉穎新,范業(yè)雪,王振月,等.酶技術(shù)在中藥有效成分提取與轉(zhuǎn)化中的研究現(xiàn)狀[J].遼寧中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報,2008,10(9):46 -47.

    [5]許明淑,羅明芳,邢新會,等.酶法強(qiáng)化中藥提取的研究進(jìn)展[J].中國中醫(yī)藥信息雜志,2005,12(12):37 -39.

    [6]韓偉,陳惠丹,樊亮,等.酶法提取積雪草苷[J].南京工業(yè)大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版),2009,31(3):18 -22.

    [7]馬桔云,呂芳,于喜水,等.纖維素酶用于中藥穿心蓮提取的初步研究[J].黑龍江醫(yī)藥,2001,13(1):16 -17.

    [8]李永生,林強(qiáng),鄭來麗,等.川烏的纖維素酶酶解提取工藝研究[J].中草藥,2009,40(11):1735 -1739.

    [9]張華芳,金京順,周來溫,等.羊棲菜多糖酶法提取工藝研究[J].中草藥,2006,37(2):222 -224.

    [10]藍(lán)峻峰,劉琨.葉下珠有效成分的果膠酶法提取工藝[J].中藥材,2010,33(1):135 -137.

    [11]李玲,王維香,王曉君,等.果膠酶法提取川芎多糖工藝的研究[J].中藥材,2008,31(4):600 -602.

    [12]劉穎新,王振月,劉利利,等.復(fù)合酶法提取毛脈酸模中有效成分的工藝研究[J].時珍國醫(yī)國藥.2011,22(11):2601 -2603.

    [13]王穎莉,張丹丹.復(fù)合酶法提取遠(yuǎn)志總皂苷的工藝研究[J].世界科學(xué)技術(shù)—中醫(yī)藥現(xiàn)代化,2009,11(6):885-888.

    [14]劉國際,羅娜,陳俊英,等.不同酶法酶提取薯蕷皂苷元的研究[J].鄭州大學(xué)學(xué)報(工學(xué)版),2005,26(4):48 -50.

    [15]張明春,解軍波,李婷,等.復(fù)合酶法提取酸棗仁黃酮研究[J].食品科學(xué),2008,29(09):145 -148.

    [16]張明.復(fù)合酶法提取大青葉多糖的工藝研究[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué).2010,37(26):172 -173.

    [17]許明淑,邢新會,羅明芳,等.銀杏葉黃酮的酶法強(qiáng)化提取工藝條件研究[J].中國實驗方劑學(xué)雜志,2006,12(4):2 -4.

    [18]李峰,楊昆.轉(zhuǎn)苷酶在低醇啤酒釀造中的應(yīng)用[J].啤酒科技,2004,6(07):25-28.

    [19]賁永光,吳錚超.超聲聯(lián)合酶法提取黃芪總多糖的影響因素分析[J].廣東藥學(xué)院學(xué)報,2010,26(2):135 -137.

    [20]陶濤,李立祥,張芳,等.超聲波協(xié)同纖維素酶對黃精多糖和皂苷的提取研究[J].食品工業(yè)科技,2011(9):230-234.

    [21]徐艷,劉少霞,孫娟,等.超聲-酶法提取黃柏中小檗堿的工藝研究[J].時珍國醫(yī)國藥,2007,18(6):1460 -1462.

    [22]周琳,李元波,曾英,等.超聲酶法提取三七總皂苷的研究[J].中成藥,2006,18(5):642 -645.

    猜你喜歡
    果膠酶烏頭酶法
    含烏頭堿中成藥理論中毒風(fēng)險的數(shù)學(xué)分析
    中成藥(2018年11期)2018-11-24 02:57:36
    白屈菜多糖果膠酶提取及脫色工藝的優(yōu)化
    中成藥(2018年7期)2018-08-04 06:04:20
    德欽烏頭塊根化學(xué)成分的研究
    中成藥(2018年2期)2018-05-09 07:19:50
    α-生育酚琥珀酸酯的酶法合成研究進(jìn)展
    高烏頭的研究進(jìn)展
    中成藥(2016年4期)2016-05-17 06:07:56
    酶法制備大豆多肽及在醬油發(fā)酵中的應(yīng)用
    中國釀造(2016年12期)2016-03-01 03:08:07
    Sn-2二十二碳六烯酸甘油單酯的酶法合成
    果膠酶酶解紅棗制汁工藝的研究
    中國果菜(2015年2期)2015-03-11 20:01:03
    果膠酶澄清柚子汁工藝條件研究
    中國釀造(2014年9期)2014-03-11 20:21:10
    高壓浸漬果膠酶與Ca2+的軟罐裝油桃保脆研究
    日韩中文字幕视频在线看片| 国产有黄有色有爽视频| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 欧美午夜高清在线| 国产欧美日韩精品亚洲av| 亚洲精品国产精品久久久不卡| 国产免费现黄频在线看| 狠狠婷婷综合久久久久久88av| 免费日韩欧美在线观看| 国产日韩欧美视频二区| 久久毛片免费看一区二区三区| 一个人免费在线观看的高清视频 | 欧美日韩一级在线毛片| 国产精品一区二区免费欧美 | 国产av又大| 国产高清videossex| 一区二区三区乱码不卡18| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 亚洲久久久国产精品| 精品福利永久在线观看| 中文字幕色久视频| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久 | 在线观看免费午夜福利视频| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 免费在线观看黄色视频的| 日韩人妻精品一区2区三区| h视频一区二区三区| 免费高清在线观看日韩| 老鸭窝网址在线观看| 人人妻人人澡人人看| 免费av中文字幕在线| 国精品久久久久久国模美| 亚洲国产精品成人久久小说| www.自偷自拍.com| 男女床上黄色一级片免费看| 狠狠狠狠99中文字幕| 日韩有码中文字幕| 夫妻午夜视频| 亚洲av片天天在线观看| 欧美日韩av久久| 涩涩av久久男人的天堂| 亚洲成人国产一区在线观看| 国产精品久久久人人做人人爽| 一个人免费在线观看的高清视频 | 久久精品久久久久久噜噜老黄| 老司机午夜福利在线观看视频 | 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 一级毛片电影观看| 国产成人精品久久二区二区免费| 一二三四在线观看免费中文在| 欧美日韩亚洲高清精品| 考比视频在线观看| 黄色视频不卡| 国产精品 国内视频| e午夜精品久久久久久久| 国产日韩一区二区三区精品不卡| 亚洲自偷自拍图片 自拍| 老汉色∧v一级毛片| 亚洲欧美色中文字幕在线| 黄片小视频在线播放| 精品国产乱码久久久久久男人| 亚洲人成电影观看| 十分钟在线观看高清视频www| 爱豆传媒免费全集在线观看| 国产精品一区二区免费欧美 | 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 在线永久观看黄色视频| 精品免费久久久久久久清纯 | 日本精品一区二区三区蜜桃| 免费观看av网站的网址| 香蕉国产在线看| 欧美精品一区二区免费开放| 99久久国产精品久久久| 亚洲欧洲日产国产| 91精品伊人久久大香线蕉| 一级毛片精品| 久久影院123| 久久久久久久精品精品| 久久精品亚洲熟妇少妇任你| 性色av一级| 日韩欧美一区视频在线观看| 欧美黄色片欧美黄色片| 在线精品无人区一区二区三| 亚洲精品粉嫩美女一区| 欧美日韩亚洲综合一区二区三区_| 桃红色精品国产亚洲av| 日本wwww免费看| 两个人看的免费小视频| 久久精品国产综合久久久| 亚洲五月色婷婷综合| 婷婷色av中文字幕| 久久狼人影院| 国产av精品麻豆| 国产欧美日韩一区二区精品| 国产精品欧美亚洲77777| 亚洲欧美清纯卡通| 国产亚洲一区二区精品| 久久久国产欧美日韩av| 精品人妻在线不人妻| 在线精品无人区一区二区三| 中文字幕人妻丝袜制服| 精品国产乱码久久久久久小说| 在线观看免费日韩欧美大片| 亚洲综合色网址| 久久青草综合色| 久久久精品区二区三区| tube8黄色片| 精品久久久久久久毛片微露脸 | 黑人猛操日本美女一级片| 人妻人人澡人人爽人人| 老汉色∧v一级毛片| 精品国产一区二区三区四区第35| 热99久久久久精品小说推荐| 亚洲精品粉嫩美女一区| 久久午夜综合久久蜜桃| 日韩大片免费观看网站| 久久国产精品人妻蜜桃| 亚洲av成人一区二区三| 亚洲一区中文字幕在线| 手机成人av网站| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 1024香蕉在线观看| 亚洲精品中文字幕一二三四区 | 三级毛片av免费| av天堂久久9| 一本大道久久a久久精品| 中文字幕制服av| 久久毛片免费看一区二区三区| 中文字幕人妻丝袜制服| av片东京热男人的天堂| 国产1区2区3区精品| 又紧又爽又黄一区二区| 国产在线观看jvid| 国产黄频视频在线观看| 欧美日韩国产mv在线观看视频| 国产日韩欧美在线精品| 国产黄频视频在线观看| 亚洲成人手机| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 精品久久久久久电影网| 国产精品免费视频内射| 国产一区二区激情短视频 | 国产精品国产av在线观看| 亚洲美女黄色视频免费看| 啦啦啦视频在线资源免费观看| 亚洲精品一区蜜桃| 天天操日日干夜夜撸| 男女高潮啪啪啪动态图| 十八禁高潮呻吟视频| 亚洲av日韩在线播放| 欧美另类一区| 日本五十路高清| 久久精品国产亚洲av高清一级| www.熟女人妻精品国产| 欧美 日韩 精品 国产| 大陆偷拍与自拍| 大片电影免费在线观看免费| 中文字幕制服av| 久久人妻熟女aⅴ| 国产亚洲欧美精品永久| 在线观看www视频免费| 老司机影院毛片| 一级片'在线观看视频| 亚洲三区欧美一区| 91成年电影在线观看| 亚洲国产欧美在线一区| 黑人巨大精品欧美一区二区mp4| 欧美日本中文国产一区发布| 久久久国产一区二区| 一区二区三区激情视频| 国产亚洲精品久久久久5区| 欧美精品av麻豆av| 国产野战对白在线观看| 欧美精品一区二区免费开放| a级毛片黄视频| 亚洲男人天堂网一区| bbb黄色大片| 99国产精品一区二区三区| 久久av网站| 99久久精品国产亚洲精品| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久 | 黄色a级毛片大全视频| 十八禁高潮呻吟视频| 午夜福利在线观看吧| 国产成人免费无遮挡视频| 少妇精品久久久久久久| 欧美人与性动交α欧美精品济南到| 大片免费播放器 马上看| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 国产黄频视频在线观看| 亚洲午夜精品一区,二区,三区| 在线精品无人区一区二区三| 法律面前人人平等表现在哪些方面 | 80岁老熟妇乱子伦牲交| 在线av久久热| 18禁观看日本| 69av精品久久久久久 | 午夜精品国产一区二区电影| 一级,二级,三级黄色视频| 日日夜夜操网爽| 国产精品久久久av美女十八| 精品国产乱码久久久久久小说| 久久久久网色| 午夜福利免费观看在线| 欧美久久黑人一区二区| 日韩电影二区| 免费不卡黄色视频| 老汉色∧v一级毛片| 精品免费久久久久久久清纯 | 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 国产亚洲av高清不卡| 在线精品无人区一区二区三| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| av线在线观看网站| 后天国语完整版免费观看| 亚洲自偷自拍图片 自拍| 日本精品一区二区三区蜜桃| 午夜激情久久久久久久| 老司机靠b影院| 欧美精品一区二区大全| 日本av手机在线免费观看| 午夜影院在线不卡| 99香蕉大伊视频| 91精品伊人久久大香线蕉| 999久久久国产精品视频| 亚洲国产欧美一区二区综合| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片| 热re99久久国产66热| 久久久精品免费免费高清| 精品一区二区三区四区五区乱码| 黄色 视频免费看| 亚洲av日韩在线播放| 一区二区三区四区激情视频| 久久天堂一区二区三区四区| 美女扒开内裤让男人捅视频| 亚洲精品一区蜜桃| 操出白浆在线播放| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 日本a在线网址| av国产精品久久久久影院| 美女中出高潮动态图| 人人妻人人澡人人看| 国产视频一区二区在线看| 香蕉丝袜av| 免费在线观看日本一区| a级片在线免费高清观看视频| 一本色道久久久久久精品综合| 亚洲精品国产区一区二| 免费高清在线观看视频在线观看| 下体分泌物呈黄色| 免费观看av网站的网址| 在线观看舔阴道视频| 高清视频免费观看一区二区| 成人影院久久| av欧美777| 国产成人一区二区三区免费视频网站| 不卡一级毛片| 亚洲五月婷婷丁香| 国产老妇伦熟女老妇高清| 视频区欧美日本亚洲| 色精品久久人妻99蜜桃| 欧美国产精品va在线观看不卡| 啦啦啦 在线观看视频| 午夜成年电影在线免费观看| 久久国产精品男人的天堂亚洲| 操出白浆在线播放| 飞空精品影院首页| 免费人妻精品一区二区三区视频| 午夜激情av网站| 国产精品av久久久久免费| 久久午夜综合久久蜜桃| 少妇被粗大的猛进出69影院| 久久久国产一区二区| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 国产av又大| 老司机在亚洲福利影院| 男女免费视频国产| 老司机深夜福利视频在线观看 | 丝袜脚勾引网站| 午夜福利在线免费观看网站| 日日夜夜操网爽| 久久中文看片网| 美女扒开内裤让男人捅视频| 亚洲国产看品久久| 精品欧美一区二区三区在线| 涩涩av久久男人的天堂| 99久久精品国产亚洲精品| 少妇粗大呻吟视频| 亚洲美女黄色视频免费看| 国产精品1区2区在线观看. | 久久精品国产亚洲av香蕉五月 | 久久久国产成人免费| 秋霞在线观看毛片| 久久精品成人免费网站| 亚洲欧美精品综合一区二区三区| 成年美女黄网站色视频大全免费| 午夜福利影视在线免费观看| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 黄片播放在线免费| 高清视频免费观看一区二区| 久久综合国产亚洲精品| 国产91精品成人一区二区三区 | 97人妻天天添夜夜摸| 欧美激情高清一区二区三区| netflix在线观看网站| 欧美激情极品国产一区二区三区| 青青草视频在线视频观看| 久久精品国产亚洲av香蕉五月 | 夜夜夜夜夜久久久久| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 如日韩欧美国产精品一区二区三区| 男人爽女人下面视频在线观看| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 欧美日韩av久久| 日韩中文字幕欧美一区二区| 人妻一区二区av| a在线观看视频网站| 黄片播放在线免费| 老熟女久久久| 成人国产av品久久久| 午夜福利一区二区在线看| 欧美黄色淫秽网站| 波多野结衣av一区二区av| 久9热在线精品视频| 久久人人爽人人片av| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 夜夜骑夜夜射夜夜干| 黑丝袜美女国产一区| 在线观看免费高清a一片| 高清视频免费观看一区二区| 精品第一国产精品| 黄片小视频在线播放| 亚洲精品国产色婷婷电影| 青春草视频在线免费观看| 日韩中文字幕视频在线看片| 日韩视频在线欧美| 高清av免费在线| 午夜影院在线不卡| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区 | 热99久久久久精品小说推荐| 正在播放国产对白刺激| 欧美激情 高清一区二区三区| 国产精品欧美亚洲77777| 日韩精品免费视频一区二区三区| av网站在线播放免费| 国产在线观看jvid| 欧美另类亚洲清纯唯美| 两个人免费观看高清视频| 色综合欧美亚洲国产小说| 91成人精品电影| 午夜老司机福利片| 亚洲av成人不卡在线观看播放网 | 啦啦啦免费观看视频1| 一本色道久久久久久精品综合| videos熟女内射| 亚洲av男天堂| 久久久国产欧美日韩av| 91麻豆av在线| 亚洲国产看品久久| av网站在线播放免费| 精品国产一区二区三区四区第35| 国产亚洲午夜精品一区二区久久| 亚洲国产看品久久| 欧美另类一区| 午夜福利,免费看| 美女扒开内裤让男人捅视频| 日韩欧美一区二区三区在线观看 | 1024视频免费在线观看| 国产精品一二三区在线看| 亚洲一区二区三区欧美精品| 亚洲三区欧美一区| 麻豆国产av国片精品| 久久久久久免费高清国产稀缺| 国产精品成人在线| 纯流量卡能插随身wifi吗| 免费在线观看黄色视频的| 亚洲专区中文字幕在线| 人人妻人人澡人人看| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃| 久久久久久亚洲精品国产蜜桃av| 国产真人三级小视频在线观看| 大片电影免费在线观看免费| 热99久久久久精品小说推荐| 我的亚洲天堂| 视频区欧美日本亚洲| 国产成人精品久久二区二区免费| 精品国产乱码久久久久久男人| 欧美人与性动交α欧美软件| 国产福利在线免费观看视频| 欧美精品亚洲一区二区| 丝袜人妻中文字幕| 激情视频va一区二区三区| 两性夫妻黄色片| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 亚洲国产av新网站| 午夜福利视频在线观看免费| 狂野欧美激情性xxxx| 欧美精品高潮呻吟av久久| 亚洲成国产人片在线观看| 啦啦啦免费观看视频1| 国产男女内射视频| 国产免费av片在线观看野外av| 国产人伦9x9x在线观看| 亚洲,欧美精品.| 天堂8中文在线网| 国产精品二区激情视频| 我的亚洲天堂| 国产三级黄色录像| 黑人操中国人逼视频| 免费观看人在逋| 在线 av 中文字幕| 亚洲国产欧美一区二区综合| 久久人人爽人人片av| 亚洲美女黄色视频免费看| 国产高清视频在线播放一区 | 久久狼人影院| 久久久精品94久久精品| 国产一卡二卡三卡精品| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看 | 国产人伦9x9x在线观看| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频| 久久99热这里只频精品6学生| 国产在线免费精品| netflix在线观看网站| 黄频高清免费视频| 精品福利观看| 嫁个100分男人电影在线观看| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 在线观看免费午夜福利视频| a级毛片在线看网站| a 毛片基地| 欧美日韩成人在线一区二区| 91字幕亚洲| 操美女的视频在线观看| 午夜福利乱码中文字幕| 91老司机精品| 天天添夜夜摸| 精品国产国语对白av| 国产免费福利视频在线观看| 日韩一区二区三区影片| 最黄视频免费看| 成人国产一区最新在线观看| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 日韩欧美一区二区三区在线观看 | 久9热在线精品视频| 久久精品国产a三级三级三级| 18禁裸乳无遮挡动漫免费视频| 日韩电影二区| 高潮久久久久久久久久久不卡| 视频区欧美日本亚洲| 老司机深夜福利视频在线观看 | 男人舔女人的私密视频| 国产精品亚洲av一区麻豆| 国产主播在线观看一区二区| 两个人看的免费小视频| 免费高清在线观看日韩| 五月天丁香电影| 免费高清在线观看视频在线观看| 久久久久久久大尺度免费视频| 午夜老司机福利片| 久久狼人影院| 黄色怎么调成土黄色| 国产精品自产拍在线观看55亚洲 | 美女福利国产在线| 黄频高清免费视频| 亚洲三区欧美一区| 亚洲国产av新网站| 一区二区日韩欧美中文字幕| 脱女人内裤的视频| 性色av乱码一区二区三区2| 久久久久国产精品人妻一区二区| 欧美日韩福利视频一区二区| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 久久人人爽人人片av| 国产精品一区二区在线观看99| 啦啦啦在线免费观看视频4| 国产成人a∨麻豆精品| 久久国产精品男人的天堂亚洲| 日本vs欧美在线观看视频| 老司机靠b影院| 午夜福利免费观看在线| 丝袜脚勾引网站| 国产成人欧美| 亚洲第一av免费看| www.精华液| 亚洲国产看品久久| 亚洲国产中文字幕在线视频| 午夜福利乱码中文字幕| 久久久精品94久久精品| 精品人妻熟女毛片av久久网站| 50天的宝宝边吃奶边哭怎么回事| 欧美激情极品国产一区二区三区| 国产免费一区二区三区四区乱码| 高清黄色对白视频在线免费看| 亚洲五月色婷婷综合| 久久九九热精品免费| 自线自在国产av| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区 | 久久性视频一级片| 建设人人有责人人尽责人人享有的| 久9热在线精品视频| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 免费不卡黄色视频| 搡老岳熟女国产| 爱豆传媒免费全集在线观看| 久久天堂一区二区三区四区| 国产av国产精品国产| 国产男女超爽视频在线观看| 精品少妇内射三级| 亚洲欧美精品自产自拍| 动漫黄色视频在线观看| 国产一区二区在线观看av| 日本欧美视频一区| 免费av中文字幕在线| 国产精品二区激情视频| 一区二区三区乱码不卡18| 亚洲精华国产精华精| 12—13女人毛片做爰片一| 成人国产av品久久久| 国产伦理片在线播放av一区| 99久久99久久久精品蜜桃| 亚洲av欧美aⅴ国产| 男人爽女人下面视频在线观看| a在线观看视频网站| 丰满饥渴人妻一区二区三| 国产成人av教育| 亚洲第一av免费看| 久久青草综合色| 国产av精品麻豆| 欧美日韩精品网址| 国产欧美日韩综合在线一区二区| 啦啦啦免费观看视频1| 天堂8中文在线网| 黄色视频,在线免费观看| 日韩 亚洲 欧美在线| 午夜精品久久久久久毛片777| 搡老岳熟女国产| 精品少妇久久久久久888优播| 免费观看av网站的网址| 午夜两性在线视频| 99久久精品国产亚洲精品| 国产av一区二区精品久久| 精品国内亚洲2022精品成人 | av在线老鸭窝| 国产一区二区 视频在线| 免费观看人在逋| 韩国高清视频一区二区三区| 桃花免费在线播放| a级片在线免费高清观看视频| 国产免费一区二区三区四区乱码| 亚洲人成电影观看| 精品人妻一区二区三区麻豆| 成人影院久久| 亚洲性夜色夜夜综合| 侵犯人妻中文字幕一二三四区| 成人手机av| 亚洲av成人不卡在线观看播放网 | 亚洲中文av在线| 曰老女人黄片| 国产极品粉嫩免费观看在线| avwww免费| 一级毛片精品| av网站免费在线观看视频| 亚洲国产成人一精品久久久| 欧美另类亚洲清纯唯美| 国产在线免费精品| 老熟妇乱子伦视频在线观看 | 热re99久久精品国产66热6| 一本色道久久久久久精品综合| 亚洲av美国av| 国产精品久久久久成人av| 成人手机av| 欧美97在线视频| 真人做人爱边吃奶动态| 久久免费观看电影| av线在线观看网站| 久久影院123| 日韩欧美免费精品| 另类精品久久| av网站在线播放免费| 岛国毛片在线播放| 97人妻天天添夜夜摸| 日本wwww免费看| 国产又色又爽无遮挡免| 我要看黄色一级片免费的| 香蕉国产在线看| 免费少妇av软件| 亚洲精品av麻豆狂野| 久久久久久久久久久久大奶| 韩国精品一区二区三区| 中国国产av一级| 免费观看人在逋| 久久久久久人人人人人| 法律面前人人平等表现在哪些方面 | 欧美激情极品国产一区二区三区| 国产精品免费视频内射| 日本vs欧美在线观看视频| 亚洲国产精品999| 欧美精品啪啪一区二区三区 | 少妇 在线观看| 操美女的视频在线观看| 亚洲视频免费观看视频| av在线播放精品| 日韩三级视频一区二区三区| 在线十欧美十亚洲十日本专区| 中文字幕人妻熟女乱码| 在线观看一区二区三区激情| 男女高潮啪啪啪动态图| 在线天堂中文资源库| 美女国产高潮福利片在线看| 国产一区二区在线观看av| 亚洲成av片中文字幕在线观看| 成年人午夜在线观看视频| 午夜老司机福利片| 日本精品一区二区三区蜜桃|