微生物檢驗技術(shù)在基層血站質(zhì)量控制中的應(yīng)用

方世杰

(內(nèi)蒙古根河市中心血庫 022350)

血液的安全直接關(guān)系到獻(xiàn)血者、受血者的生命安全，采供血工作又被形象的稱為血管對血管工作，血液安全至關(guān)重要，但作為一個成立較晚偏遠(yuǎn)地區(qū)的基層血站，最初的成立之時，對于血液安全的理解更多的是傳染性指標(biāo)的安全，最近幾年，隨著血液事業(yè)的快速發(fā)展與完善以及國家對血液質(zhì)量安全要求越來越嚴(yán)，辦法、規(guī)范的持續(xù)不斷更新與細(xì)化，血液的污染指標(biāo)、獻(xiàn)血者與員工的安全與傳染性指標(biāo)一樣受到重視，由此以來，過去主要用于臨床的輔助檢查、藥物敏感試驗中，以幫助臨床疾病的診斷及指導(dǎo)臨床用藥的微生物檢驗技術(shù)被越來越多的應(yīng)用到采供血的質(zhì)量控制中，經(jīng)過本實驗室近幾年的努力，微生物檢測的預(yù)防與監(jiān)控已經(jīng)應(yīng)用到本血站的采供血的各個環(huán)節(jié)，為血站的質(zhì)量控制提供了真實有效的依據(jù)，為血站的內(nèi)部審核、質(zhì)量管理提供了強(qiáng)有力的輸入項。本血站的應(yīng)用列舉如下:

一、采供血環(huán)境空氣消毒效果監(jiān)測

包括采供血環(huán)境、血液冷藏箱內(nèi)部空氣消毒效果監(jiān)測，掌握該環(huán)境消毒效果是否達(dá)標(biāo)，對工作中存在問題可以及時發(fā)現(xiàn)、改進(jìn)，以有效為獻(xiàn)血者提供衛(wèi)生安全舒適的環(huán)境，保護(hù)獻(xiàn)血者安全及減少所獻(xiàn)血液污染的機(jī)會。采樣時機(jī):消毒后采供血活動開始前，采樣頻次:每月一次，必要時增加采樣頻次，布點方法:室內(nèi)面積≤30m2，設(shè)內(nèi)、中、外對角線3 點，內(nèi)、外布點部位距墻壁1m處;室內(nèi)面積＞30m2，設(shè)四角及中央5 點，4 角的點距墻壁1m 處。采樣方法:穿工作服，戴工作帽和口罩進(jìn)入被檢房間，將預(yù)先準(zhǔn)備好的滅菌分裝的普通營養(yǎng)瓊脂平皿放在室內(nèi)各采樣點，采樣高度為距離地面1．5 cm，采樣時將平皿蓋打開，暴露5 分鐘，蓋好立即送檢。檢測方法:將采樣后的平皿置于37℃恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)48小時，觀察形成的菌落數(shù)，計算該采供血環(huán)境的細(xì)菌數(shù)，通過查對相關(guān)國家標(biāo)準(zhǔn)，報告監(jiān)測結(jié)果。

二、采供血活動過程中所涉及的物體表面

檢測包括:采供血操作臺面、血液冷藏箱內(nèi)表面，成分分離臺面、離心機(jī)內(nèi)表面、門把手、運血箱等，上述物體表面細(xì)菌總數(shù)超標(biāo)，必然對血液及其制品造成質(zhì)量安全隱患，甚至?xí)＜肮ぷ魅藛T，對物體表面的消毒效果進(jìn)行監(jiān)測，可以掌握消毒效果、選擇適當(dāng)消毒方案，及時發(fā)現(xiàn)問題進(jìn)行糾正與預(yù)防。采樣時機(jī):消毒處理后進(jìn)行采樣，

采樣方法:用5 cm ×5 cm 滅菌規(guī)格板，放置于被檢物體表面，用浸有滅菌生理鹽水采樣液的棉拭子1 支，在規(guī)格板內(nèi)橫豎往返均勻涂抹5 次，并隨之轉(zhuǎn)動棉拭子，連續(xù)采樣4 個規(guī)格板面積，剪去手接觸部位，將棉拭子放入裝有10 ml 無菌檢驗用洗脫液的試管中，做好標(biāo)記，立即送檢。檢測方法:充分震蕩采樣管后，去不同稀釋倍數(shù)的洗脫液1 ml 接種平皿，將冷卻至40℃左右的融化的營養(yǎng)瓊脂傾倒15 ～20 ml，37℃恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)48 小時，計算菌落數(shù)。

結(jié)果計算(cfu/ cm2)=平皿上的菌落數(shù)×稀釋倍數(shù)(10)÷采樣面積(100 cm2)=平皿上的菌落數(shù)×0．1

三、工作人員手指、獻(xiàn)血者肘部消毒后細(xì)菌培養(yǎng)

采樣時機(jī):消毒后采血前;采樣方法:同上(物體表面消毒采樣)，5 ×5 cm 規(guī)格板采樣面積，將采樣后的棉拭子放入10 ml 中采樣液中，送檢。檢測方法:同上(物體表面消毒)

結(jié)果計算:(cfu/ cm2)=平皿上的菌落數(shù)×稀釋倍數(shù)(10)÷采樣面積(25 cm2)=平皿上的菌落數(shù)×0．4

四、成分制品的細(xì)菌培養(yǎng)

血液成分制品細(xì)菌監(jiān)測是血液質(zhì)量控制的最后一關(guān)，血液成分制品檢測也間接證明采供血各個環(huán)節(jié)操作是否合格。依據(jù)血站質(zhì)量管理規(guī)范，血站實驗室標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程2012 版，對血液成分制品進(jìn)行細(xì)菌指標(biāo)檢測，要求必須達(dá)到無菌生長。采樣頻次:每月對庫存制品分類按庫存比例進(jìn)行抽檢，抽樣檢測方法:采用無菌操作方法抽取樣本，分別流體硫乙醇酸鹽培養(yǎng)、改良馬丁培養(yǎng)基25、37 培養(yǎng)14 天，未見細(xì)菌生長報告合格，出現(xiàn)細(xì)菌生長進(jìn)一步鑒定。

討 論

本血站通過近年來微生物檢測監(jiān)控，對員工起到了一定程度上的督促與監(jiān)督，有微生物監(jiān)控記錄以來，血液制品監(jiān)測無不合格現(xiàn)象發(fā)生，同時采供血環(huán)境、物體表面、工作人員手指及獻(xiàn)血者肘部消毒效果監(jiān)測中無一例細(xì)菌超標(biāo)不合格現(xiàn)象發(fā)生。血站管理步入安全有序的軌道，極大程度取決于質(zhì)量管理控制手段的應(yīng)用，質(zhì)量控制為血站質(zhì)量管理及預(yù)防與糾正錯誤提供證據(jù)、資料，良好而完善的質(zhì)量管理離不開質(zhì)量控制，而血站的質(zhì)量控制直接證據(jù)也將一定程度上來源于微生物檢測，微生物檢測技術(shù)在血站管理中將發(fā)揮不可替代的作用。