• 
    

    
    

      99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

      擬南芥AtWNK9基因的定位及表達(dá)分析*

      2013-08-14 12:03:16趙小英謝敏敏賀熱情段桂芳王麗群李秀山林建中劉選明
      關(guān)鍵詞:蛋白激酶擬南芥激酶

      趙小英,謝敏敏,賀熱情,段桂芳,王麗群,李秀山,林建中,劉選明,2?

      (1.湖南大學(xué) 生物學(xué)院,植物功能基因組學(xué)與發(fā)育調(diào)控湖南省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,湖南 長沙 410082;2.湖南大學(xué) 化學(xué)生物傳感與計(jì)量學(xué)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,湖南 長沙 410082)

      WNK激酶(With no lysine kinase)是一種絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶,屬于蛋白激酶家族成員之一,因其家族成員在激酶功能域缺乏保守的賴氨酸而得名[1].該激酶家族成員在通常保守的位于激酶區(qū)域第二個(gè)亞結(jié)構(gòu)域缺乏一個(gè)賴氨酸殘基,動(dòng)物WNK激酶中賴氨酸被半胱氨酸所替代,在植物中常被天冬酰氨(N)或絲氨酸(S)替代,但激酶的生物活性沒有發(fā)生變化,因此表明WNK激酶是一種特殊的蛋白激酶[2].

      Nakamichi等在雙子葉植物擬南芥中克隆到植物中第一個(gè)WNK基因AtWNK1,隨后又成功分離到了AtWNK2-98個(gè)WNK基因,并發(fā)現(xiàn)At-WNK2,AtWNK4,AtWNK6涉及擬南芥晝夜節(jié)律的調(diào)控過程[3].AtWNK2,AtWNK5,AtWNK8 的T-DNA插入突變導(dǎo)致擬南芥早開花,AtWNK1的T-DNA插入突變表現(xiàn)出了晚花的表型[4].最新研究發(fā)現(xiàn),破壞AtWNK8能提高擬南芥對鹽和滲透壓力的抗性[5].目前,在單子葉植物水稻中發(fā)現(xiàn)7個(gè)WNK基因,其中OsWNK1被發(fā)現(xiàn)參與各種非生物脅迫如冷、熱、鹽、干旱脅迫等[6].Wang等在大豆中鑒定了一個(gè)根特異性的WNK同源基因,Gm-WNK1,它通過與ABA分解代謝相關(guān)的蛋白GmCYP707A1相互作用微調(diào)ABA的水平,從而調(diào)控大豆晚期側(cè)根的發(fā)育[7].隨后又發(fā)現(xiàn)GmWNK1能增強(qiáng)植物對NaCl和滲透壓的抗性[8].目前,有關(guān)擬南芥AtWNK9基因的功能尚處于未知狀態(tài),因此系統(tǒng)研究AtWNK9基因的功能對全面了解擬南芥WNK激酶的功能具有十分重要的意義.

      生物信息學(xué)作為研究過程中的一項(xiàng)技術(shù)和開發(fā)工具在核酸及蛋白質(zhì)序列分析及功能預(yù)測中發(fā)揮重要的作用.基因蛋白結(jié)構(gòu)與表達(dá)的生物信息學(xué)分析結(jié)果對后續(xù)基因功能研究有重要的指導(dǎo)意義[9].本研究采用生物信息學(xué)和生物學(xué)實(shí)驗(yàn)相結(jié)合的手段,對AtWNK9蛋白結(jié)構(gòu)、亞細(xì)胞以及基因表達(dá)情況進(jìn)行了分析,這將為進(jìn)一步研究該基因的功能奠定基礎(chǔ).

      1 材料與方法

      1.1 植物材料和載體

      擬南芥野生型Col-4為哥倫比亞生態(tài)型,大腸桿菌DH5α菌株和pA7-YFP載體均為本實(shí)驗(yàn)室保存.

      1.2 生物信息學(xué)分析

      運(yùn)用簡單模塊構(gòu)架搜索工具SMART(Simple Modular Architecture Research Tool)(http://smart.embl-h(huán)eidelberg.de/smart/)和NCBI網(wǎng)站提供的保守結(jié)構(gòu)域檢索工具CDART(Conserved Do-main Architecture Retrieval Tool)(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/Structure/)對 AtWNK9蛋白進(jìn)行保 守 結(jié) 構(gòu) 域 分 析[10-11];利 用 丹 麥 科 技 大 學(xué)(DTU)的CBS服務(wù)器上的NetPhos2.0Server程序(http://www.cbs.dtu.dk/services/NetPhos/)分析磷酸化位點(diǎn)[12];利用 WoLF PSORT 工具(http://wolfsort.seq.cbrc.jp)和 TAIR網(wǎng)站中提供的蛋白亞細(xì)胞定位數(shù)據(jù)庫SUBA(The SubCellular Proteomic Database)(http://suba2.plantenergy.uwa.edu.au/)預(yù)測蛋白質(zhì)亞細(xì)胞定位[13-14];通過TAIR網(wǎng)站中提供的 Arabidopsis eFP Browser鏈接(http://bbc.botany.utoronto.ca/efp/)分析At-WNK9基因的表達(dá)譜[15].利用植物Plant CARE在線分析工具(http://bioinformatics.psb.ugent.be/webtools/plantcare/)對AtWNK9基因上游1 000 bp的啟動(dòng)子順式作用元件進(jìn)行分析[16].

      1.3 35S::AtWNK9-YFP融合表達(dá)載體構(gòu)建

      以擬南芥野生型Col-4為材料,采用RT-PCR方法,首先提取總RNA并逆轉(zhuǎn)錄為cDNA,然后以此cDNA 為 模 板 ,利 用 引 物AtWNK9-YFP-F(ACGCGTCGACATGATGAACAATCTC AGCCATCTT),AtWNK9-YFP-R( GGACTAGTGT CTTCTTCGTCAGAG TCGTTT)(下劃線堿基部分分別為SalⅠ和SpeⅠ酶切序列),通過PCR擴(kuò)增得到AtWNK9目的基因的全長cDNA序列.采用酶切連接的克隆方法,將該片段連接到pA7-YFP載體中,構(gòu)建綠色熒光蛋白與AtWNK9基因融合表達(dá)的載體35S::AtWNK9-YFP.

      1.4 PEG介導(dǎo)的原生質(zhì)體轉(zhuǎn)化

      為確定AtWNK9基因在細(xì)胞中表達(dá)的具體部位,將上述構(gòu)建的35S::AtWNK9-YFP進(jìn)行原生質(zhì)體轉(zhuǎn)化.參照文獻(xiàn)[17]的方法,將未抽臺前的葉片約90片,切成1mm寬的長條(長度不定),置于500 mmol甘露醇溶液中.將細(xì)條撈出,置于含有纖維素酶和果膠酶的酶解液中,黑暗23℃,40~50r/min解析3h以制備原生質(zhì)體.取約10~20μg 35S::AtWNK9-YFP質(zhì)粒于1.5mL離心管中,隨后依次加入100μL的原生質(zhì)體和110μL PEG/Ca溶液,輕柔混勻.放置20~30min后,去除PEG,用W5溶液(154mM NaCl,125mM CaCl2,5mM KCl,2mM MES)終止反應(yīng),然后置于云孔板內(nèi).23℃ 黑暗下培養(yǎng)6~18h后,在熒光倒置顯微鏡下觀察和分析AtWNK9的亞細(xì)胞定位.

      1.5 脅迫處理

      擬南芥野生型Col-4種子經(jīng)深層(1% 次氯酸鈉10min,無菌水洗5次)消毒后,4℃ 春化3~4 d,然后播種在MS培養(yǎng)基上.放置在22~23℃培養(yǎng)箱連續(xù)白光培養(yǎng)12d后,用 ABA(100μM)[18]NaCl(300mM)[19]、葡萄糖(2%)[20]、熱(37 ℃)[21]、冷(4℃)[22]進(jìn)行處理,清水處理作為對照,在不同的時(shí)間點(diǎn)收取材料,液氮速凍后,于-80℃保存,用于后續(xù)的實(shí)時(shí)定量PCR分析.

      1.6 實(shí)時(shí)定量PCR分析

      采用 TRIGene(GenStar)提取總 RNA,按照Maxima? First Strand cDNA Synthesis Kit(Fermentas)試劑盒提供的方法,反轉(zhuǎn)錄合成cDNA.在定量PCR儀(Mx3 000P)上,按照SYBR Premix Ex TaqTM (Perfect Real Time)(TakaRa)定量試劑盒的說明進(jìn)行定量PCR.PCR反應(yīng)條件為:94℃預(yù)變性10min,94℃變性30s,57℃退火30s,72℃延伸30s,40個(gè)循環(huán).每個(gè)實(shí)驗(yàn)至少重復(fù)3次,持家基因ACTIN2作為分子內(nèi)標(biāo).本研究采用的定量PCR引物見表1.

      表1 AtWNK9定量PCR引物Tab.1 AtWNK9quantitative PCR primers

      2 結(jié) 果

      2.1 AtWNK9蛋白結(jié)構(gòu)分析

      運(yùn)用簡單模塊構(gòu)架搜索工具SMART和NCBI中的CDART軟件對AtWNK9蛋白進(jìn)行保守結(jié)構(gòu)域分析,發(fā)現(xiàn)AtWNK9在第25到第282個(gè)氨基酸區(qū)域,包含了一個(gè)保守的絲氨酸-蘇氨酸激酶催化結(jié)構(gòu)域(STYKc)和一個(gè)蛋白激酶催化結(jié)構(gòu)域(PKc)(圖1(a)),因此,AtWNK9被歸類為絲氨酸-蘇氨酸蛋白激酶家族.利用丹麥科技大學(xué)(DTU)的CBS服務(wù)器上的Net-Phos2.0Server程序?qū)tWNK9蛋白進(jìn)行磷酸化位點(diǎn)分析.從圖中可看出,AtWNK9蛋白氨基酸序列中的17個(gè)絲氨酸(S),2個(gè)蘇氨酸(Thr)和7個(gè)酪氨酸(Tyr)蛋白激酶磷酸化位點(diǎn)(圖1(b)).這說明AtWNK9具有自身磷酸化的特點(diǎn).

      圖1 AtWNK9蛋白保守結(jié)構(gòu)域及磷酸化位點(diǎn)預(yù)測分析Fig.1 Analysis of conserved domain and phosphorylation sites of AtWNK9protein

      2.2 AtWNK9基因亞細(xì)胞定位分析

      采用WoLF PSORT工具對AtWNK9的亞細(xì)胞定位進(jìn)行預(yù)測,得知AtWNK9定位在胞質(zhì)中;采用TAIR網(wǎng)站中提供的蛋白亞細(xì)胞定位數(shù)據(jù)庫SUBA進(jìn)行預(yù)測,得知該基因定位在細(xì)胞核中.為進(jìn)一步確定AtWNK9的亞細(xì)胞定位,我們采用PEG介導(dǎo)的原生質(zhì)體轉(zhuǎn)化方法[17]進(jìn)行了分析研究.

      首先,采用PCR擴(kuò)增,得到AtWNK9的全長cDNA序列,大小為1 400bp左右(圖2(a)).用限制性內(nèi)切酶SaIⅠ和SpeⅠ將該片段和pA7-YFP載體進(jìn)行雙酶切,分別得到大小為4 900左右和1 400 bp左右的酶切片段(圖2(b)).回收酶切片段,用T4 DNA連接酶進(jìn)行連接反應(yīng).將反應(yīng)液轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5α,然后對陽性克隆進(jìn)行PCR和雙酶切(HindⅢ和BamHⅠ)鑒定,PCR產(chǎn)物及酶切片段大小與預(yù)期片段大小相一致(圖2(c),(d)),表明成功構(gòu)建了35S::AtWNK9-YFP重組質(zhì)粒.隨后,以載體35S::YFP質(zhì)粒作為對照,將重組質(zhì)粒35S::At-WNK9-YFP轉(zhuǎn)化擬南芥原生質(zhì)體,在熒光倒置顯微鏡下觀察融合基因的表達(dá)情況(圖3).綠色熒光蛋白基因YFP在細(xì)胞的所有部位都高效表達(dá)(圖3(b)),融合基因AtWNK9-YFP則僅在細(xì)胞核中表達(dá)較強(qiáng)(圖3(d)),與蛋白亞細(xì)胞定位數(shù)據(jù)庫SUBA預(yù)測結(jié)果相一致,表明AtWNK9編碼核蛋白.

      圖2 35S::AtWNK9-YFP融合表達(dá)載體構(gòu)建Fig.2 35S::AtWNK9-YFPfusion expression vector construction

      圖3 AtWNK9基因在擬南芥原生質(zhì)體中的表達(dá)分析Fig.3 Expression analysis ofAtWNK9 in protoplast ofArabidopsis

      2.3 AtWNK9組織器官表達(dá)模式分析

      基因的時(shí)空表達(dá)模式可為預(yù)測和研究其生物學(xué)功能提供參考依據(jù).根據(jù)TAIR網(wǎng)站中eFP Browser連接提供的數(shù)據(jù),對AtWNK9基因在擬南芥不同組織器官中的表達(dá)譜進(jìn)行了分析整理(圖4(a)).AtWNK9基因在擬南芥植株的根、下胚軸、葉、花等各個(gè)組織器官中均有不同水平的表達(dá),在根中的表達(dá)量最高.此外,AtWNK9在不同部位的葉片、莖、花和花粉中的表達(dá)也存在一定的差異但表達(dá)水平都比較低(圖4(a)).為了進(jìn)一步確定AtWNK9基因在不同組織器官的表達(dá)模式,采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測了該基因在擬南芥根、蓮座葉、莖生葉、莖、花和果莢中的表達(dá)情況.從圖4(b)中可看出,AtWNK9在所有被檢測的組織器官中均有表達(dá),其中在根中的表達(dá)量最高,約為其它器官中的3~5倍,其次為莖.這與eFP Browser連接提供的數(shù)據(jù)基本一致,推測AtWNK9可能參與根的生長發(fā)育.

      圖4 AtWNK9基因在擬南芥不同組織器官中的表達(dá)Fig.4 Expression ofAtWNK9in different organs ofArabidopsis

      2.4 AtWNK9基因表達(dá)對非生物脅迫的響應(yīng)

      利用植物啟動(dòng)子順式作用元件分析網(wǎng)站Plant CARE在線分析了AtWNK9基因上游1 000bp的調(diào)控區(qū)域.結(jié)果發(fā)現(xiàn),AtWNK9基因的調(diào)控區(qū)域存在大量激素響應(yīng)與脅迫響應(yīng)相關(guān)的元件,包括赤霉素反應(yīng)元件(Gibberellin-Responsive Element,GARE)、熱脅迫響應(yīng)元件(HSE)、逆境和脅迫響應(yīng)元件(TC-rich-repeats)等順式作用元件.

      為了研究AtWNK9基因的表達(dá)是否響應(yīng)激素、逆境脅迫,實(shí)驗(yàn)中對12齡擬南芥幼苗分別進(jìn)行ABA、鹽、葡萄糖、熱、冷脅迫處理,采用實(shí)時(shí)定量PCR分析了AtWNK9基因的表達(dá)情況.結(jié)果如圖5所示,AtWNK9基因的表達(dá)受脅迫處理強(qiáng)烈誘導(dǎo),其中ABA的誘導(dǎo)效應(yīng)最明顯,AtWNK9的轉(zhuǎn)錄水平在ABA處理4h即達(dá)到峰值,為對照處理的8~9倍,在隨后的8h內(nèi)其表達(dá)量仍然維持較高的水平;AtWNK9基因?qū)aCl處理的響應(yīng)更快,在處理2h達(dá)到最大值,為對照處理的8~9倍左右,隨處理時(shí)間延長AtWNK9基因的表達(dá)量迅速下降,但仍為對照處理的2~3倍;AtWNK9對葡萄糖、熱、冷脅迫的響應(yīng)相對較弱,分別在葡萄糖處理4h,熱、冷處理6h達(dá)到最大值,為對照處理的5倍、3倍和6倍;AtWNK9對水處理(對照實(shí)驗(yàn))幾乎沒有響應(yīng),說明AtWNK9基因?yàn)橹参锩{迫反應(yīng)相關(guān)基因.

      圖5 脅迫處理擬南芥幼苗中AtWNK9基因表達(dá)的實(shí)時(shí)定量PCR分析Fig.5 Real-time quantitative PCR analysis ofAtWNK9gene expression in stress-treatedArabidopsisseedling

      3 討 論

      對基因的生物信息學(xué)分析,可為預(yù)測其生物學(xué)功能提供參考.本研究首先利用生物信息學(xué)的手段對AtWNK9的核苷酸及蛋白質(zhì)序列進(jìn)行了保守結(jié)構(gòu)域和磷酸化位點(diǎn)分析,發(fā)現(xiàn)AtWNK9基因包含與蛋白激酶催化結(jié)構(gòu)域(PKc_)和絲氨酸-蘇氨酸催化結(jié)構(gòu)域(STYKc)具有高度相似性的結(jié)構(gòu)域,且存在多個(gè)磷酸化位點(diǎn),與WNK激酶家族中其他成員的結(jié)構(gòu)特征一致[23],因此,AtWNK9具有自身磷酸化特點(diǎn),這還需作進(jìn)一步研究.

      基因的表達(dá)部位及表達(dá)模式通常與基因的功能有緊密的聯(lián)系.結(jié)合生物信息學(xué)分析、原生質(zhì)體轉(zhuǎn)化及熒光定位分析,得知AtWNK9在細(xì)胞核中表達(dá),說明AtWNK9基因編碼核蛋白.此外,根據(jù)eFP Browser提供的數(shù)據(jù)及實(shí)時(shí)定量PCR分析,證明了AtWNK9基因在擬南芥根中高效表達(dá),這與Wang等的RT~PCR實(shí)驗(yàn)結(jié)果相吻合[4],說明AtWNK9可能參與根的生長發(fā)育.

      利用Plant CARE對AtWNK9啟動(dòng)子順式作用元件進(jìn)行分析,結(jié)果顯示:啟動(dòng)子區(qū)域存在大量激素響應(yīng)與脅迫響應(yīng)相關(guān)元件.通過激素和脅迫處理發(fā)現(xiàn),AtWNK9基因的表達(dá)受ABA,NaCl等非生物脅迫強(qiáng)烈誘導(dǎo),說明AtWNK9為非生物脅迫反應(yīng)相關(guān)基因.這為進(jìn)一步研究AtWNK9基因的生物學(xué)功能奠定了良好基礎(chǔ).

      [1] 張翀,陳楠.WNK激酶的研究進(jìn)展[J].細(xì)胞生物學(xué)雜志,2008(6):711-715.ZHANG Chong,CHEN Nan.Progress in WNK kinases[J].Chinese Journal of Cell Biology,2008(6):711-715.(In Chinese)

      [2] 呂晶玉.WNK基因表達(dá)的研究[D].沈陽:中國醫(yī)科大學(xué)臨床流行病學(xué)系,2003.

      [3] NAKAMICHI N,MURAKAMI-KOJIMA M,SATO E,et al.Compilation and characterization of a novel WNK family of protein kinases in Arabiodpsis thaliana with reference to circadian rhythms[J].Biosci Biotechnol Biochem,2002,66(11):2429-2436.

      [4] WANG Y,LIU K,LIAO H,etal.The plant WNK gene family and regulation of flowering time in Arabidopsis[J].Plant Biol(Stuttg),2008,10(5):548-562.

      [5] ZHANG B,LIU K,ZHENG Y,etal.Disruption of At-WNK8enhances tolerance of Arabidopsis to salt and osmotic stresses via modulating proline content and activities of catalase and peroxidase[J].Int J Mol Sci,2013,14(4):7032-7047.

      [6] KUMAR K,RAO K P,BISWAS D K,etal.Rice WNK1is regulated by abiotic stress and involved in internal circadian rhythm[J].Plant Signal Behav,2011,6(3):316-320.

      [7] WANG Y,SUO H,ZHENG Y,etal.The soybean root-specific protein kinase GmWNK1regulates stress-responsive ABA signaling on the root system architecture[J].Plant J,2010,64(2):230-242.

      [8] WANG Y,SUO H,ZHUANG C,etal.Overexpression of the soybean GmWNK1altered the sensitivity to salt and osmoticstress in Arabidopsis[J].J Plant Physiol,2011,168(18):2260-2267.

      [9] XIANG L,GUO X,NIU Y Y,etal.Full-length cDNA cloning and bioinformatics analysis of PnUGT1gene in Panax notoginseng[J].Yao Xue Xue Bao,2012,47(8):1085-1091.

      [10] MARCHER-BAUER A,ZHENG C,CHITSAZ F,etal.CDD:conserved domains and protein three-dimensional structure[J].Nucleic Acids Res,2013,41(1):348-352.

      [11] GEER L Y,DOMRACHEV M,LIPMAN D J,etal.CDART:protein homology by domain architecture[J].Genome Res,2002,12(10):1619-1623.

      [12] BLOM N,GAMMELTOFT S,BRUNAK S.Sequence and structure-based prediction of eukaryotic protein phosphorylation sites[J].J Mol Biol,1999,294(5):1351-1362.

      [13] HORTON P,PARK K J,OBAYASHI T,etal.WoLF PSORT:protein localization predictor[J].Nucleic Acids Res,2007,35(Web Server issue):W585-W587.

      [14] HEAZLEWOOD J L,VERBOOM R E,TONTI-FILIPPINI J,etal.SUBA:the Arabidopsis subcellular database[J].Nu-cleic Acids Res,2007,35(Database issue):D213-D218.

      [15] SCHMID M,DAVISON T S,HENZ S R,etal.A gene expression map of Arabidopsis thaliana development[J].Nat Genet,2005,37(5):501-506.

      [16] LESCOT M,DEHAIS P,THIJS G,etal.PlantCARE,a database of plant cis-acting regulatory elements and a portal to tools for in silico analysis of promoter sequences[J].Nucleic Acids Res,2002,30(1):325-327.

      [17] YU F,QIAN L,NIBAU C,etal.FERONIA receptor kinase pathway suppresses abscisic acid signaling in Arabidopsis by activating ABI2phosphatase[J].Proc Natl Acad Sci U S A,2012,109(36):14693-14698.

      [18] CHAN Z.Expression profiling of ABA pathway transcripts indicates crosstalk between abiotic and biotic stress responses in Arabidopsis[J].Genomics,2012,100(2):110-115.

      [19] BARRERO J M,RODRIGUEZ P L,QUESADA V,etal.Both abscisic acid (ABA)-dependent and ABA-independent pathways govern the induction of NCED3,AAO3and ABA1 in response to salt stress[J].Plant Cell Environ,2006,29(10):2000-2008.

      [20] LI Z Y,XU Z S,CHEN Y,etal.A novel role for Arabidopsis CBL1in affecting plant responses to glucose and gibberellin during germination and seedling development[J].PLoS One,2013,8(2):e56412.

      [21] CHO S K,KIM J E,PARK J A,etal.Constitutive expression of abiotic stress-inducible hot pepper CaXTH3,which encodes a xyloglucan endotransglucosylase/hydrolase homolog,improves drought and salt tolerance in transgenic Arabidopsis plants[J].FEBS Lett,2006,580(13):3136-3144.

      [22] KIM S J,KIM W T.Suppression of Arabidopsis RING E3 ubiquitin ligase AtATL78increases tolerance to cold stress and decreases tolerance to drought stress[J].FEBS Lett,2013,587(16):2584-2590.

      [23] XU B E,MIN X,STIPPEC S,etal.Regulation of WNK1by an autoinhibitory domain and autophosphorylation[J].J Biol Chem,2002,277(50):48456-48462.

      猜你喜歡
      蛋白激酶擬南芥激酶
      擬南芥:活得粗糙,才讓我有了上太空的資格
      蚓激酶對UUO大鼠腎組織NOX4、FAK、Src的影響
      蚓激酶的藥理作用研究進(jìn)展
      解析參與植物脅迫應(yīng)答的蛋白激酶—底物網(wǎng)絡(luò)
      科學(xué)(2020年2期)2020-08-24 07:57:00
      尿黑酸對擬南芥酪氨酸降解缺陷突變體sscd1的影響
      兩種LED光源作為擬南芥生長光源的應(yīng)用探究
      擬南芥干旱敏感突變體篩選及其干旱脅迫響應(yīng)機(jī)制探究
      黏著斑激酶和踝蛋白在黏著斑合成代謝中的作用
      蛋白激酶Pkmyt1對小鼠1-細(xì)胞期受精卵發(fā)育的抑制作用
      蛋白激酶KSR的研究進(jìn)展
      阳江市| 冕宁县| 辽阳市| 安岳县| 绍兴市| 龙井市| 蒲江县| 休宁县| 略阳县| 建德市| 家居| 牡丹江市| 云安县| 嘉禾县| 胶南市| 红河县| 汾西县| 烟台市| 四子王旗| 泉州市| 怀集县| 德安县| 三穗县| 顺义区| 新沂市| 鲁山县| 南京市| 博白县| 葫芦岛市| 白城市| 长治市| 游戏| 乳源| 东辽县| 安泽县| 建瓯市| 靖江市| 承德县| 盈江县| 商丘市| 绥阳县|