達沙替尼的合成研究

黃 睿，何小兵，陳中豪，熊遠珍

（南昌大學藥學院，江西 南昌330001）

達沙替尼（Dasatinib），化學名 N－（2－氯－6－甲基苯基）－2－［6－［4－（3－羥 乙基）－1－哌嗪基］－2－甲基－4－嘧啶基氨基］－5－噻唑甲酰胺一水合物，是2－氨基噻唑類多重酪氨酸激酶抑制劑，它不僅能夠在納摩爾級別抑制Lck（IC50＝0．4nmol·L－1）和 Bcr－Abl酶（IC50＜1nmol·L－1），而且對T－細胞增殖具有較強的抑制作用（IC50＝3nmol·L－1）。該藥用于治療伊馬替尼耐藥或無法耐受伊馬替尼的慢性髓性白血?。–ML）患者，作用強度是伊馬替尼的325倍。與伊馬替尼僅能與非活化狀態(tài)ATP結合位點作用不同，達沙替尼可與活化或非活化狀態(tài)的ATP作用區(qū)域結合，除用于治療慢性髓性白血病外，也可治療費城染色體陽性的急性淋巴細胞性白血病［1］。

文獻報道的達沙替尼合成方法主要有：（1）以2－氨基噻唑－5－甲酸乙酯為原料，BOC酸酐保護氨基后，分別經(jīng)酯水解、酰胺化反應、脫保護后與4，6－二氯－2－甲基嘧啶及N－羥乙基哌嗪親核縮合，得到達沙替尼［2，3］。（2）以2－氯－6－甲基苯胺（Ⅰ）為起始原料，與（E）－3－乙氧基丙烯酰氯（Ⅱ）反應得（E）－N－（2－氯－6－甲基苯基）－3－乙氧基丙烯酰胺（Ⅲ），Ⅲ與N－溴代丁二酰亞胺（NBS）、硫脲連續(xù)反應得2－氨基－N－（2－氯－6－甲基苯基）－5－噻唑甲酰胺（Ⅴ），Ⅴ與4，6－二氯－2－甲基嘧啶進行親核反應得2－（6－氯－2－甲基嘧啶－4－氨基）－N－（2－氯－6－甲基苯基）－5－噻唑甲酰胺（Ⅵ），Ⅵ最后與1－（2－羥乙基）哌嗪縮合得到達沙替尼（Ⅶ），總收率約52%［4，5］。（3）2－氯噻唑與2－氯－6－甲基苯基異氰酸縮合，經(jīng)4－甲氧基芐基氯保護后，與4，6－二氯－2－甲基嘧啶進行親核取代、脫保護后，再與羥乙基哌嗪縮合得到達沙替尼，總收率61%［6－8］。

McIntyre等［9］報道了順序完全不同的反應步驟，即羥乙基哌嗪首先與4，6－二氯－2－甲基嘧啶反應，接著與氨基噻唑縮合，再與化合物Ⅰ胺化得到達沙替尼［9－11］。

作者在文獻［5］的基礎上，以2－氯－6－甲基苯胺為起始原料，在吡啶的催化下與（E）－3－乙氧基丙烯酰氯反應，酰化產(chǎn)物在以水為主的溶劑中與NBS、硫脲環(huán)合，再與4，6－二氯－2－甲基嘧啶進行親核取代反應，最后在三乙胺催化下與1－（2－羥乙基）哌嗪縮合得到目標化合物達沙替尼，并探討了催化劑、溶劑對收率的影響，擬為工業(yè)化生產(chǎn)達沙替尼提供依據(jù)。合成路線見圖1。

本實驗核磁共振氫譜用Bruker－ARX－400型核磁共振氫譜儀測定；紅外光譜用島津IR－8400型紅外光譜儀測定。

1 合成方法

1．1 （E）－N－（2－氯－6－甲基苯基）－3－乙氧基丙烯酰胺（Ⅲ）的合成

圖1 達沙替尼的合成路線Fig．1 Synthetic route of dasatinib

將化合物Ⅰ （23．2g，163．4mmol）溶于200mL二氯甲烷中，加入吡啶12．4g，控制pH值為10左右，將反應液降溫至0℃，控制溫度在0～5℃，緩慢滴加化合物Ⅱ（26．4g，196mmol），在冰水浴中反應3h，旋干，水洗，得白色固體（E）－N－（2－氯－6－甲基苯基）－3－乙氧基丙烯酰胺（Ⅲ）38g，收率99%，m．p．170～172℃。

1HNMR（DMSO－d6），δ：1．27（t，3H，J＝7．0Hz），2．16（s，3H），3．94（q，2H，J＝7．0Hz），5．58（d，1H，J＝12．4Hz），7．18～7．23（m，2H，J＝7．5Hz），7．32（d，1H，J＝7．5Hz），7．46（d，1H，J＝12．4Hz），9．29（s，1H）。

1．2 2－氨基－N－（2－氯－6－甲基苯基）－5－噻唑甲酰胺（Ⅴ）的合成

在化合物Ⅲ （25．8g，107mmol）中加入水120mL、1，4－二氧六環(huán)60mL，降溫至－10℃，加入N－溴代丁二酰亞胺（21g，118mmol），室溫下攪拌3h。再加入硫脲（8．2g，108．4mmol），將反應液加熱至80 ℃，攪拌反應2h。反應液冷卻至室溫，滴加氨水調溶液pH值至8～9，減壓蒸出約280mL溶劑，剩余液冷卻至0℃，抽濾，用100mL水洗濾餅2次，干燥，得黃褐色固體2－氨基－N－（2－氯－6－甲基苯基）－5－噻唑甲酰胺（Ⅴ）27．6g，收率96．0%，m．p．207～209℃。

1HNMR（DMSO－d6），δ：2．21（s，3H），7．24（m，2H，J＝ 7．5Hz），7．36（d，1H，J＝7．5Hz），7．69（s，2H），7．87（s，1H），9．66 （s，1H）。

1．3 2－（6－氯－2－甲基嘧啶－4－氨基）－N－（2－氯－6－甲基苯基）－5－噻唑甲酰胺（Ⅵ）的合成

將化合物Ⅴ（11g，41mmol）、4，6－二氯－2－甲基吡啶（8．0g，41mmol）和THF（105mL）加至250mL三頸瓶中，冰鹽浴冷卻至－10～－5℃，加入新鮮制備的叔丁醇鈉 （25．8g，250mmol），－10 ℃ 攪 拌 反 應1．5h。加入2mol·L－1的鹽酸溶液調至中性。0℃攪拌1．5h，過濾，濾餅用少量水洗滌，干燥，得淡黃色固體 2－（6－氯－2－甲 基 嘧 啶－4－氨 基）－N－（2－氯－6－甲 基 苯基）－5－噻唑甲酰胺（Ⅵ）15g，收率88%，m．p．＞300℃。

1HNMR（DMSO－d6），δ：2．23（s，3H，CH3），2．60（s，3H，CH3），6．95（s，1H，CH，Pyrimidine），7．23～7．31（m，2H，Aromatic），7．42（d，1H，J＝7．4Hz，Aromatic），8．23（s，1H，CH，Thiazole），10．03（s，1H，NH），12．25（s，1H，NH）。

1．4 N－（2－氯－6－甲基苯基）－2－［6－［4－（3－羥乙基）－1－哌嗪基］－2－甲基－4－嘧啶基氨基］－5－噻唑甲酰胺一水合物（Ⅶ）的合成

將化合物Ⅵ （3．2g，8．16mmol）溶于30mL N，N－二甲基甲酰胺中，加入1－（2－羥乙基）哌嗪（3．2g，21 mmol）及三乙胺（1．6g，16mmol），加熱至80℃，攪拌4h。冷卻至室溫，將其緩慢倒入100mL水中，攪拌10min，抽濾，將濾餅加入20mL體積分數(shù)為80% 的乙醇水溶液中，加熱至80℃，攪拌5min，再緩慢滴加5mL水，冷卻至室溫，抽濾，干燥得白色固體N－（2－氯－6－甲基苯基）－2－［6－［4－（3－羥乙 基）－1－哌 嗪基］－2－甲基－4－嘧啶基氨基］－5－噻唑甲酰胺一水合物（Ⅶ）3．5g，收率85%，m．p．281～283℃。

1HNMR（DMSO－d6），δ：2．24（s，3H），2．41（s，3H），2．45（t，2H，J＝6．0Hz），2．49（t，4H，J＝6．3Hz），3．51（m，4H），3．55（q，2H，J＝6．0Hz），4．44（t，1H，J＝5．3Hz），6．05（s，1H），7．26（t，1H，J＝7．6Hz），7．29（d，1H，J＝7．6Hz），7．39（d，1H，J＝7．6Hz），8．22（s，1H），9．87（s，1H），11．45（s，1H）。

2 討論

（1）以2－氯－6－甲基苯胺為原料，在吡啶的催化下與（E）－3－乙氧基丙烯酰氯反應得到化合物Ⅲ的過程中，轉化率高達99%，與文獻［5］比較，收率明顯提高。

（2）?；a(chǎn)物在以水為主的溶劑中與N－溴代丁二酰亞胺、硫脲經(jīng)“一鍋法”連續(xù)反應得到化合物Ⅴ的過程中，考察了1，4－二氧六環(huán)用量對反應的影響。實驗發(fā)現(xiàn)：如果溶劑全部用1，4－二氧六環(huán)，在低溫下反應體系粘稠；而以水為主要溶劑、加入少量1，4－二氧六環(huán)增溶時，反應效果較好。另外，如果一次性加入NBS，溶解性不好；分批加入可避免此問題，且反應較徹底。

3 結論

以2－氯－6－甲基苯胺為起始原料，在吡啶的催化下，以99%的轉化率得到?；a(chǎn)物Ⅲ；Ⅲ在以水為主的溶劑中與N－溴代丁二酰亞胺（NBS）、硫脲經(jīng)“一鍋法”連續(xù)反應得化合物Ⅴ；Ⅴ經(jīng)純化后與4，6－二氯－2－甲基嘧啶反應得化合物Ⅵ；Ⅵ與1－（2－羥乙基）哌嗪縮合得達沙替尼，總收率為71%。該合成方法條件溫和、反應步驟少、收率高。

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