不同產(chǎn)地的香附及香附炭揮發(fā)油成分分析

劉亞萍 ，于 生 ，陳佩東

(1.江蘇省中醫(yī)院，江蘇 南京 210029;2.南京中醫(yī)藥大學，江蘇 南京 210046)

香附為莎草科植物莎草 Cyperus rotundus L.的干燥根莖，原名莎草，始載于《名醫(yī)別錄》，列為中品，《唐本草》始稱香附子，《本草綱目》列入草部芳草類，名為莎草香附子。香附具行氣解郁、調(diào)經(jīng)止痛之功效，對痙攣、胃病等有治療作用[1]。香附中的揮發(fā)油成分主要含有倍半萜類化合物[2－4]，而不同產(chǎn)地的香附及其炮制品中的揮發(fā)油含量差異較大[5]，對臨床用藥產(chǎn)生了較大影響。筆者采用水蒸氣蒸餾法對不同產(chǎn)地的香附及其炭品分別進行提取，并采用氣相色譜－質(zhì)譜(GC－MS)聯(lián)用技術(shù)對揮發(fā)油成分進行分析，以期對香附的臨床應用及質(zhì)量控制提供依據(jù)。

1 儀器與試藥

Agilent 6890 GC－MS型氣質(zhì)聯(lián)用儀。香附藥材分別購自江蘇常州(批號為100326)、安徽亳州(批號為110428)、河南開封(批號為110705)，經(jīng)南京中醫(yī)藥大學吳啟南教授鑒定為莎草科植物香附的干燥根莖;香附炭為自制，按2010年版《中國藥典(一部)》要求，取凈香附，置鍋內(nèi)用武火炒至表面焦黑色。所用試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 香附揮發(fā)油的提取

稱取不同產(chǎn)地香附及其炭品各100 g，加水800 mL，按2010年版《中國藥典(一部)》附錄ⅩD揮發(fā)油測定法(甲法)提取揮發(fā)油，取出揮發(fā)油，無水硫酸鈣吸水干燥，加入2倍于揮發(fā)油量的無水乙醇進行保存，用揮發(fā)油提取器提取。結(jié)果見表1。

表1 6份樣品中所測得揮發(fā)油統(tǒng)計

圖1 江蘇香附(生品)質(zhì)譜圖

圖2 江蘇香附(炭品)質(zhì)譜圖

2.2 GC－MS分析

2.2.1 色譜質(zhì)譜條件

色譜柱柱溫升溫程序:100℃保持1 min，以1℃ /min升溫至180℃，保持1 min;繼續(xù)以6℃ /min升溫至220℃，保持5 min。進樣口溫度220℃，檢測器(FID)溫度250℃。載氣:高純氮氣，流量 1.0 mL/min，空氣 400 mL/min，氫氣 30 mL/min。分流進樣，分流比 50 ∶1，進樣量 1.0 μL。EI離子流;電子能量 70 eV;質(zhì)量掃描100.0～550.0;四極桿溫度150℃;離子源230℃;離子倍增電壓1 500 V;GC－MS接口溫度280℃。

2.2.2 測定與結(jié)果

6份香附樣品的揮發(fā)油提取物經(jīng)氣相色譜石英毛細管柱分離，質(zhì)譜儀記錄質(zhì)譜圖，得到GC－MS總離子流圖，見圖1和圖2。將制得的供試品分別采用自動進樣注入GC－MS，導出數(shù)據(jù)，各樣品中所測得揮發(fā)油成分差異明顯。由圖譜可以看出，每個產(chǎn)地的香附及其炭品間各有異同，利用各色譜峰相應的質(zhì)譜圖經(jīng)計算機譜庫檢索確定其化學結(jié)構(gòu)，并用峰面積歸一化法測定其相對含量，其中差異較大的19種成分檢測結(jié)果見表2。

3 討論

香附揮發(fā)油中已鑒定出140多種成分，包括單萜、倍半萜及其氧化物，其中α－香附酮是香附揮發(fā)油的主要成分[6－8]。本研究中江蘇香附生品的揮發(fā)油成分是82種，經(jīng)炮制后減至54種，安徽香附炮制前后揮發(fā)油種類分別是73種和51種，河南產(chǎn)香附炮制前后揮發(fā)油種類分別是81種和77種。其中江蘇和河南產(chǎn)香附中香附酮含量分別為19.0%和17.0%，而安徽產(chǎn)香附生品的α－香附酮的相對含量僅為9.3%。江蘇和安徽產(chǎn)香附香附烯分別為5.6%和4.6%，而河南產(chǎn)香附的揮發(fā)油中不含香附烯成分。炮制后香附揮發(fā)油中的香附烯的相對含量也有減少，特別是β－蛇床烯成分，經(jīng)過炒炭炮制后消失，而有的成分本來在生品中沒有，炮制后卻產(chǎn)生了。在臨床使用中應加強藥材質(zhì)量的檢測，而香附炒炭前后化學成分種類和含量差異可能與香附和香附炭臨床功效差異有關(guān)，也可能是其生行熟止作用的物質(zhì)基礎(chǔ)。

表2 不同產(chǎn)地、炮制品香附主要化學成分的比較[含量(%)]

[1]Dassanayake M，F(xiàn)osberg FR.A Revised Handbook of theFlora of Ceylon，part V[M].AA Balkema:Rotterdam，1985:181.

[2]Ohira S，Hasegawa T，Hyashi KI，et al.Sesquiterpenoids from Cyperus rotundus.Phytochemistry[J].1998，47(8):1 577 － 1 581.

[3]Priya RM，Padmakumari KP.HPTLC and reverse phase HPLC methods for the simultaneous quantification and in vitro screening of antioxidant potential of isolated sesquiterpenoids from the rhizomes of Cyperusrotundus[J].J Chromatogr B Analyt Technol Biomed Life Sci，2012，904(1):22 － 28.

[4]Yang JL，Shi YP.Structurally diverse terpenoids from the rhizomes of Cyperus rotundus L[J].Planta Med，2012，78(1):59 － 64.

[5]侯立靜，吳麗麗，李英霞.不同產(chǎn)地香附和醋炙香附中α－香附酮含量測定[J].陜西中醫(yī)，2011，32(4):480 －481.

[6]Sonwa MM，Konig WA.Chemical study of the essential oil of Cyperus rotundus[J].Phytochemistry，2001，58(5):799 － 810.

[7]Lawal OA，Oyedeji AO.Chemical Composition of the Essential Oils of Cyperus rotundus L.from South Africa[J].Molecules，2009，14(8):2 909－2 917.

[8]Tam CU，Yang FQ，Zhang QW，et al.Optimization and comparison of three methods for extraction of volatile compounds from Cyperus rotundus evaluated by gas chromatography－mass spectrometry[J].Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis，2007，44(2):444 － 449.