地塞米松與尿激酶聯(lián)合應(yīng)用注入胸腔治療大鼠結(jié)核性胸膜炎的實驗研究

王小路，梅 敏，錢小軍

（江西省胸科醫(yī)院內(nèi)三科，南昌 330006）

近年來對于尿激酶等纖維蛋白溶解劑治療結(jié)核性胸膜炎的報道日益增多， 該療法對于吸收胸腔積液，減少胸膜厚度與粘連可起到一定的治療作用［1-3］。本研究通過構(gòu)建大鼠結(jié)核性胸膜炎的模型，將尿激酶與地塞米松聯(lián)合注入大鼠胸腔，探討兩者聯(lián)合作用治療結(jié)核性胸膜炎的效果，為臨床進一步治療結(jié)核性胸膜炎提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實驗動物

雄性SD 大鼠60 只，體質(zhì)量200～250 g，飼養(yǎng)觀察1 周后，在大鼠右側(cè)腹股溝內(nèi)側(cè)備皮，皮內(nèi)注射卡介苗（本品凍干粉針劑為乳白色疏松固體或粉末，加入1 mL 注射用水應(yīng)于2 min 內(nèi)完全溶解為均勻混懸液，殘余水分不應(yīng)超過3%）0.1 mL（為0.05 mg）。

1.2 實驗方法

將60 只大鼠根據(jù)體質(zhì)量按隨機數(shù)字表法分為A、B、C 3 組，每組20 只。 全部接種卡介苗5 周后用H37Rv 標(biāo)準(zhǔn)人型結(jié)核分支桿菌菌株按0.03 mg·只-1注入大鼠右側(cè)胸腔。結(jié)核分枝桿菌菌株（廣州凱升生物科技有限公司生產(chǎn)） 在羅氏培養(yǎng)基上培養(yǎng)3 周，配制成1 mg·mL-1的菌液，用10 倍體積的生理鹽水稀釋成10-2mg·mL-1，混勻后吸取菌液3 mL（0.03 mg·只-1）注入大鼠胸腔。 參照何橋［4］等的方法構(gòu)建大鼠結(jié)核性胸膜炎模型，如果第2 天抽出胸腔積液說明模型成功建立。 隨后A 組大鼠注入地塞米松1 mg+尿激酶600 U，B 組注入等量的尿激酶，C 組注入等量的生理鹽水，之后分批處死大鼠（根據(jù)大鼠體質(zhì)量吸入乙醚進行麻醉，用剪刀剪開腹部的皮膚，暴露腹腔， 找出腹主動脈， 用剪刀剪斷放血直至大鼠死亡）。

1.3 評分標(biāo)準(zhǔn)

根據(jù)雙側(cè)胸腔粘連帶的程度分為5 個等級：0分：無粘連帶，1 分：5 條以內(nèi)粘連帶，2 分：6～10 條粘連帶，3 分：11-15 條粘連帶，4 分：15 條以上粘連帶，分別評為0-4 級，分別記為0-4 分。

1.4 大鼠呼吸功能測定

采用大鼠呼吸功能測定儀（北京拜安吉科技有限公司生產(chǎn)）。 將大鼠用2%戊巴比妥鈉按0.3 mL·（100 g）-1體質(zhì)量腹腔內(nèi)麻醉后， 采用外加2.5 與-2.5 cm kPa 壓力的方法迫使動物深吸氣和深呼氣，較準(zhǔn)確地測出PEF 和FEV0.3。

1.5 統(tǒng)計學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 實驗結(jié)果的建模情況

結(jié)核性胸膜炎建模成功的大鼠胸腔內(nèi)分別注入尿激酶＋地塞米松、尿激酶、生理鹽水后在實驗觀察期內(nèi)均無一只死亡。

2.2 3 組大鼠在不同觀察期內(nèi)胸腔積液量的比較

24、72 h 胸腔積液量A 組高于B 組（P＜0.05）、B組高于C 組（P＜0.05），7 d 后胸腔積液量A 組少于B 組和C 組（均P＜0.05）。 見表1。

表1 不同時間3 組胸腔積液量的比較 ,v/mL

2.3 3 組大鼠在不同觀察期內(nèi)胸膜厚度的比較

3 組大鼠胸膜厚度見表2。A 組大鼠胸膜厚度低于B 組，2組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義，（P＜0.01），A組大鼠胸膜厚度明顯低于C 組，2組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義，（P＜0.01）。

表2 在不同時間3 組胸膜厚度的差異比較 ,μm

2.4 3 組大鼠呼吸功能的比較

3 組大鼠呼吸功能指標(biāo)見表3。 A 組PEF 優(yōu)于B 組（P＜0.05），B 組優(yōu)于C 組（P＜0.01）；A 組FEV0.3優(yōu)于B 組（P＜0.01），B 組優(yōu)于C 組（P＜0.01）。

表3 3 組大鼠呼吸功能檢測指標(biāo)的差異比較

2.5 3 組大鼠在不同觀察期內(nèi)胸膜粘連程度的比較

3 組大鼠胸腔粘連程度評分見表4， 秩和檢驗分析結(jié)果表明，5 d 后A 組的胸膜粘連帶少于B 組，B 組的胸膜粘連帶少于C 組。

表4 不同時間3 組大鼠胸腔黏連程度評分比較

3 討論

肺部結(jié)核炎癥累及胸膜時引起的胸膜炎癥稱為結(jié)核性胸膜炎，若治療不及時可導(dǎo)致病情遷延，形成大量纖維蛋白沉積，可使胸膜增厚、粘連、機化，收縮包裹肺臟，使胸廓變形、塌陷，嚴(yán)重影響肺通氣功能，并可出現(xiàn)肺部反復(fù)感染、咯血等并發(fā)癥，可致脊柱側(cè)彎，有一定的致殘率［5］。

本組研究資料發(fā)現(xiàn)胸腔內(nèi)注入尿激酶+地塞米松和單獨注入尿激酶，胸腔積液量72 h 后比生理鹽水組增多，在5 d 后要比生理鹽水組低，即胸液高峰出現(xiàn)的較早吸收的較快。 胸液開始較多而吸收快的原因目前尚不明確，可能與纖維蛋白溶解作用有關(guān)，也可能和纖維蛋白溶解劑影響胸膜的炎癥形成有關(guān)。

實驗結(jié)果顯示，A 組在整個觀察期內(nèi)胸膜厚度明顯薄于B 組與C 組，72 h 后A 組胸膜粘連評分優(yōu)于B 組與C 組、A 組肺功能指標(biāo)優(yōu)于B 組與C 組，可見尿激酶+地塞米松的療效優(yōu)于單獨注射尿激酶。 其機制可能為尿激酶能夠溶解纖維蛋白，溶解纖維間隔，從而降低胸腔積液的黏稠性，使胸水變得稀薄，有利于胸腔積液充分引流，纖維素不易沉積。 地塞米松能夠減少溶酶體內(nèi)水解酶的形成以及組胺和激素肽的釋放，減低胸腔積液生成過程中自身抗體水平，減少纖維蛋白的滲出，最終達到減少組織粘連的目的。

綜上所述，在治療大鼠結(jié)核性胸膜炎的過程中聯(lián)合使用尿激酶與地塞米松的療效要優(yōu)于單獨注射尿激酶。 本研究在大鼠模型中證明了地塞米松與尿激酶聯(lián)合應(yīng)用相比單獨應(yīng)用尿激酶可以取得更好的療效，但應(yīng)用到人還需進一步進行隨機對照的臨床試驗研究。

［1］Cha pman S J, Davies R J.The management of pleural space infections［J］.Respirology，2004,9（1）：4-11.

［2］Talib S H,Verma G R,Arshad M,et al.Utility of intrapleural streptokinase in management of chronic empyemas［J］.J Assoc Physicians India，2003,51：464-468.

［3］瞿章書，徐小平，楊榮強.尿激酶胸腔內(nèi)注射治療包裹性胸腔積液31 例 ［J］.中華結(jié)核和呼吸雜志, 2004, 27（4）：284-285.

［4］何橋,謝燦茂,譚守勇,等.大鼠結(jié)核性胸膜炎模型和胸腔炎癥免疫反應(yīng)的研究［J］.中華結(jié)核和呼吸雜志, 2005,28（2）：117-121.

［5］楊福堂.結(jié)核性胸膜炎的臨床診斷與治療［J］.臨床肺科雜志,2008,13（11）：1499-1500.