VEGF-C與腫瘤淋巴管生成的臨床意義

趙 微 馮 沖 孟慶鑫

VEGF-C與腫瘤淋巴管生成的臨床意義

趙 微1馮 沖2孟慶鑫3

目的探討腫瘤淋巴管的生成與血管內皮生長因子（VEGF-C）表達的關系，為臨床腫瘤診斷提供科學依據。方法收集惡性腫瘤病理組織76例，采用EnVision免疫組化二步法和Weidner法對腫瘤組織中的VEGF-C和淋巴管密度（LVD）進行檢測。結果LVD隨VEGF-C表達強度上升而升高，其中VEGF-C表達中等陽性、強陽性的LVD值明顯高于陰性和弱陽性患者，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），且LVD與VEGF-C表達呈線性關系（相關系數(shù)b=3.90，t=8.87，P＜0.05）。結論VEGF-C與腫瘤淋巴管生成有關，可以作為臨床腫瘤診斷的依據。

VEGF-C；LVD；腫瘤淋巴管生成；臨床意義

腫瘤淋巴管生成是腫瘤發(fā)生淋巴結轉移的必要條件，是目前腫瘤研究的一個新熱點。血管內皮生長因子VEGF-C（Vascular endothelial growth factor-C, VEGF-C）被公認是淋巴管生成的重要調控因子。本研究檢測腫瘤患者病理組織中的VEGF-C含量及淋巴管密度（LVD），探討VEGF-C與LVD之間的關系及臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料收集本院2001年1月～2002年12月經手術切除惡性腫瘤病理組織76例，其中肺癌26例，直腸癌25例，乳腺癌21例，甲狀腺癌4例。所有患者術前均未進行放療、化療和免疫調節(jié)劑等藥物治療。

1.2 方法及內容實驗試劑包括鼠抗人D2-40單克隆抗體（1：50）購自DAKO公司；鼠抗人VEGF-C多克隆抗體（1：80）購自Santa Cruz公司。采用EnVision免疫組化二步法，首先對組織切片進行脫蠟、水化、漂洗，置于TBS中阻斷內源性過氧化物酶，一抗孵育30min，色源底物溶液孵育10min，復染及封片。該法將二抗和酶聯(lián)接成一個多聚體，在組織中不含有這種多聚物，避免了組織中生物素的干擾，直接放大信號40～50倍，再與已經結合的一抗反應，最后顯色劑顯色。VEGF-C蛋白的陽性表達為胞漿染成黃色顆粒，陽性細胞在切片中呈灶性或彌漫性分布。VEGF-C表達以細胞染色強度和細胞陽性百分率得分之和進行判定[1]，隨機選擇5個顯微鏡視野計算細胞陽性百分率[陽性百分率（%）=陽性細胞數(shù)÷總細胞數(shù)×100%]，VEGF-C在腫瘤細胞質呈現(xiàn)陽性表達見圖1。LVD的檢測方法按Weidner法進行[2]，淋巴管主要分布在癌組織周圍見圖2。

圖1 VEGF-C在腫瘤細胞質呈現(xiàn)陽性表達sp×100

圖2 淋巴管主要分布在癌組織周圍sp×100

1.3 統(tǒng)計學處理采用SPSS 13.0軟件對數(shù)據進行分析，計量資料以均數(shù)和標準差（±s）表示；多組間均數(shù)的比較采用方差分析；多組間兩兩比較采用q檢驗；LVD與VEGF-C表達關系采用直線回歸方法進行分析；P＜0.05表明差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

LVD隨VEGF-C表達強度上升而升高（F= 35.94，P=0.000），其中VEGF-C表達中等陽性、強陽性的LVD值明顯高于陰性和弱陽性患者，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；強陽性的LVD高于中等陽性，但差異尚未達到統(tǒng)計學意義（P＞0.05），且LVD與VEGF-C表達呈線性關系（相關系數(shù)b=3.90，t=8.87，P＜0.05），見表1。

表1 VEGF-C表達與LVD的關系

3 討論

淋巴管生成與腫瘤淋巴結轉移關系密切，但其分子機制尚不清楚[3]，Hirakawa等[4]通過建立大鼠腫瘤模型，發(fā)現(xiàn)VEGF-C在腫瘤發(fā)生轉移之前即可促進前哨淋巴結淋巴管網的生成，進而通過前哨淋巴結加速腫瘤細胞的遠處轉移，另外VEGF-C過表達可提高腫瘤細胞侵襲性。本組研究的肺癌、直腸癌、乳腺癌和甲狀腺癌的76例組織標本中，除了早期體檢發(fā)現(xiàn)的7例乳腺癌標本VEGF-C表達陰性外，其它標本VEGF-C表達均呈現(xiàn)陽性，而且VEGF-C表達強陽性26例均為晚期癌癥患者。本項研究結果還顯示，LVD隨VEGF-C表達強度上升而升高，且LVD與VEGF-C表達呈線性關系，可見VEGF-C的高表達可促進淋巴管生成，并與腫瘤細胞向區(qū)域淋巴結轉移相關，可以考慮作為臨床腫瘤診斷的輔助依據。癌組織周圍有淋巴管生成，在癌細胞的發(fā)生和發(fā)展中有重要意義，而阻止VEGF-C信號傳導是控制淋巴管生成有價值的治療策略。許多研究表明，淋巴管生成有多種因素參與，同時影響因素也較多，有些影響因素還需要進一步深入的研究。隨著抗腫瘤淋巴道轉移治療方法不斷改進，它將為惡性腫瘤的治療開辟新的途徑。

[1] CAO Y. Opinion： emerging mechanisms of tumour lymphangiogeneis and lymphatic metastasis[J]. Nat Rev Cancer, 2005,5(9)：735-743.

[2] 郭琳,張丹丹,王強.VEGF-C與惡性腫瘤相關性的研究進展[J].山東醫(yī)藥,2009,49(7)：113-114.

[3] 鄧風春,張鵬,李玉蘭.VEGF-C／fit-4調控系統(tǒng)與宮頸癌淋巴管生成及轉移關系的探討[J].中國醫(yī)療前沿,2009,4(18)：1-2.

[4] Hirakawa S, Brown LF, Kodama S, et a1. VEGF-C induced lymphangiogenesis in sentinel lymph nodes promotes tumor metastasis to distant sites[J]. Blood, 2007,109(3)：1010-1017.

R730.2

A

1673-5846(2013)01-0272-02

1 黑龍江省牡丹江醫(yī)學院解剖教研室，黑龍江牡丹江 157011

2 黑龍江省牡丹江醫(yī)學院紅旗醫(yī)院物理診斷科，黑龍江牡丹江 157011

3 黑龍江省牡丹江市紅旗醫(yī)院附屬二分院物理診斷科，黑龍江牡丹江 157011