水提薛荔籽果膠對去勢雌性大鼠腸道健康的影響

唐 艷，桂 余，任文瑾，彭 林，劉 雄

(西南大學(xué)食品科學(xué)學(xué)院，重慶北碚400715)

薜荔(Ficus pumila L.)屬?？崎艑僦参?，亦稱木蓮、木饅頭、涼粉樹等，常綠攀緣或匍匐灌木，主要分布在我國中部和南部，如云南、廣西、湖南、四川、湖北等地［1－2］。薛荔籽果膠附著于籽表皮層，是水溶性、粘性和膠凝性都很好的一種非淀粉多糖類的膳食纖維。在人類營養(yǎng)學(xué)中，作為人體每日必需的“第七大營養(yǎng)素”，膳食纖維是健康飲食中不可缺少的元素，在消化生理等方面的作用已被證實(shí)，它的攝入量與動脈硬化、冠心病、腸憩室疾病的發(fā)生有關(guān)，適當(dāng)?shù)臄z入量還能預(yù)防和減少結(jié)腸瘤、便秘、痔瘡及上述疾病的發(fā)生［3－4］。大量動物實(shí)驗(yàn)證實(shí)，果膠在腸道代謝、改善血糖和血脂水平等方面有一定的健康作用，可有效地降低肝和血中膽固醇及甘油三酯濃度［5－6］，并能降低一些慢性病(如糖尿病、大腸癌、肥胖等)的發(fā)病率［7］。大量研究表明，腸道健康的改善與增加短鏈脂肪酸SCFA產(chǎn)量、降低腸道pH、降低腸道中氨和苯酚濃度、降低腸道中次級膽汁酸分泌、糞水中細(xì)胞毒素的量、減少排空時(shí)間和改善細(xì)菌活性等方面相關(guān)［8］。果膠作為腸道益生因子，能夠促進(jìn)腸道中乳酸菌、雙歧桿菌等有益菌的生長，提高有益菌比例，并產(chǎn)生豐富的SCFA(short－chain fatty acids)改善腸道pH，促進(jìn)腸細(xì)胞生長，抑制結(jié)腸癌等［9－10］。本研究室已有研究結(jié)果表明薛荔籽果膠可以緩解辣椒素引起的腸道環(huán)境惡化(研究結(jié)果另文發(fā)表)。目前，果膠的提取方法可分為5種:水提取法、酸提取法、微波萃取法、酶法和離子交換樹脂提取法。唐翠娥［11］比較了水提薛荔籽果膠和酸提薛荔籽果膠的理化性質(zhì)，結(jié)果顯示水提薛荔籽果膠色淺、純度高、分子量大、灰分低等優(yōu)點(diǎn)。說明簡單的水提薛荔籽果膠能極大的保留其天然活性成分，并降低成本。醫(yī)學(xué)研究結(jié)果表明，婦女進(jìn)入更年期后，由于卵巢機(jī)能衰退或喪失，雌激素分泌逐漸減少，容易出現(xiàn)以植物神經(jīng)功能紊亂代謝障礙為主的一系列癥候群，如腸道疾病、冠心病、動脈硬化等［12］。腸道作為人體的最大微生態(tài)環(huán)境，腸道健康直接關(guān)系到人的生活質(zhì)量與壽命周期。現(xiàn)有的傳統(tǒng)藥物對于腸道疾病的治療方法，療效多不明顯，故有必要進(jìn)一步尋找療效更好、副作用更少的新藥。故本研究以水提薛荔籽果膠為原料，以去勢雌性大鼠為對象建立動物模型，測定腸道相關(guān)指標(biāo)來探討水提薛荔籽果膠對大鼠腸道健康的影響，旨在為拓展薛荔籽果膠的綜合開發(fā)利用程度和新的保健食品的開發(fā)，提供新的實(shí)驗(yàn)依據(jù)和數(shù)據(jù)參考。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

體重90～110g健康雌性SD大鼠 重慶滕鑫比爾實(shí)驗(yàn)動物銷售有限公司;薛荔籽果膠 實(shí)驗(yàn)室自制，薛荔籽購于云南大市場;柑橘果膠 河南興源化工廠品有限公司;食用級95%的無水乙醇、L－胱氨酸、D－半乳糖醛酸、咔唑、苯酚、亞硝基鐵氰化鈉、冰乙酸、氯化膽堿、NaClO、NaCl、NH4Cl、NaOH 均為分析純;鹽酸、硫酸 優(yōu)級純;巴豆酸、乙酸、丙酸、丁酸

均為色譜純;厭氧菌培養(yǎng)基、BS培養(yǎng)基、LBS培養(yǎng)基、EMB培養(yǎng)基、PSE培養(yǎng)基 青島海博生物技術(shù)有限公司;玉米淀粉 西安國維淀粉有限責(zé)任公司;酪蛋白 食品級，華羚集團(tuán)公司。

GC－2012氣相色譜儀 日本島津公司;DHG－9070電熱恒溫干燥箱 上海齊欣科學(xué)儀器有限公司;JA2003Ax型電子天平 上海精天電子儀器有限公司;Spectrumlab－22可見分光光度計(jì) 上海棱光技術(shù)有限公司;ES－315 高壓蒸汽滅菌鍋;5810型臺式離心機(jī) 德國Eppendorf公司;WH－1 微型漩渦混合儀;SW－CJ－1FD 超凈工作臺;HH－B11 電熱恒溫培養(yǎng)箱;BC－J160S二氧化碳培養(yǎng)箱 上海博迅實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠。

1.2 動物與環(huán)境

動物飼養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室符合國標(biāo)清潔級，籠具干凈、安全。室內(nèi)照明控制在12h/12h光暗周期節(jié)律。室內(nèi)平均氣溫24～26℃，相對濕度40%～60%。

1.3 動物飼料

自制基礎(chǔ)飼料配方(1000g):玉米淀粉479.5g、酪蛋白200g、大豆油100g、蔗糖100g、礦物質(zhì)105g、混合維生素10g、L－胱氨酸3g、氯化膽堿2.5g。

薛荔籽果膠組和柑橘果膠組飼料分別用150g薛荔籽果膠和柑橘果膠替代基礎(chǔ)飼料中的150g玉米淀粉。

1.4 實(shí)驗(yàn)方法

1.4.1 原料的提取和果膠純度的測定 果膠提取工藝流程［11］:干薛荔籽→低溫浸提30min→濾布過濾→95%乙醇沉淀，靜置24h→78%乙醇洗滌→真空干燥→粉碎→果膠成品。

采用咔唑硫酸法，依據(jù)果膠的水解產(chǎn)物半乳糖醛酸在強(qiáng)酸溶液中與咔唑發(fā)生紫色顯色反應(yīng)，526nm處測反應(yīng)液的吸光度，試樣中半乳糖醛酸含量與所對應(yīng)的吸光度成正比，樣品中的果膠物質(zhì)總量即為半乳糖醛酸含量。

標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制:稱取0.01g D－半乳糖醛酸標(biāo)品，用蒸餾水定容于100mL容量瓶中，制成100mg/L的標(biāo)準(zhǔn)溶液。準(zhǔn)確吸取標(biāo)準(zhǔn)液 0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL，于6支25mL具塞刻度試管中，用蒸餾水稀釋至 1mL，搖勻，即得一組濃度為 0、20、40、60、80、100mg/L的半乳糖醛酸標(biāo)準(zhǔn)液。分別加入濃硫酸6.0mL，沸水浴中加熱30min后冷卻至室溫，各加入0.2mL 1.5mg/mL咔唑無水乙醇溶液，搖勻，在室溫下暗處放置30min后于526nm處測各反應(yīng)液的吸光度。以測得的吸光度為縱坐標(biāo)，每升標(biāo)準(zhǔn)液中半乳糖醛酸含量為橫坐標(biāo)，制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。

分別稱取0.01g薛荔籽果膠和商品柑橘果膠，蒸餾水定容至100mL容量瓶中，準(zhǔn)確吸取1mL果膠溶液于25mL具塞比色管中參照以上步驟測其吸光度，對應(yīng)的吸光度帶入標(biāo)準(zhǔn)曲線中即可得出半乳糖醛酸含量。

1.4.2 動物實(shí)驗(yàn)

1.4.2.1 建立更年期綜合癥大鼠模型 將體重為90～110g的健康雌性SD大鼠32只，單籠飼養(yǎng)于不銹鋼大鼠籠中，實(shí)驗(yàn)前大鼠用基礎(chǔ)飼料適應(yīng)性喂養(yǎng)1周，自由采食、飲水，無不良反應(yīng)、進(jìn)食、飲水和活動正常者方可納入實(shí)驗(yàn)中。適應(yīng)一周后，按體重隨機(jī)分出8只進(jìn)行偽切除(Sham)手術(shù)作為對照組，其余3組大鼠則進(jìn)行雙側(cè)卵巢切除(OVX)手術(shù)。整個(gè)手術(shù)過程中，已向大鼠腹部注射戊巴比妥鈉(30mg/kg)進(jìn)行麻醉。手術(shù)后繼續(xù)用自制基礎(chǔ)飼料飼養(yǎng)一周進(jìn)行恢復(fù)，再進(jìn)入實(shí)驗(yàn)飼料階段。

表1 薛荔籽果膠對去勢大鼠采食習(xí)慣、體重及其糞便量的影響Table 1 Effects of Ficus Pumila L.Seeds Pectin on diet habit，body weight and fecal bulk in ovariectomized rats

1.4.2.2 分組與飼養(yǎng) 恢復(fù)一周后，將OVX組的大鼠隨機(jī)分為OVX－CN組、15%FPLP組、15%CP組。實(shí)驗(yàn)飼料期間，每天稱進(jìn)食量，每隔三天稱一次體重，以記錄大鼠飲食、生長規(guī)律。喂養(yǎng)四周后處死大鼠，連續(xù)收集處死大鼠的前四天糞便，真空冷凍干燥后稱重，－20℃冰箱冷凍保存待用。收集盲腸內(nèi)容物，－80℃冷凍保存待用，測定每組大鼠盲腸內(nèi)容物和盲腸壁重、游離氨、SCFA、微生物數(shù)量。

1.5 統(tǒng)計(jì)分析

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行相應(yīng)的數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換后再利用SPSS軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，實(shí)驗(yàn)結(jié)果以ˉx±s表示，顯著性水平設(shè)為p＜0.05和p＜0.01。

1.6 檢測指標(biāo)與方法

1.6.1 盲腸內(nèi)容物SCFA測定 根據(jù)參考文獻(xiàn)采用氣相色譜法并略作修改［13］，測定指標(biāo)為乙酸、丙酸、丁酸。

1.6.2 水分測定 105℃恒溫干燥至恒重。

1.6.3 糞便、盲腸內(nèi)容物及盲腸壁重 稱重法，精確到小數(shù)點(diǎn)后三位，

1.6.4 盲腸壁表面積測定 生理鹽水洗凈盲腸壁，吸水紙吸干水分，展開并固定在具有標(biāo)準(zhǔn)刻度線(cm)的白色塑料板上，相機(jī)拍攝并打印下來，剪下紙上的盲腸輪廓圖，測出照片上的每單位厘米刻度線的面積(L2，cm2)，電子天平稱量輪廓圖紙重量(W1，g)和平方厘米的紙重量(W2，g)，精確到小數(shù)點(diǎn)后三位，然后按以下公式計(jì)算出盲腸表面積［14］:

1.6.5 盲腸內(nèi)容物游離氨的測定 稱取0.2g左右盲腸內(nèi)容物，加入2mL無氨水，充分混勻后在4000r/min的轉(zhuǎn)速下離心5min，取1mL上清液，依次加入1mL含有0.001mol/L亞硝基鐵氰化鈉的0.5mol/L苯酚溶液和1mL含有0.03mol/L次氯酸鈉的0.625mol/L氫氧化鈉溶液，60℃保溫5min使反應(yīng)完全，再在625nm波長下測吸光度［13］。

1.6.6 盲腸內(nèi)容物中微生物的測定 取盲腸內(nèi)容物0.2g，加入1.8mL無菌生理鹽水，依次10倍稀釋至10－7。通過預(yù)實(shí)驗(yàn)，每種微生物選擇3個(gè)適宜稀釋度，各以0.2mL接種到相應(yīng)的培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)。測定對象為乳酸桿菌、雙歧桿菌、厭氧菌、大腸桿菌、腸球菌。雙歧桿菌和乳酸桿菌分別選用BS瓊脂培養(yǎng)基和和LBS瓊脂培養(yǎng)基，37℃下二氧化碳細(xì)胞培養(yǎng)箱中厭氧培養(yǎng)72h計(jì)數(shù)。厭氧菌采用厭氧菌瓊脂培養(yǎng)基，大腸桿菌培養(yǎng)選用EMB瓊脂培養(yǎng)基，腸球菌選用PSE瓊脂(膽汁七葉苷疊氮鈉瓊脂)培養(yǎng)基，37℃下恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48h計(jì)數(shù)。以log cfu/g統(tǒng)計(jì)微生物數(shù)量。

2 結(jié)果與討論

2.1 果膠純度

果膠純度以D－半乳糖醛酸的含量計(jì)算，D－半乳糖醛酸的標(biāo)準(zhǔn)曲線見圖1。

分別稱取的0.01g薛荔籽果膠和商品柑橘果膠，按果膠純度的具體測定步驟得到薛荔籽果膠和商品柑橘果膠的吸光度分為0.447和0.420，對應(yīng)的D－半乳糖醛酸含量為分別為95.68%和89.95%，即薛荔籽果膠和商品柑橘果膠的純度。

圖1 D－半乳糖醛酸的標(biāo)準(zhǔn)曲線圖Fig.1 Standard curve of content D－(+)－galacturonic acid

2.2 水提薛荔籽果膠對去勢雌性大鼠腸道健康的研究結(jié)果

2.2.1 薛荔籽果膠對去勢大鼠采食習(xí)慣、體重及其糞便量的影響 由表1可知，實(shí)驗(yàn)期間各組大鼠每日食物攝取量無顯著性差異，但實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)OVX空白組的體重增長量、糞便干重顯著高于Sham組(p＜0.01);在OVX組中，F(xiàn)PLP組和CP組大鼠體重增長量、糞便干重顯著高于OVX空白組(p＜0.01)，其中，CP組大鼠體重增長量、糞便干重也顯著高于FPLP組(p＜0.01)。本研究提示本身在單胃動物胃內(nèi)不被消化吸收的果膠經(jīng)腸道發(fā)酵后，促進(jìn)了果膠組大鼠體重的增長。

2.2.2 薛荔籽果膠對去勢大鼠盲腸重量、盲腸壁表面積及盲腸內(nèi)容物含水率的影響 由表2可知，與Sham組相比，OVX空白組盲腸總重、腸壁濕重和內(nèi)容物重及盲腸壁表面積、盲腸內(nèi)容物含水量都有增加趨勢，其中盲腸內(nèi)容物達(dá)到顯著差別(p＜0.05);在OVX組中，F(xiàn)PLP和CP組盲腸總重、腸壁濕重和內(nèi)容物重及盲腸壁表面積、盲腸內(nèi)容物含水量與OVX空白組相比都極顯著增加(p＜0.01)，同時(shí)CP組盲腸壁濕重高于FPLP組(p＜0.01)。本研究提示盲腸內(nèi)容物重量的增加除了卵巢切除造成的內(nèi)分泌紊亂等內(nèi)在因素外，還與加有果膠的外在膳食因素所引起的腸道發(fā)酵以及盲腸內(nèi)容物含水量的大量增加密切相關(guān)，并且后者是主要因素。盲腸壁重和盲腸面積的增加直接與果膠的發(fā)酵產(chǎn)物SCFA的濃度增加相關(guān)。

表2 薛荔籽果膠對去勢大鼠盲腸重量、盲腸壁表面積及盲腸內(nèi)容物含水率的影響Table 2 Effects of Ficus Pumila L.Seeds Pectin on cecum weight，area of cecum tissue and cecum water(%)in ovariectomized rats

表3 薛荔籽果膠對去勢大鼠盲腸酵解產(chǎn)物的影響(μmol/g濕重)Table 3 Effects of Ficus Pumila L.Seeds Pectin on SCFA products in cecum in ovariectomized rats(μmol/g wet contents)

表4 薛荔籽果膠對去勢大鼠盲腸酵解產(chǎn)物的影響Table 4 Effects of Ficus Pumila L.Seeds Pectin on cecum contents FA in ovariectomized rats

2.2.3 薛荔籽果膠對去勢大鼠盲腸酵解產(chǎn)物的影響 由表3可知，OVX空白組與Sham組相比，盲腸內(nèi)乙酸、丙酸和丁酸濃度無顯著性差異，但有明顯的降低趨勢。在OVX組中，F(xiàn)PLP組乙酸、丙酸以及丁酸濃度均明顯高于OVX空白組(p＜0.05);CP組乙酸、丙酸濃度顯著高于OVX空白組(p＜0.05)，但丁酸與OVX空白組沒有差別。SCFA對機(jī)體健康的重要性已有很多報(bào)道［15－19］，如調(diào)節(jié)腸道菌群，維持體液和電解質(zhì)的平衡，給宿主提供能量，給腸道上皮細(xì)胞提供營養(yǎng)等。其中，丁酸的作用最為突出，它不僅提供上皮細(xì)胞營養(yǎng)，還對細(xì)胞的生長和分化具有保護(hù)作用，近年來受到極大關(guān)注［20］。本研究提示果膠組相比OVX空白組都不同程度的增加了盲腸中乙酸、丙酸、丁酸濃度，且FPLP組在增加丁酸含量上更有優(yōu)勢。

2.2.4 薛荔籽果膠對去勢鼠盲腸內(nèi)容物中游離氨的影響 由表4可知，相對與OVX空白組，Sham組明顯降低了大鼠盲腸內(nèi)容物中FA濃度(p＜0.05)。在OVX組中，與OVX空白組相比，F(xiàn)PLP和CP組盲腸內(nèi)容物中FA濃度都有大幅降低(p＜0.05)，與Sham組大鼠水平相近。大鼠體內(nèi)游離氨主要來自進(jìn)入盲腸的未消化的含氮化合物，正常情況下，這部分物質(zhì)將作為腸道細(xì)菌發(fā)酵氮源，但當(dāng)細(xì)菌消耗量不足，則會向氨等低分子含氮化合物的轉(zhuǎn)化［21］。本研究提示果膠經(jīng)腸道發(fā)酵后，促進(jìn)微生物利用氮資源，從而氨的釋放、吸收減少。

2.2.5 薛荔籽果膠對OVX大鼠盲腸內(nèi)容物中微生物的影響 由表5可知，Sham組各微生物的數(shù)量相比OVX空白組沒有顯著差別，但有益菌有增加趨勢，有害菌有降低趨勢，Sham組乳酸桿菌/大腸桿菌、乳酸桿菌/腸球菌的比例與OVX空白組相比顯著升高(p＜0.05)，雙歧桿菌/腸球菌的比例也極顯著高于OVX空白組(p＜0.01)。在OVX組中，與OVX空白組相比，F(xiàn)PLP組和CP組雙歧桿菌、乳酸桿菌、厭氧菌的數(shù)量顯著升高，其中CP組乳酸桿菌、厭氧菌的數(shù)量達(dá)到極顯著差別(p＜0.01)，CP組大腸桿菌和腸球菌的數(shù)量均顯著高于OVX空白組(p＜0.05)，F(xiàn)PLP組大腸桿菌和腸球菌的數(shù)量與OVX空白組沒有顯著差別;與此同時(shí)，F(xiàn)PLP和CP組有益菌與有害菌的比例相比OVX空白組均有升高的趨勢，其中，F(xiàn)PLP組乳酸桿菌/大腸桿菌的比例達(dá)到顯著差別(p＜0.05)，雙歧桿菌/腸球菌、乳酸桿菌/腸球菌的比例達(dá)到極顯著差別(p＜0.01)，CP組雙歧桿菌/腸球菌達(dá)到極顯著差別(p＜0.01)。Madsen等［22］通過補(bǔ)加乳酸菌可防止因敲除白介素－10(IL－10)基因引起的大腸炎疾病的發(fā)生。Cani等［23］發(fā)現(xiàn)雙歧桿菌的引入可有效抑制高脂小鼠血糖的升高，控制胰島素正常分泌，從而避免了糖尿病的發(fā)生。本研究提示果膠經(jīng)腸道發(fā)酵后，促進(jìn)了腸道微生物的生長繁殖，需氧活菌數(shù)(如大腸桿菌、腸球菌)增加，兼性厭氧活菌數(shù)(如雙歧桿菌、乳酸菌)和厭氧菌也增多，并且兼性厭氧活菌上升更迅速，有益菌與有害菌的比例升高。

表5 薛荔籽果膠對OVX大鼠盲腸內(nèi)容物中微生物的影響Table 5 Effects of Ficus Pumila L.Seeds Pectin on cecum contents microbe in ovariectomized rats

3 結(jié)論

本研究的主要目的是探討薛荔籽果膠對更年期婦女腸道健康的影響，研究結(jié)果表明OVX成年雌鼠由于卵巢切除造成雌性激素缺乏，使得有利于腸道健康的SCFA的濃度、雙歧桿菌、乳酸桿菌以及有益菌與有害菌的比例都明顯降低，并且由于腸道菌群失調(diào)產(chǎn)生了更多的游離氨，同時(shí)體重增加這一外在表現(xiàn)與更年期婦女癥狀相似。而通過飼料中添加果膠則對上述影響腸道健康的癥狀有明顯的改善作用。大量研究表明用果膠喂食大鼠一段時(shí)間后，發(fā)現(xiàn)大鼠各個(gè)腸段的長度、腸壁重、腸細(xì)胞數(shù)、SCFA濃度明顯增加，腸道內(nèi)總厭氧菌屬、擬桿菌屬、梭菌屬、腸菌屬的細(xì)菌數(shù)量都較多［24－26］，與本實(shí)驗(yàn)結(jié)果相一致。薛荔籽果膠能明顯升高盲腸內(nèi)容物SCFA的濃度，同時(shí)降低游離氨濃度，促進(jìn)腸道有益菌生長，從而改善腸道內(nèi)環(huán)境，說明薛荔籽果膠有益于去勢雌性大鼠腸道健康。另外，實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)果膠組大鼠體重較OVX空白組明顯增加，這一現(xiàn)象與以往食用果膠的研究結(jié)果不一致［27－28］，大鼠體重增加與腸道發(fā)酵的關(guān)系還有待進(jìn)一步的研究。綜上所述，本研究肯定了薛荔籽果膠對更年期婦女腸道健康的改善作用，對其合理食用薛荔籽果膠具有一定的指導(dǎo)意義。

［1］梁瑞紅，畢雙同，劉成梅，等.薜荔籽果膠凝膠特性的研究［J］.食品科學(xué)，2008，29(11):110－113.

［2］馮媛媛.薛荔籽果膠理化性質(zhì)及功能特性的研究［D］.重慶:西南大學(xué)，2010.

［3］Kendall C W，Esfahani A，Jenkins D J，The link between dietary fibre and human health［J］.Food Hydrocolloids，2010，24(1):42－48.

［4］羅劍鳴，饒潔，馮嘉韻，等.三種不溶性復(fù)合膳食纖維對小鼠腸道內(nèi)短鏈脂肪酸產(chǎn)生的影響［J］.食品科學(xué)，2012，33(3):225－227.

［5］Parkar S A，Redgate E L，Luo xiao xia，et al.Gut health benefitsofkiwifruitpectins:Comparision with commercial functional polysaccharides［J］.Functional Foods，2010，2(3):210－218.

［6］Molist F，Gomezde Segura A，Gasa J，et al.Effects of the insoluble and solubledietaryfibreon thephysicochemical properties of digesta and the microbial activity in early weaned piglets［J］.Anim Feed Sci Tech，2008，149(3):4－7.

［7］張麗芳，張愛珍.膳食纖維的研究進(jìn)展［J］.中國全科醫(yī)學(xué)，2007，21(3):1825－1827.

［8］Bugaut M，Bentejac M.Biological effects of short－chain fatty acids in nonruminant mammals［J］.Annu Rev Nut，1993，13:217－241.

［9］Coudray C，Bellanger J，Castiglia－ eelavaud C.Effect of soluble or partly soluble dietary fibres supplementationon absorption and balance of calcium，magnesium，iron and zinc in healthy young men［J］.Eur J Clin Nutr，1997，51:375－380.

［10］Ohta A，Ohtsukim，Baba S.Effects of fructo－oligosaccharides on the absorption of iron，calcium and magnesiumin iron deficient anemic rats［J］.J Nutr Sci Vitam，1995，41(3):281－291.

［11］唐翠娥.薛荔籽果膠的提取工藝及性質(zhì)研究［D］.南昌:南昌大學(xué)，2007.

［12］徐玉梅.婦女更年期綜合癥食療譜［J］.醫(yī)藥食療保健，2012，5(1):44－44.

［13］蘇昕峰，向晨茜，文紅麗，等.辣椒素灌喂劑量對大鼠腸道發(fā)酵產(chǎn)物的影響［J］.2011年中國農(nóng)業(yè)工程學(xué)會農(nóng)產(chǎn)品加工及貯藏工程分會學(xué)術(shù)年會暨全國食品科學(xué)與工程博士生學(xué)術(shù)論壇管產(chǎn)學(xué)研助推食品安全重慶高峰論壇，西南大學(xué)，2011:136－140.

［14］Fukunaga T，Sasaki M，Araki Y.Effects of the soluble fibre pectin on intestinal cell proliferation，fecal short chain fatty acid production and microbial population［J］.Digestion，2003，67(1):42－49.

［15］Muthusmy T，Gail C，Shiro I，et al.Sodium － Coupled tyansport of the short fatty acid butyrate by SLC5 A8 and its relevance to colon cancer［J］.Gastreintest Surg，2008，12(10)1773－1782.

［16］Richard K L L，Ian L B，Ying H，et al.Effect of resistant starch on genotoxin－induced apoptosis，colonic epithelium，and lumenal contents in rats［J］.Carcinogenesis，2003，24(8):1347－1352.

［17］李敏，樸建華，劉巧泉，等.富含抗性淀粉轉(zhuǎn)基因大米對大鼠腸道健康的影響［J］.Acta Nutr Sin，2008，30(6):588－591.

［18］劉小華，李舒梅，熊躍玲，短鏈脂肪酸對腸道功效及其機(jī)制的研究進(jìn)展［J］.腸外與場內(nèi)營養(yǎng)，2012，19(1):56－58.

［19］徐運(yùn)杰，方熱軍，戴求仲.短鏈脂肪酸的營養(yǎng)生理作用［J］.飼料研究，2007(8):26－28.

［20］馮鑠涵，賽宇，張璐，等.抗性淀粉種類對大鼠腸道代謝產(chǎn)物和血脂的影響［J］.食品科學(xué)，2012，33(19):289－294.

［21］小橋恭一.從消化道微生態(tài)學(xué)說起［J］.中國微生態(tài)學(xué)雜志，1995，7:36－42.

［22］Madsen K L，Doyle J S，Jewell L D，et al.Lactobacillus species prevents colitis in interleukin 10 genedeficintmice［J］.Gastroenterology，1999，116:1107－1114.

［23］Cani P D，Delzenne N M，Amar J，et al.Roleof gut microflora in the development of obesity and insulin resistance following high－fat diet feeding［J］.Pathologie Biologie，2008，56:305－309.

［24］Noack J，Dongowski G，Hartmann L，et al.The human gut bacteria bacterroides thetaiotaomicron and fusobacteriumvarium produce putrescine and spermiding in cecum of pectin－fed gnotobiotic rats［J］.Nutr，2000，130(5):1225 －1231.

［25］Fukunaga T，Sasaki M，Araki Y，et al.Effects of the soluble fibre pectin on intestinal cell proliferation，fecel short chain fatty acid production and microbial population［J］. Biomedical Science，2003，67:42－49.

［26］Dongowski G，Lorenz A，Proll J.The degree of methylation influences the degradation of pectin in the intestinal tract of rats and in vitro［J］.Nutr，2002.132(7):1935－1944.

［27］Perrigue M，Carter B，Roberts S A，et al.A low－calorie beverage supplemented with low－viscosity pectin reduces energy intake at a subsequent meal［J］.Food Science，2010，75(9):300－305.

［28］Babio N，Balanza R，Basulto J，et al.Dietary fibre:influence on body weight，glycemic control and plasma cholesterol profile［J］.Nutr Hosp，2010，25(3)，327－340.