野生於術(shù)與栽培白術(shù)化學(xué)成分比較研究

朱 樵 李 亞 章力勤 浙江省臨安市人民醫(yī)院 臨安311300

宋劍鋒 浙江省衢州市食品藥品檢驗(yàn)所

·藥學(xué)園地·

野生於術(shù)與栽培白術(shù)化學(xué)成分比較研究

朱 樵 李 亞 章力勤 浙江省臨安市人民醫(yī)院 臨安311300

宋劍鋒 浙江省衢州市食品藥品檢驗(yàn)所

野生於術(shù) 栽培白術(shù) 化學(xué)成分

白術(shù)Atractylodes macrocephala Koidz，又稱為天薊、山姜、乞力伽、山精、山連。具有健脾益氣、燥濕利水、止汗、安胎功效。用于脾虛食少，腹脹泄瀉，痰飲眩悸，水腫，自汗，胎動(dòng)不安。主產(chǎn)區(qū)主要分布在浙江、安徽、湖南、江西等地。其中產(chǎn)于浙江臨安的白術(shù)由于品質(zhì)獨(dú)特，稱之為於術(shù)，有南術(shù)北參的稱謂[1-2]。於術(shù)是浙江臨安的道地藥材，關(guān)于野生於術(shù)與栽培白術(shù)之間成分的比較研究較少。筆者采用HPLC法對野生於術(shù)和栽培白術(shù)的成分進(jìn)行比較研究，發(fā)現(xiàn)一種野生於術(shù)中的特異性成分。利用聚酰胺柱色譜、硅膠柱色譜、Sephadex LH-20柱色譜和制備HPLC等分離手段和經(jīng)詳細(xì)的波譜學(xué)鑒定特異性成分為香草醛，為於術(shù)道地藥材的特性研究打下物質(zhì)基礎(chǔ)。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1藥 材 野生於術(shù)采自浙江臨安天目山，種植白術(shù)購自浙江磐安，經(jīng)衢州市藥檢所宋劍鋒副主任中藥師鑒定為白術(shù)Atractylodes macrocephala Koidz的根莖。野生於術(shù)：取原藥材，除去雜質(zhì)，陰干，潤軟后，切段，干燥備用。栽培白術(shù)：取原藥材潤軟后，切段，干燥備用。

1.2儀 器 LC-2010A型高效液相色譜儀，包括：UV檢測器、CLASS-VP工作站（日本島津公司）；INOVA-500核磁共振儀，TMS為內(nèi)標(biāo)；薄層色譜硅膠GF254和柱色譜用硅膠（100-200目，160-200目，200-300目）均為青島海洋化工廠產(chǎn)品；聚酰胺（60-90目）為臨江化工有限公司產(chǎn)品；葡聚糖凝膠Sephadex LH-20為 Pharmacia公司產(chǎn)品；Agilent 1100和Shimadzu LC-6AD高效液相色譜儀（YMC公司Pack ODS-A C18制備柱，20×250mm，10μm）；凝膠樹脂Toyopearl HW-40 C（50-100μm）為Tosoh公司產(chǎn)品。

2 方法及結(jié)果

2.1色譜條件 色譜柱：SinoChrom ODS-BP柱（4.6mm×150mm，5μm）；流動(dòng)相：乙腈-0.2%磷酸水溶液，梯度洗脫（表1）；檢測波長：230nm；流速：1.0mL/ min；柱溫：30℃。

2.2樣品制備 野生於術(shù)和栽培白術(shù)研細(xì)，取約0.05g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇100mL，稱定重量，超聲處理（功率250W，頻率50kHz）30min，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，微孔濾膜（0.45μm）濾過，取續(xù)濾液，即得。在210nm檢測波長條件下，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示栽培白術(shù)和野生於術(shù)主要成分類似，見圖1，其中compound A明顯是野生於術(shù)區(qū)別于栽培白術(shù)的特異性成分，見圖2。

圖1 栽培白術(shù)成分色譜圖

圖2 野生於術(shù)成分色譜圖

2.3特異性成分分離 野生於術(shù)200g，粉碎后用70%乙醇回流提取3次，分別提取2、1.5、1h，①減壓濃縮至無醇味，加水稀釋，用乙酸乙酯萃取3次，濃縮得到乙酸乙酯部分浸膏。乙酸乙酯部分通過聚酰胺柱，分別用水、30%乙醇、60%乙醇、95%乙醇洗脫。其中水洗脫部分經(jīng)硅膠柱色譜粗分為1～4四個(gè)部分，第3部分經(jīng)硅膠柱色譜，得到14流分，其中流分5經(jīng)Toyopearl HW-40 C柱色譜、制備液相色譜純化得到含有compound A的粗品，再經(jīng)Sephadex LH-20柱色譜、制備液相色譜純化得到化合物compound A（3mg），見圖3。

2.4Compound A的結(jié)構(gòu)鑒定 分離得到的特異性成分compound A經(jīng)過詳細(xì)的一維NMR實(shí)驗(yàn)分析，對比已有化合物數(shù)據(jù)，鑒定該成分的結(jié)構(gòu)為香草醛（Vanillin;4-Hydroxy-3-methoxybenzaldehyde）。化合物A白色粉末。1H-NMR（CDCl3，500 MHz）δ：9.807（s，OH），7.41（1H，d，J=8.0Hz，H-2），7.03（1H，d，J= 8.0Hz，H-3），6.46（1H，s，H-6），3.94（3H，s，OCH3）。13C-NMR（CDCl3，125MHz）δ：191.3（CH0），152.0（C-3），147.4（C-4），130.0（C-1），127.8（C-2），14.6（C-3），109.0（C-6），56.3（OCH3）。根據(jù)文獻(xiàn)[3]確定化合物A為香草醛，見圖4。

圖3 Compound A的1 H NMR圖譜

圖4 Compound A的13C NMR圖譜

3 討 論

培育優(yōu)質(zhì)的品種是最基本、最可靠、最經(jīng)濟(jì)有效的中藥材可持續(xù)利用手段，是藥用植物品質(zhì)（產(chǎn)量及藥用成分）的優(yōu)良性、保證中藥生產(chǎn)和中成藥療效的首要環(huán)節(jié)。通過該研究說明地道藥材於術(shù)與栽培白術(shù)有化學(xué)成分的差異。於術(shù)為野生品種，沒有經(jīng)過系統(tǒng)的人工選擇，在生產(chǎn)上還沒有真正意義上的栽培品種。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果為於術(shù)選擇育種提供了參考，同時(shí)為於術(shù)的道地特異性研究打下基礎(chǔ)。

［1］孟建榮，吳志榮.地道藥材於術(shù)特異性考［J］.中藥材，1999，22（2）：98-100.

［2］馬全民，陳兆年.白術(shù)、於術(shù)中揮發(fā)油化學(xué)成分的研究［J］.現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué)，1996，13（3）：11-13.

［3］賈紅梅，李寧，李銑.紅車軸草的化學(xué)成分研究［J］.中南藥學(xué)，2008，6（5）：534-536.

2013-03-23

浙江省臨安市醫(yī)療科研及重點(diǎn)?？茖２№?xiàng)目（No.20110833B55）

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