類風(fēng)濕因子(RF)對(duì)HAV－lgM、HCV－lgM抗體檢測(cè)的影響

景紅麗

(山西省運(yùn)城市中心醫(yī)院檢驗(yàn)科044000)

病毒性肝炎是肝癌的重要病發(fā)原因，對(duì)人類的身心健康造成了極大危害，近幾年在這方面的發(fā)病機(jī)制，檢測(cè)方法等方面的深入研究也越來越多。甲型病毒性肝炎與丙型病毒性肝炎均是由肝病毒引起的傳染病，可導(dǎo)致肝細(xì)胞炎癥、變性與壞死。前者主要通過胃腸道傳染，后者主要通過血液傳播，一般性接觸不會(huì)傳染，具有高隱匿、高漏診、高慢性化的特點(diǎn)。然而與之相對(duì)的是，中國(guó)公眾對(duì)甲型病毒性肝炎、丙型病毒性肝炎的認(rèn)知率偏低、就診率低、治療率低。很多病毒性肝炎患者血清中都能檢測(cè)出自身免疫抗體，RF被檢出的幾率較高，類風(fēng)濕因子(RF)是在血清中檢測(cè)出的大多為IgM型，可推測(cè)，高RF濃度在有些情況下對(duì)于病毒性肝炎抗體的檢測(cè)有干擾作用，尤其是IgM型抗體。但是，當(dāng)前基本都是直接采用ELISA法檢測(cè)患者血清病毒性肝炎IgM抗體，而研究RF對(duì)IgM抗體影響的報(bào)道比較少，本研究采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)對(duì)HAV－lgM、HCV－lgM抗體進(jìn)行檢測(cè)，在對(duì)其中的RF中和后對(duì)其再次重新檢測(cè)，來研究RF對(duì)于HAV－lgM、HCV－lgM抗體檢測(cè)有影響。

資料與方法

1．一般資料:選取我院2011年6月至2012年5月免疫室近一年的常規(guī)檢測(cè)HAV－lgM、HCV－lgM抗體為陽性的標(biāo)本。分別為抗HAV－IgM陽性標(biāo)本組與抗HCV－IgM陽性標(biāo)本組，并經(jīng)檢測(cè)兩組標(biāo)本HBsAg均為陰性。其中，抗HAV－IgM陽性標(biāo)本:52例;抗HCV－IgM陽性標(biāo)本:60例。

2．試劑:RF－－IgM診斷試劑為選用德國(guó)歐蒙公司制造，HAV－IgM抗體試劑盒和抗HCV－IgM診斷試劑盒均為上?？迫A生物工程股份有限公司產(chǎn)品，RF測(cè)定試劑為羅氏公司配套試劑。

3．主要儀器:羅氏全自動(dòng)生化分析儀P800，美國(guó)BIO－RAD Model－3550uV酶標(biāo)儀。

4．方法:采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)方法檢測(cè)HAV－lgM、HCV－lgM抗體，并采用速率法在全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)標(biāo)本RF的值，檢測(cè)嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行操作;中和RF實(shí)驗(yàn)以50m l血清加50m l單抗人RF－IgM診斷血清混合物，經(jīng)過37℃孵育半小時(shí)，放入到0～8℃的容器中，在36℃半小時(shí)后，移至到4℃下過夜。在中和RF后對(duì)標(biāo)本HAV－lgM、HCV－lgM抗體重新檢測(cè)。

5．統(tǒng)計(jì)學(xué)方法:兩組定性資料采用X2，P＜0．05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié)果

1．RF測(cè)定:在兩組112例標(biāo)本中，RF＞20IU/mL為陽性，RF陽性標(biāo)本29例。在對(duì)RF陽性進(jìn)行診斷時(shí)，還要結(jié)合臨床表現(xiàn)及其他醫(yī)學(xué)檢查的結(jié)果，以此來防止出現(xiàn)漏診與誤診［1］。

2．RF對(duì)抗HAV－IgM陽性標(biāo)本影響:52例抗HAV－IgM陽性標(biāo)本組中檢測(cè)出RF陽性標(biāo)本15例，在中和之后再次進(jìn)行檢測(cè)，顯示結(jié)果11例轉(zhuǎn)為陰性，其他仍然表現(xiàn)為陽性，其中2例顯示為弱陽性，假陽性率為21．2%。

3．RF對(duì)抗HCV－IgM陽性標(biāo)本影響:60例抗HCV－IgM陽性標(biāo)本組中檢測(cè)出RF陽性標(biāo)本14例，在中和之后再次檢測(cè)，顯示結(jié)果12例轉(zhuǎn)為陰性，其他16例仍然表現(xiàn)為陽性，陽性率為20．0%。

4．比較RF對(duì)兩組標(biāo)本的影響綜上結(jié)果顯示，RF對(duì)兩組的檢測(cè)結(jié)果均有干擾，將兩組數(shù)據(jù)采用X2檢驗(yàn)，結(jié)果顯示RF對(duì)兩組的影響沒有顯著差異，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0．05)，結(jié)果見表1。

表1 RF對(duì)抗HAV－IgM陽性標(biāo)本組與抗HCV－IgM陽性標(biāo)本組的影響

5．低濃度RF與高濃度RF導(dǎo)致的假陽性結(jié)果比較，其中78例低濃度標(biāo)本中假陽性6例(RF＜160IU/m L)，34例高濃度標(biāo)本中假陽性17例(RF≥160IU/mL)，將它們之間的RF對(duì)IgM抗體檢測(cè)的假陽性率大小進(jìn)行比較。結(jié)果顯示兩組差別有明顯意義(P＜0．05)，表明高濃度的RF對(duì)于檢測(cè)結(jié)果的干擾大。結(jié)果見表2。

表2 低濃度RF與高濃度RF導(dǎo)致的假陽性結(jié)果比較

討論

病毒性肝炎分布于世界各地，也是我國(guó)常見的感染性疾病之一。目前臨床上有關(guān)診斷甲型病毒性肝炎與丙型病毒性肝炎主要分別是采用酶聯(lián)免疫法測(cè)定血清中的抗HAV與抗HCV。以往的一些文獻(xiàn)資料報(bào)道了關(guān)于類風(fēng)濕因子(RF)對(duì)某些酶聯(lián)免疫法檢測(cè)抗體試驗(yàn)的影響，報(bào)告稱在實(shí)驗(yàn)中RF與包被板中某些不純物質(zhì)結(jié)合，在加入酶標(biāo)抗體后，RF與抗體的Fc段結(jié)合，從而導(dǎo)致了假陽性的結(jié)果。同時(shí)也有報(bào)道在病毒性肝炎患者中，RF的檢出率明顯偏高。

類風(fēng)濕因子(RF)是衡量是否患有類風(fēng)濕疾病的判斷標(biāo)準(zhǔn)，它的變化將會(huì)對(duì)人的身體產(chǎn)生較大的影響，有專家指出類風(fēng)濕因子陽性或者類風(fēng)濕因子高了，都很有可能是類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者。類風(fēng)濕因子在實(shí)驗(yàn)室的診斷描述中分為五種類型，分別為IgM、IgA、IgG、IgD、IgE，類風(fēng)濕因子時(shí)類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎血清中針對(duì)于IgGFc片段上抗原表位的一類自身抗體，類風(fēng)濕因子陽性患者比較多，并且大多患有關(guān)節(jié)外表現(xiàn)。本文主要研究類風(fēng)濕(RF)對(duì)于甲型病毒性肝炎、丙型病毒性肝炎IgM抗體的影響。IgM型類風(fēng)濕因子是實(shí)驗(yàn)診斷常用的血清學(xué)指標(biāo)，但其特異性與敏感性均較低［2］，對(duì)于病毒性肝炎IgM抗體類的抗體檢驗(yàn)有干擾已經(jīng)有了些報(bào)道，本院的實(shí)驗(yàn)也證明了RF對(duì)于兩組HAV－lgM、HCV－lgM抗體檢測(cè)有明顯干擾。而其中的原因有可能是RF能夠與包被板的抗U－IgG部分段結(jié)合。在受到干擾的標(biāo)本中，RF有陽性濃度達(dá)到了610IU/mL，其中也有濃度僅為40IU/mL，在未受到干擾的標(biāo)本中同樣也出現(xiàn)了高濃度與低濃度的陽性者。這一現(xiàn)象似乎表明某一個(gè)體，RF對(duì)于病毒性IgM抗體的干擾沒有規(guī)律可循。而其中的原因可能與RF自身的特異性與同系的特異性有關(guān)，一種RF不能與所有的IgG分子Fc部分的抗原結(jié)合，只有當(dāng)RF抗原的決定簇與IgG分子上段的空間結(jié)構(gòu)有互補(bǔ)性時(shí)才有可能結(jié)合，即只有標(biāo)本中血清存有能與IgG結(jié)合的RF時(shí)，并且RF必須達(dá)到一定的濃度，才能夠有效地與標(biāo)本中的病毒肝炎IgM抗體競(jìng)爭(zhēng)性和抗u鏈結(jié)合，近而導(dǎo)致呈現(xiàn)假陽性。所以RF與IgGFc部分段的結(jié)合是隨機(jī)的，沒有結(jié)合規(guī)律可循。因此在某一標(biāo)本中的RF是否能夠引起干擾事前沒有辦法預(yù)料到，并不是只要RF的濃度高就能對(duì)標(biāo)本產(chǎn)生干擾，低濃度的就不會(huì)有干擾，這也是本院實(shí)驗(yàn)所證實(shí)到的。但是在實(shí)驗(yàn)結(jié)果還可以看到，對(duì)于群體高濃度RF的干擾率明顯比低濃度RF高。

RF是一種沒有特異性免疫復(fù)合物存在的血清學(xué)的標(biāo)志，凡是對(duì)于血清IgM能夠產(chǎn)生抗體的人都可以在血清中檢測(cè)RF［3］。正常人大約占有1%～5%，有文獻(xiàn)報(bào)道在正常群體中的RF南方人的陽性率比北方人的高。同時(shí)在一些具有感染性的疾病中，比如感染性心內(nèi)膜炎、慢活肝等疾病中，也可以檢測(cè)到RF。所以RF在病毒性肝炎IgM抗體的臨床檢測(cè)中導(dǎo)致的假陽性率比較高，應(yīng)該給予重視。

綜上所述，因?yàn)镽F在正常人和多種疾病的人群的血清中存在，所以經(jīng)常會(huì)對(duì)檢測(cè)結(jié)果產(chǎn)生影響，因此在對(duì)此類IgM抗體陽性標(biāo)本檢測(cè)時(shí)，最好是對(duì)RF先中和然后在進(jìn)行檢測(cè)，以此來提高檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確率與可靠性。類風(fēng)濕因子(RF)對(duì)于甲型病毒性肝炎與丙型病毒性肝炎IgM抗體均有影響干擾，但對(duì)兩組的干擾率并沒有顯著性差異，高濃度RF比低濃度RF的對(duì)HAV－lgM、HCV－lgM抗體檢測(cè)干擾率較大，本文的探究為臨床判斷檢驗(yàn)出現(xiàn)的假陽性結(jié)果提供了參考，具有臨床應(yīng)用價(jià)值。

1 隋振鐵，郝鐵，劉冰．AKA抗體、抗－CCP抗體和RF分型在類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎診斷的應(yīng)用［J］ ．標(biāo)記免疫分析與臨床，2011，18(6):423－425．

2 趙艷，史梅，王清平．抗CCP抗體對(duì)關(guān)節(jié)疾病患者類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的診斷價(jià)值研究［J］ ．中國(guó)醫(yī)療前沿，2011，6(17):58－59．

3 劉松堅(jiān)，徐云峰．類風(fēng)濕因子及其濃度對(duì)甲肝、丙肝IgM抗體的影響［J］ ．中國(guó)療養(yǎng)醫(yī)學(xué)，2009，18(9):842－843．