廣州市青春期女生血清鄰苯二甲酸二丁酯水平與初潮年齡相關(guān)性研究的初步觀察

何展明馬蒙蒙陳清譚炳炎

廣州市青春期女生血清鄰苯二甲酸二丁酯水平與初潮年齡相關(guān)性研究的初步觀察

何展明1★馬蒙蒙2陳清2譚炳炎3

目的 了解廣州市發(fā)育正常青春期女生（12～15歲）血清中鄰苯二甲酸二丁酯（DBP）暴露水平，并初步探討其與初潮年齡的關(guān)系。 方法 2012年3月，選擇廣州市白云區(qū)某中學(xué)30名健康體檢的女生作為研究對象，采集靜脈血樣本，利用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用（GC-MS）分析方法檢測其血清中DBP水平，以廣東地區(qū)漢族女孩2005年初潮年齡的均值12.4歲為準，將調(diào)查對象分為初潮年齡＜12.4歲組和初潮年齡≥12.4歲組，比較不同初潮年齡組女生血清DBP檢出率及濃度分布的差異。 結(jié)果 30例女生的血樣中，19例可檢出DBP，檢出率為63.3%，DBP的濃度范圍為0～740 μg/L，濃度中位數(shù)為60 μg/L，且無年齡差異，其中初潮年齡＜12.4歲組檢出率為75.0%，初潮年齡≥12.4歲組檢出率為86.4%，且前者血清DBP濃度分布的平均秩次高于后者，但兩組檢出率及濃度分布差異均無統(tǒng)計學(xué)意義。 結(jié)論 30名發(fā)育正常青春期女生血清DBP檢出率和濃度中位數(shù)均處于較高水平，但無年齡差異，尚不能說明青春期女生血清DBP檢出率及濃度分布與初潮年齡的相關(guān)性，但值得進一步加大樣本量研究。

鄰苯二甲酸二丁酯；青春期女生；血清；氣相色譜-質(zhì)譜法

鄰苯二甲酸酯（phthalates esters，PAEs）主要作為增塑劑，添加到高分子聚合物如聚氯乙烯（polrvinyl chloride，PVC）中以增強材料的柔韌性和拉伸性，涉及食品加工，裝修材料，兒童玩具，嬰兒用品，個人護理產(chǎn)品以及醫(yī)學(xué)用途等。PAEs在適當?shù)臈l件下（如加熱）會從材料中緩慢浸出、遷移或蒸發(fā)入室內(nèi)空氣或大氣，飲用水，食品以及其它介質(zhì)中[1]，造成人類生活環(huán)境的普遍污染。美國有毒物質(zhì)和疾病登記機構(gòu)（Agency for Toxic Substances and Disease Registry，ATSDR）[2]報告指出布丁、棒冰、華夫餅、雞蛋蔬菜漢堡的食品包裝中均檢出鄰苯二甲酸二丁酯（Di-nbutyl phthalates，DBP），最高為5 860 mg/kg。PAEs可通過包括消化道、呼吸道、皮膚、靜脈和宮內(nèi)擴散在內(nèi)的多種途徑進入人體并分解成相應(yīng)的代謝產(chǎn)物，具有抗雄激素作用和可能的類雌激素樣作用，是一類公認的環(huán)境內(nèi)分泌干擾物（endocrine disrupting chemicals，EDCs），能夠造成機體內(nèi)分泌、生殖功能的改變，處于生長發(fā)育期的兒童尤為敏感[3]。月經(jīng)初潮是女性性功能發(fā)育的最重要的指標，初潮年齡的早晚反映了青春期性功能發(fā)育的早晚。為探討DBP是否影響女孩的性發(fā)育，本研究選擇廣州市某中學(xué)30名女生作為研究對象，利用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用（gas chromatography-mass spectrometry，GC-MS）的分析方法檢測其血清中DBP水平并探討其與初潮年齡的相關(guān)性。

1 對象與方法

1.1 研究對象及采樣

按目的抽樣法選取2012年2月廣州市白云區(qū)某中學(xué)健康體檢的無超重、肥胖、發(fā)育不良、遺傳病、代謝性疾病、長期服藥等因素的女生作為研究對象，共30人，年齡范圍12～15歲，中位數(shù)為12歲（單樣本KS擬合優(yōu)度檢驗顯示年齡不服從正態(tài)分布），其中已有月經(jīng)初潮者17人，尚未月經(jīng)初潮者13人。

早晨空腹靜脈采血5 mL，用玻璃針筒和玻璃試管采樣和收集，不抗凝，常溫存放，送回檢驗室后冷藏-10℃左右保存。

1.2 氣相色譜-質(zhì)譜分析

1.2.1 儀器與試劑

儀器：QP2010 Plus型氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀，N-EVAP型氮吹儀，Synergy UV型超純水系統(tǒng)，漩渦振蕩器，離心機。

試劑：DBP標準品（農(nóng)殘級），正己烷（分析純），并配置成標準儲備液待用，于-4℃冰箱中保存，臨用時稀釋。

1.2.2 定性及定量分析

用DBP 標準品測定其保留時間，樣品的定性分析采用與標準品保留時間相對照的方法進行。樣品處理后上機分析，根據(jù)SIM 模式掃描定量離子149 m/z所得的離子峰面積與樣品的標準曲線相比較，通過計算得出樣品中含DBP的實際濃度。DBP標準品掃描圖譜保留時間為5.46 min。

1.2.3 標準曲線繪制

取正常人血漿6份，每份0.5 mL，分別加入DBP標準品0、0.05、0.25、1.0、2.5、5 μg，使之成為濃度為0、0.1、0.5、2.0、5.0、10.0 μg/mL的系列標準。按樣品處理方法處理后進樣分析。以149 m/z離子峰面積與濃度進行回歸處理。

1.3 統(tǒng)計方法

將GC-MS法所測得的血樣DBP的實際濃度，連同體檢表上登記的學(xué)生的出生日期、初潮日期、身高、體重等人口學(xué)信息錄入SPSS13.0 進行數(shù)據(jù)分析，以體檢日期（2012年2月27日）為準，計算出學(xué)生年齡、初潮年齡及BMI值，使用秩和檢驗分析不同年齡組以及不同初潮年齡組DBP濃度分布的差異，用t檢驗比較不同初潮年齡組人口學(xué)信息的差異，使用χ2檢驗確定不同年齡組及不同初潮年齡組DBP的檢出率是否存在差別，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 DBP標準曲線

DBP標準曲線為：Y（mg/L）=1.6×10-4X-0.077，r=0.9996。在本實驗條件下，HP-5毛細管柱對DBP的最低檢出濃度為0.05 μg/mL。標準曲線和樣品掃描色譜圖見圖1、圖2。

圖1 DBP標準曲線SIM掃描色譜圖（保留時間：5.46 min）Figure 1 The standard curve of DBP SIM scanningchromatogram (retention time: 5.46 min)

圖2 血清樣品SIM掃描色譜圖（保留時間：5.46 min）Figure 2 Serum samples of SIM scanning chromatogram (retention time: 5.46 min)

30例血清樣品中，19例可檢出DBP，檢出率為63.3%，DBP的濃度中位數(shù)為60 μg/L根據(jù)研究對象的年齡特征，將其分為兩組（12歲和13～15歲），全部樣品及不同年齡組血清DBP 的濃度范圍、中位數(shù)（M）及檢出率見表1。從表中可看出，13～15歲組血清DBP濃度中位數(shù)及檢出率均高于12歲組，但利用兩獨立樣本秩和檢驗和χ2檢驗比較組間差異，結(jié)果顯示差異無統(tǒng)計學(xué)顯著性（P分別為0.808和0.466）。

2.3 不同初潮年齡組女生血清DBP檢出率及濃度分布的差異

2.3.1 初潮年齡組分組依據(jù)

有調(diào)查顯示[4]，廣東地區(qū)漢族女孩2005年初潮年齡的均值為12.4歲，因此本研究據(jù)此將調(diào)查對象分為兩組，初潮年齡＜12.4歲，提示青春期性功能發(fā)育時間在正常范圍內(nèi)但偏早；初潮年齡≥12.4歲，提示青春期性功能發(fā)育時間在正常范圍內(nèi)但偏晚或等于均值。本研究調(diào)查對象涉及到已有月經(jīng)初潮者（17人）和尚未月經(jīng)初潮者（13人），其中已有月經(jīng)初潮者的初潮年齡范圍為10.8～14.0歲，均值為12.2歲，尚未月經(jīng)初潮者的預(yù)期初潮年齡以體檢日期為準估算，均大于12.4歲。因此初潮年齡＜12.4歲組8人，初潮年齡≥12.4歲組22人。

2.3.2 不同初潮年齡組女生人口學(xué)特征比較

利用兩獨立樣本t檢驗比較兩個初潮年齡組女生的年齡、身高、體重、BMI值是否存在統(tǒng)計學(xué)差異，由表2可知，兩個初潮年齡組女生的年齡和BMI值無顯著性差異（P＞0.05），而身高和體重存在顯著性差異（P＜0.05），且初潮年齡＜12.4歲組身高和體重均大于另一組。

表2 不同初潮年齡組女生人口學(xué)特征比較（±s）Table 2 Compared of demographic characteristics at different menarche age groups（x±s）

表2 不同初潮年齡組女生人口學(xué)特征比較（±s）Table 2 Compared of demographic characteristics at different menarche age groups（x±s）

*表示經(jīng)t檢驗，P＜0.05

項目初潮年齡（歲）P值＜12.4（N=8）≥12.4（N=22）年齡（歲）12.60±0.712.4±0.70.342身高（cm）158.0±4.2152.0±6.00.015*體重（kg）42.9±4.438.5±4.20.022*BMI（kg/m2）17.20±1.9816.50±1.710.484

2.3.3 不同初潮年齡組女生血清DBP檢出率及濃度分布的差異

利用χ2檢驗比較不同初潮年齡組女生血清DBP檢出率的差異，結(jié)果顯示初潮年齡＜12.4歲組檢出率為75%，初潮年齡≥12.4歲組檢出率為86.4%，兩組檢出率差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P=0.672）。利用兩獨立樣本秩和檢驗對不同初潮年齡組DBP濃度分布進行比較，結(jié)果顯示初潮年齡＜12.4歲組血清DBP濃度的平均秩次（15.63）高于初潮年齡≥12.4歲組（15.45），但差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P=0.962），結(jié)果見表3。

示蹤劑通常情況選取與工作介質(zhì)互溶的NaCl或KCl[6]，本次模擬采用NaCl作為示蹤劑，其相關(guān)屬性如表1所示。

表1 全部樣品及不同年齡組血清DBP濃度分布Table 1 All the samples and the concentrations distribution of serum DBP in different age group

3 討論

3.1 30名中學(xué)女生血清DBP水平

國外關(guān)于人群血清DBP水平的文獻報道較少，本研究采用GC-MS方法分析30名發(fā)育正常青春期女生（12～15歲）血清DBP水平，檢出率為63.3%（19/30），濃度中位數(shù)為60 μg/L，低于Colón等[5]在PT女童中測定的水平（115 μg/L），但顯著高于喬麗麗[6]和李玲[7]等報告的數(shù)值（差3個數(shù)量級）。

可能有兩個方面的原因造成結(jié)果的差異，一方面可能與本研究采樣地點的選取有關(guān)，被調(diào)查的中學(xué)位于廣州市白云區(qū)太和鎮(zhèn)，處于城鄉(xiāng)結(jié)合處，且研究對象基本上為本鎮(zhèn)居民，周邊塑料機械廠、服裝廠、包裝制品廠、制鞋廠等與塑料橡膠相關(guān)的制造業(yè)密集，使得該地區(qū)環(huán)境本底（大氣，水，土壤）中有較高濃度的PAEs負荷，因此在女童血清中檢出較高水平的DBP。另一方面，不同研究所使用的分析方法、操作條件以及質(zhì)控效果的不同也會對結(jié)果造成影響，使得相互之間的可比性降低。例如在Colón等[5]的研究中，研究者分別選用GC-MS方法的全掃描和SIM兩種模式對PT組的34～41號樣品進行分析，發(fā)現(xiàn)SIM模式具有更高的選擇性和較低的檢測和定量限，使得檢出率和檢出的濃度值與全掃描模式相比都有所增加。

此外，由于塑料制品的廣泛使用，本研究利用正常人血清加入標準品配置成標準溶液來繪制標準曲線，雖然扣除了空白血清的背景值，但在采血和分析過程（如空氣中的塑料粉塵，氣相色譜進樣瓶使用的橡膠隔片等）中仍然無法避免潛在的樣品污染，可能對實驗結(jié)果造成一定的影響，盡管如此，由于空白血清的采集和分析條件全部與樣品保持一致，這在一定程度上減小了影響的程度，提高了結(jié)果的可靠性。

另外，對不同年齡組血清DBP水平及檢出率進行比較，發(fā)現(xiàn)13～15歲組血清DBP濃度中位數(shù)和檢出率均高于12歲組，因為樣本量較小，所以未能發(fā)現(xiàn)有無統(tǒng)計學(xué)差異，但提示高年齡組血清DBP水平和檢出率可能高于低年齡組，確切結(jié)論尚需更大樣本和年齡跨度的人群調(diào)查予以證明。

3.2 青春期前及青春期女生PAEs暴露水平與性發(fā)育的關(guān)系

EDCs是環(huán)境中存在的一類天然或人工合成的化學(xué)物，它們能夠模仿或阻斷激素，從而改變機體內(nèi)正常的激素水平和內(nèi)分泌功能。PAEs是公認的EDCs，主要表現(xiàn)為抗雄激素效應(yīng)[2]。很多動物毒理學(xué)試驗試圖揭示PAEs暴露與雌性生殖系統(tǒng)效應(yīng)的關(guān)系。

在本研究中，以廣東地區(qū)漢族女孩2005年初潮年齡的均值12.4歲為準，將調(diào)查對象分為兩組（初潮年齡＜12.4歲組和初潮年齡≥12.4歲組），利用χ2檢驗比較不同初潮年齡組女生血清DBP檢出率的差異，結(jié)果顯示初潮年齡＜12.4歲組檢出率為75%，初潮年齡≥12.4歲組檢出率為86.4%，且前者血清DBP濃度的平均秩次（15.63）高于后者（15.45），提示初潮年齡越早，血清DBP檢出率及濃度越高，但兩組檢出率及濃度分布的差異均無統(tǒng)計學(xué)意義，因此尚不能說明青春期女生血清DBP檢出率及濃度分布與初潮年齡的相關(guān)性，而月經(jīng)初潮是女性性功能發(fā)育的最重要的指標，主要由雌激素引發(fā)，初潮年齡的早晚反映了青春期性功能發(fā)育的早晚，因此本研究尚不能證明PAEs暴露與女生青春期發(fā)育的相關(guān)性，尚需更大樣本量和初潮年齡跨度的人群研究。

本研究未能證實PAEs暴露與性發(fā)育無相關(guān)性，筆者認為有以下可能的解釋或假設(shè)：（1）與近年來動物毒理學(xué)試驗所觀察到的結(jié)果一致，PAEs在體內(nèi)條件下可能并沒有顯著的臨床擬雌激素效應(yīng)，而EDCs主要表現(xiàn)為抗雄激素效應(yīng)。（2）與PT和CPP產(chǎn)生機制有關(guān)。PT是不完全性中樞性性早熟的一種，屬CPP的變異，是HPG軸的部分提前激活，多呈自限病程，大多數(shù)患兒乳房可于數(shù)月內(nèi)自行消退。但近年研究發(fā)現(xiàn)部分PT患兒可轉(zhuǎn)化為CPP，轉(zhuǎn)化率為14.0%～18.4%，轉(zhuǎn)化率因發(fā)病年齡而異，2歲以后起病者轉(zhuǎn)化的風(fēng)險性增加，因此需定期隨訪[8]。PAEs可能通過某種機制導(dǎo)致HPG軸的部分活化而引起自限性的PT而不引起進展性的CPP，而這種機制可能與類雌激素效應(yīng)無關(guān)。（3）臺灣的吳喻敏[9]關(guān)于PAEs暴露和Kisspeptin-54的釋放與女生性發(fā)育關(guān)系研究表明，PAEs可能通過刺激Kisspeptin-54的釋放影響女生青春期的啟動，并且涉及到HPG軸的活化，筆者認為這有可能成為研究PAEs與青春期性發(fā)育關(guān)系的一個新的切入點。本研究雖然因為樣本量小而未能確定DBP與女孩青春期發(fā)育的關(guān)系，但是結(jié)果仍提示DBP可能與女孩青春期發(fā)育有關(guān)。

表3 不同初潮年齡組女生血清DBP檢出率及濃度分布的差異Table 3 DBP detection rate and concentration distribution in different menarche age groups

3.3 進一步研究的建議

3.3.1 本研究的局限性

本研究屬于橫斷面調(diào)查，DBP是非持久性化學(xué)物，在體內(nèi)迅速被水解為DMP及其葡糖苷酸結(jié)合物，進而從尿液排出，消除半衰期小于24 h[10]， 而暴露的測量僅依賴于單次采血，且不清楚采樣對象暴露來源相對貢獻的大小（不同暴露來源的接觸途徑不同，DBP水解和吸收率不同），這就使得血清DBP水平在個體內(nèi)以及個體間存在較大的變異，盡管在本研究中兩組間的差異并不顯著，這種變異可能導(dǎo)致研究組與對照組的差異，形成虛假關(guān)聯(lián)，影響結(jié)果評價。

本研究的研究對象雖然涵蓋已有月經(jīng)初潮者和尚未月經(jīng)初潮者，但均屬正常女生，為了探究血清DBP水平與初潮年齡的相關(guān)性，將研究對象以廣東地區(qū)漢族女孩2005年初潮年齡的均值12.4歲分為兩組，但初潮年齡跨度不大，且尚未月經(jīng)初潮者的初潮年齡不易確定，只能粗略估計，可能使研究對象缺乏代表性，這一定程度上影響了比較的結(jié)果。

由于經(jīng)費的限制，本研究樣本量較?。?0例），結(jié)果顯示13～15歲組血清DBP濃度中位數(shù)和檢出率均高于12歲組，初潮年齡＜12.4歲組血清DBP濃度的平均秩次（15.63）高于初潮年齡≥12.4歲組（15.45）且檢出率前者為75%，后者為86.4%，但均無統(tǒng)計學(xué)差異。推知我們招募的研究對象可能不足以發(fā)現(xiàn)不同年齡組及不同初潮年齡組間PAEs水平的差異。

兩個初潮年齡組女生的年齡和BMI值無顯著性差異，而身高和體重存在顯著性差異，且初潮年齡＜12.4歲組身高和體重均大于另一組，而文獻顯示[5]初潮年齡與女性的營養(yǎng)狀況相關(guān)，可能使得初潮年齡＜12.4歲組檢出率（75%）高于初潮年齡≥12.4歲組（86.4%）無統(tǒng)計學(xué)差異，這一定程度上干擾了PAEs與初潮年齡的真實關(guān)聯(lián)。

不同初潮年齡組女生血清DBP檢出率及濃度分布的差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P分別為0.672和0.962），因此尚不能說明青春期女生血清DBP檢出率及濃度分布與初潮年齡的相關(guān)性，而月經(jīng)初潮是女性性功能發(fā)育的最重要的指標，初潮年齡的早晚反映了青春期性功能發(fā)育的早晚，因此本研究尚不能證明暴露PAEs與女生性發(fā)育的相關(guān)性。今后的研究中應(yīng)當根據(jù)橫斷面調(diào)查的需要擴大樣本量，以尿液中幾種PAEs代謝物作為暴露生物學(xué)標志物，進行更大規(guī)模的人群PAEs暴露水平監(jiān)測，并從中選取有代表性的研究對象（如細分為不同的初潮年齡組，并匹配其他與初潮年齡相關(guān)的因素）分析PAEs暴露與性發(fā)育的關(guān)系。

3.3.2 人群PAEs暴露水平監(jiān)測

近年來國外關(guān)于人群PAEs暴露評價首選的生物樣品是尿液，測定其代謝物的濃度作為暴露標志物并用肌酸酐標化后進行比較，這是因為尿液中代謝物水平往往比在其他介質(zhì)如血清中發(fā)現(xiàn)的母體化合物更高，因此也更容易準確測定。Koch等[11]研究德國人群尿樣中PAEs二級代謝物，發(fā)現(xiàn)研究人群均能測出。再者，通過測定代謝物，在樣品采集、保存和分析過程中發(fā)生意外污染的風(fēng)險也大大降低，且代謝物一般被認為是生物活性分子。雖然這樣仍無法避免DBP代謝物半衰期較短的特性，但假定PAEs暴露的來源和形式是不變的，單一的測量還是能夠反映6個月內(nèi)的典型暴露[10]。本研究由于經(jīng)費限制，只測定了血清中一種PAEs（DBP）的濃度，在今后的研究中可以選用尿液中幾種PAEs代謝物作為暴露標志物，如Lorber等[12]在DEHP的PBPK模型中，以MEHO/50HMEHP為標志物進行監(jiān)測，更為準確可靠，同時易于與國際間結(jié)果進行比較。同時，可以加強對分析方法的優(yōu)化，提高回收率和精密度，比較不同分析方法（如高效液相色譜法和GC-MS）檢出水平的差異。

PAEs與塑料的結(jié)合不是一種化學(xué)結(jié)合，而是物理結(jié)合，在使用過程中通過直接釋放、遷移、淋溶和磨損被不斷釋放到環(huán)境中，成為全球性的重要環(huán)境污染物，導(dǎo)致人群廣泛、持續(xù)暴露于PAEs[13～14]。通過與國內(nèi)其他研究小組的結(jié)果進行比較發(fā)現(xiàn)，本研究所測得的女生血清DBP水平較高，在今后的研究中應(yīng)該注意對血清DBP水平影響因素的分析，例如通過問卷調(diào)查女生的生活習(xí)慣（如洗發(fā)液等個人護理品的使用情況，是否有涂指甲油的習(xí)慣）、飲食習(xí)慣（如是否經(jīng)常食用塑料包裝食品和飲用軟飲料）等，并結(jié)合環(huán)境本底資料進行綜合分析。

在今后的研究中需要注意擴大樣本量，按照現(xiàn)況調(diào)查樣本量計算方法，欲達到本研究63.3%的檢出率，樣本量需要達到232人，考慮可能出現(xiàn)的失訪、不應(yīng)答等因素，應(yīng)適當增加10%樣本量，因此最終樣本量應(yīng)該大約為260～300人，并結(jié)合實際情況采用分層整群抽樣的方法進行抽樣。

3.3.3 與性發(fā)育關(guān)系的研究

從橫斷面調(diào)查抽取的人群中選取有代表性的研究對象，即選定為已有月經(jīng)初潮者，通過調(diào)查問卷準確詢問其初潮時間，考慮初潮年齡的跨度，并將其分為三組或以上，同時匹配組間的年齡、身高、體重、BMI值、母親初潮年齡等可能與初潮年齡相關(guān)的因素，進而比較組間PAEs水平的差異，發(fā)現(xiàn)初潮年齡與PAEs暴露的真實關(guān)聯(lián)。

[1] Heudorf U, Mersch-Sundermann V, Angerer J. Phthalates: toxicology and exposure[J]. Int J Hyg Environ Health, 2007, 210(5): 623-634.

[2] ATSDR. Toxicological profile for di(2-ethylhexyl) phthalate[R]. U.S. Departmen of Health and Human Services, Public Health Service, Agency for Toxic Substances and Disease Registry, 2002, 147(3): 198-200.

[3] Main K M, Mortensen G K, Kaleva M M, et al. Human breast milk contamination with phthalates and alterations of endogenous reproductive hormones in infants three months of age[J]. Environ Health Perspect, 2006, 114(2): 270-276.

[4] 趙繼. 我國女孩月經(jīng)初潮年齡影響因素的循證分析及其近二十年來的變化趨勢[D]. 蘇州大學(xué), 2011.

[5] Colón I, Caro D, Bourdony C J, et al. Identification of phthalate esters in the serum of young Puerto Rican girls with premature breast development[J]. Environ Health Perspect, 2000, 108(9): 895-900.

[6] 喬麗麗, 蔡德培, 申建偉, 等. 正常兒童血清中鄰苯二甲酸二丁酯和鄰苯二甲酸-2-乙基己酯水平的測定[J]. 衛(wèi)生研究, 2010, 39(4): 501-503.

[7] 李玲, 田曉梅, 張霞, 等. 育齡期婦女血清中4種鄰苯二甲酸酯類暴露水平的研究[J]. 環(huán)境與健康雜志, 2011, 28(9): 792-794.

[8] Swan S H. Environmental phthalate exposure in relation to reproductive outcomes and other health endpoints in humans[J]. Environ Res, 2008, 108(2): 177-184.

[9] 吳喻敏. 鄰苯二甲酸酯暴露程度與Kiss-1、GPR54基因多型性對性早熟女童之影響研究[D]. 成功大學(xué)環(huán)境醫(yī)學(xué)研究所, 2010.

[10] Wilson V S, Lambright C, Furr J, et al. Phthalate esterinduced gubernacular lesions are associated with reduced insl3 gene expression in the fetal rat testis[J]. Toxicol Lett, 2004, 146(3): 207-215.

[11] Koch H M, Rossbach B, Drexler H, et al. Internal exposure of the general population to DEHP and other phthalatesdetermination of secondary and primary phthalate monoester metabolites in urine[J]. Environ Res, 2003, 93(2): 177-185.

[12] Lorber M, Angerer J, Koch H M. A simple pharmacokinetic model to characterize exposure of Americans to di-2-ethylhexyl phthalate[J]. J Expo Sci Environ Epidemiol, 2010, 20(1): 38-53.

[13] Guo Y, Alomirah H, Cho H S, et al. Occurrence of phthalate metabolites in human urine from several Asian countries[J]. Environ Sci Technol, 2011, 45(7): 3138-3144.

[14] Ferguson K K, Loch-Caruso R, Meeker J D. Urinary phthalate metabolites in relation to biomarkers of inflammation and oxidative stress: NHANES 1999-2006[J]. Environ RES, 2011, 111(5): 718-726.

A pilot survey on correlation between serum di-n-butyl phthalate level and menarche age among 30 puberty girls in Guangzhou

HE Zhanming1★, MA Mengmeng2, CHEN Qing2, TAN Bingyan3
(1.Center for Disease Prevention and Control of Baiyun District Guangzhou, Guangdong, Guangzhou 510445, China; 2.School of Public Health and Tropical Medicine, Southern Medical University, Guangdong, Guangzhou 510515, China; 3. Experimental Center, School of Public Health, Sun Yat-Sen University, Guangdong, Guangzhou 510080, China)

Objective To determine the exposure level of serum di-n-butyl phthalate (DBP) in healthy puberty girls aged 12 to 15 years in Guangzhou and study the relationship between DBP exposure and menarche age. Methods The serum samples were collected intravenously from 30 puberty girls who were identified as normal in their school physical examination in March 2012 in Baiyun District of Guangzhou City, aged 12 to 15. For serum DBP level determination, gas chromatography-mass spectrometry method was established. Girls were divided into two groups using menarche age 12.4 which was the mean of the Guangdong Han nationality girls in 2005 as a cut-point, one was the group with menache age early than 12.4 and the rest belonged to the other one. Then detection rate and concentration distribution of DBP between the two groups were analyzed. Results DBP could be detected in 19 serum samples from total 30 samples and the rate of detection was 63.3%. The concentrations of DBP ranged from non detectable to 740 μg/L with the median of 60 μg/L while no variation was found by age. The rate of detection in group with menache age early than 12.4 was 75% while the other one was86.4% and the former had a higher mean rank of DBP concentration. However, the differences showed no statistical significance between the two group (P=0.672 andP=0.962, respectively). Conclusion The detectionrate and serum median concentration of DBP of the 30 normal puberty girls were both in high level with no variation by age and no association was found between serum DBP exposure and menarche age in puberty girls.

Di-n-butyl phthalate; Puberty girls; Serum; Gas chromatography-mass spectrometry

廣州市醫(yī)藥衛(wèi)生科技（2012A011183）

1.廣州市白云區(qū)疾病預(yù)防控制中心，廣東，廣州 510445 2.南方醫(yī)科大學(xué)公共衛(wèi)生與熱帶醫(yī)學(xué)學(xué)院，廣東，廣州 510515 3.中山大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院實驗教學(xué)中心, 廣東，廣州 510080

★通訊作者：何展明，E-mail:2370943@qq.com