劉 琳
(四川中醫(yī)藥高等專科學(xué)校,四川 綿陽(yáng)621000)
現(xiàn)代臨床醫(yī)學(xué)要求檢驗(yàn)人員必須掌握標(biāo)本分析前、中、后的質(zhì)量控制及評(píng)估,以提高和保證檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性。 由于實(shí)驗(yàn)條件和課時(shí)數(shù)有限, 高職高專的教師在實(shí)驗(yàn)教學(xué)中往往只重視實(shí)驗(yàn)原理和操作過(guò)程,忽略了強(qiáng)調(diào)實(shí)驗(yàn)中的質(zhì)量控制,使得學(xué)生對(duì)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制的知識(shí)僅限于書(shū)本理論, 無(wú)法正確分析自己的操作結(jié)果為何出現(xiàn)誤差,這對(duì)今后的工作操作、分析和科研能力都有極大的局限性。 筆者在生物化學(xué)檢驗(yàn)教學(xué)實(shí)驗(yàn)室新模式探索中對(duì)如何加強(qiáng)學(xué)生的質(zhì)控操作進(jìn)行了一些有益的嘗試,淺述如下:
課前的實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備包括試劑準(zhǔn)備、儀器準(zhǔn)備和實(shí)驗(yàn)器材準(zhǔn)備。 教師按照教學(xué)大綱內(nèi)容,根據(jù)學(xué)校有限的實(shí)驗(yàn)儀器來(lái)設(shè)計(jì)、安排實(shí)驗(yàn)課程,要求學(xué)生準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)試劑和器材。 生物化學(xué)檢驗(yàn)試劑多為成品試劑盒,也有部分實(shí)驗(yàn)要求配置試劑。實(shí)驗(yàn)老師在講解了實(shí)驗(yàn)原理和注意事項(xiàng)后,學(xué)生必須準(zhǔn)確地用電子天平稱量化學(xué)試劑,用容量瓶精確量取蒸餾水,在最適溫度下溶解試劑,確保試劑的準(zhǔn)確性。 預(yù)實(shí)驗(yàn)時(shí),學(xué)生在教師的指導(dǎo)下做好實(shí)驗(yàn)儀器的質(zhì)控,保證實(shí)驗(yàn)在可控條件下進(jìn)行。 在教學(xué)中,老師可先安排2~4 學(xué)時(shí)的實(shí)驗(yàn)強(qiáng)化訓(xùn)練,著重培養(yǎng)學(xué)生對(duì)生化檢驗(yàn)的各種玻璃器皿及常用儀器的熟練運(yùn)用,訓(xùn)練學(xué)生配置各種濃度試劑的準(zhǔn)確計(jì)算,確保試劑和儀器的質(zhì)量控制。
2.1 影響生物化學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)本的因素極為復(fù)雜,如患者的性別、年齡、人種、飲食、藥物、情緒、狀態(tài)、妊娠、運(yùn)動(dòng)、海拔高度、生活方式、晝夜變化等等。
教師在課堂中必須強(qiáng)調(diào)其重要性,并在試驗(yàn)時(shí)通過(guò)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)對(duì)學(xué)生進(jìn)行引導(dǎo)和分析。例如:激烈運(yùn)動(dòng)或長(zhǎng)時(shí)間持續(xù)運(yùn)動(dòng)后可使血中鉀、鈉、鈣、無(wú)機(jī)磷、AST、白細(xì)胞、尿素、肌酐及乳酸增高1 倍以上,CK 增加4 倍以上。所以標(biāo)本采集前必須囑咐患者在安靜狀態(tài)或正?;顒?dòng)下收集標(biāo)本。又如:一些藥物可使體內(nèi)某些物質(zhì)濃度發(fā)生變化,例如咖啡因可使血糖、脂肪酸、血管緊張素、兒茶酚氨升高;嗎啡可導(dǎo)致胰島素、去甲腎上腺素、胰多肽降低。因此,為了得到準(zhǔn)確、真實(shí)的檢驗(yàn)結(jié)果,必須事先停用某種藥物10~12h 或更長(zhǎng)時(shí)間[1]。檢驗(yàn)人員一般需在采集標(biāo)本前給病人講解采集過(guò)程及要求,以保證標(biāo)本的質(zhì)量。 學(xué)生在實(shí)驗(yàn)室操作學(xué)習(xí)時(shí)就應(yīng)該有正確的操作理念。 例如:24h 尿液采集,第一天囑病人將尿排盡棄去,并記錄排尿時(shí)間,以后每次排出的尿均收集于潔凈干燥帶蓋的容器中, 直至收集到第二天同一時(shí)間最后一次排尿?yàn)橹??;靹?、量出總量,然后取約5mL 到實(shí)驗(yàn)室。如何選擇尿液防腐劑以及用量也是需要掌握的分析前質(zhì)量控制因素。只有通過(guò)大量的舉例和分析,學(xué)生在實(shí)驗(yàn)前才會(huì)重視標(biāo)本性質(zhì),在今后的學(xué)習(xí)和工作中才能謹(jǐn)慎、細(xì)微、統(tǒng)籌分析,做出準(zhǔn)確的結(jié)果。
2.2 臨床生化檢驗(yàn)標(biāo)本多為靜脈血,采血體位和部位、止血帶、抗凝劑的不當(dāng)都會(huì)造成標(biāo)本失真,溶血?jiǎng)t是臨床生化檢驗(yàn)中最常見(jiàn)的一種影響因素。 例如實(shí)驗(yàn)測(cè)血漿鉀離子時(shí),教師多次強(qiáng)調(diào)應(yīng)避免壓脈帶過(guò)緊、壓迫時(shí)間過(guò)長(zhǎng),順利穿刺后要注意血液與抗凝劑的比例。若用注射空針抽血完畢后,應(yīng)拔掉針尖再沿容器壁緩慢注入,且容器內(nèi)必須干燥清潔??鼓簶?biāo)本采集后要充分混勻,避免血液微小凝集,但動(dòng)作必須輕柔。這些都是為保證檢驗(yàn)結(jié)果的可靠性,避免溶血標(biāo)本。實(shí)驗(yàn)室里,老師先仔細(xì)講解抽血步驟并示范抽血,然后在同學(xué)相互抽血的過(guò)程中,觀察同學(xué)們的操作方法,糾正其易導(dǎo)致標(biāo)本溶血的錯(cuò)誤操作。根據(jù)生化檢驗(yàn)的內(nèi)容不同,使用抗凝劑的種類(lèi)和量也有不同,教師必須加強(qiáng)學(xué)生的相關(guān)理論知識(shí)學(xué)習(xí),每次實(shí)驗(yàn)課中根據(jù)實(shí)驗(yàn)測(cè)定物得不同來(lái)分析采集標(biāo)本的注意事項(xiàng)。
2.3 生物化學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)本采集后應(yīng)盡快送至實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行檢驗(yàn), 減少標(biāo)本的放置時(shí)間。 如果因?qū)嶋H臨床原因而不能及時(shí)檢測(cè),需離心后放在4℃冰箱保存。室溫下血細(xì)胞中的糖酵解會(huì)以每小時(shí)5%~7%(0.4mmol/L)的速度使血糖減少,當(dāng)白細(xì)胞增多或細(xì)菌污染時(shí),血糖的損失會(huì)增加,故標(biāo)本采集后須分離血漿盡快測(cè)定[2]。 為了加強(qiáng)學(xué)生的重視,老師可理論聯(lián)系實(shí)際設(shè)計(jì)一套實(shí)驗(yàn)方案。首先學(xué)生按照要求抽取靜脈血標(biāo)本(氟化鈉-草酸鉀為抗凝劑),半小時(shí)內(nèi)離心,用葡萄糖氧化酶法測(cè)定該標(biāo)本的血糖濃度。然后室溫下把該標(biāo)本放置1h 后,用相同方法測(cè)定血糖濃度會(huì)發(fā)現(xiàn)葡萄糖含量下降。 通過(guò)一系列實(shí)驗(yàn)論證,提高了學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣、動(dòng)手和分析能力也明確了標(biāo)本分析前實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制的重要性。
高職高專院校的生物化學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目中很多手工操作都受到實(shí)驗(yàn)條件的制約,雖然我們?cè)趯?shí)驗(yàn)前的試劑準(zhǔn)備、儀器調(diào)節(jié)和標(biāo)本采集都盡量減少誤差,但同學(xué)加樣時(shí)的隨機(jī)誤差、儀器使用中的錯(cuò)誤以及室溫不恒定的誤差等都會(huì)影響測(cè)定值。每一堂實(shí)驗(yàn)課的實(shí)驗(yàn)?zāi)坎灰粯?,那么測(cè)定某物質(zhì)的實(shí)驗(yàn)原理和注意事項(xiàng)就是我們學(xué)習(xí)的重點(diǎn)。 例如,血漿總蛋白的測(cè)定可以利用四種蛋白質(zhì)特有的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)來(lái)設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)方法,而根據(jù)測(cè)定原理的每種方法在特異性、準(zhǔn)確度、穩(wěn)定性和靈敏度上都有一定的差異。 同學(xué)就是在確保質(zhì)控的情況下,通過(guò)實(shí)驗(yàn)結(jié)果來(lái)驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)原理,并根據(jù)具體操作步驟進(jìn)一步理解注意事項(xiàng),從而評(píng)價(jià)某種方法,做到學(xué)以致用。 所以通過(guò)自己的動(dòng)手實(shí)踐來(lái)分析每一步的實(shí)驗(yàn)原理,尋找每一步的誤差在哪里,今后在實(shí)驗(yàn)中應(yīng)該注意什么,以保證準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果才是學(xué)習(xí)重點(diǎn)。
總之,隨著醫(yī)學(xué)的不斷發(fā)展,疾病的診斷、治療和預(yù)后的判斷越來(lái)越多的依賴于生物化學(xué)檢驗(yàn)結(jié)果。我們認(rèn)為在高職高專的實(shí)驗(yàn)教學(xué)中開(kāi)設(shè)“實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制課”雖然有一定的難度,但只要理論聯(lián)系實(shí)驗(yàn),根據(jù)有限的資源開(kāi)設(shè)有針對(duì)性的實(shí)驗(yàn),并在錯(cuò)誤中發(fā)現(xiàn)真理,學(xué)生的質(zhì)量控制意識(shí)就會(huì)逐步形成,對(duì)今后實(shí)際臨床實(shí)驗(yàn)室工作基本技能及科研能力都具有極其重要的意義。
[1]張波.重視檢驗(yàn)前質(zhì)量控制 進(jìn)一步提高檢驗(yàn)質(zhì)量[J].國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2008,29(2):185-186.
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