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    甲砜霉素對(duì)肉雞睪丸組織結(jié)構(gòu)的影響

    2013-04-29 03:25:08唐海蓉陳仕均劉興友銀梅王選年潘耀謙李敬璽
    湖北農(nóng)業(yè)科學(xué) 2013年8期
    關(guān)鍵詞:組織結(jié)構(gòu)睪丸肉雞

    唐海蓉 陳仕均 劉興友 銀梅 王選年 潘耀謙 李敬璽

    摘要:將152只4日齡雄性AA+肉雞隨機(jī)分為4組,每組38只,分別在飼料中添加0(對(duì)照組)、500(試驗(yàn)Ⅰ組)、1 000(試驗(yàn)Ⅱ組)、1 500 mg/kg(試驗(yàn)Ⅲ組)的甲砜霉素,自由采食,試驗(yàn)期2周,對(duì)睪丸進(jìn)行病理形態(tài)學(xué)觀察。2周后測(cè)量體重、睪丸重、睪丸臟器系數(shù),并作睪丸石蠟切片測(cè)量曲精細(xì)管面積和觀察甲砜霉素對(duì)肉雞睪丸的病理組織學(xué)影響。結(jié)果表明,各試驗(yàn)組肉雞體重和曲精細(xì)管面積以及試驗(yàn)Ⅱ、Ⅲ組試驗(yàn)雞的睪丸重極顯著低于對(duì)照組(P<0.01),試驗(yàn)Ⅰ組試驗(yàn)雞的睪丸重和睪丸臟器系數(shù)極顯著大于對(duì)照組(P<0.01);各試驗(yàn)組肉雞曲精細(xì)管出現(xiàn)不同程度的生精細(xì)胞數(shù)量減少,精原細(xì)胞和睪丸支持細(xì)胞發(fā)生水泡變性,甚至壞死,結(jié)締組織增生。結(jié)果表明,用甲砜霉素添加量500 mg/kg及以上的飼料持續(xù)飼喂肉雞,可對(duì)肉雞的睪丸造成損傷,并且這種損傷在一定范圍內(nèi)存在顯著的劑量效應(yīng)關(guān)系。

    關(guān)鍵詞:肉雞;甲砜霉素;睪丸;組織結(jié)構(gòu)

    中圖分類號(hào):S852.3 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A 文章編號(hào):0439-8114(2013)08-1880-03

    甲砜霉素又名硫霉素,是氯霉素類的第二代廣譜抗菌藥,其對(duì)大腸桿菌、沙門氏菌、巴氏桿菌等都具有良好的抗菌作用[1-3]。因此,在中國(guó)廣泛使用。但在實(shí)際生產(chǎn)中,養(yǎng)殖戶違規(guī)濫用抗生素,不僅加劇了細(xì)菌對(duì)甲砜霉素的耐藥性,而且加劇了其在動(dòng)物機(jī)體內(nèi)的殘留量。國(guó)內(nèi)外研究表明,甲砜霉素具有一定毒副作用。目前,關(guān)于甲砜霉素對(duì)試驗(yàn)動(dòng)物小白鼠和大鼠危害的研究較多[4-6],但對(duì)于經(jīng)濟(jì)食用動(dòng)物危害的研究較少,僅見(jiàn)于鯉魚[7]和肉雞[8,9],且其研究主要涉及甲砜霉素對(duì)血液生化指標(biāo)、免疫器官的病理組織學(xué),以及其在動(dòng)物性產(chǎn)品中的殘留及其檢測(cè)等[10,11]方面。而關(guān)于甲砜霉素對(duì)肉雞睪丸的影響鮮有報(bào)道。本試驗(yàn)通過(guò)研究不同水平的甲砜霉素對(duì)肉雞睪丸組織結(jié)構(gòu)的影響,旨在探討甲砜霉素中毒的機(jī)理以及為臨床合理利用甲砜霉素提供理論依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 試劑與儀器

    甲砜霉素為湖南湘藥制藥有限公司生產(chǎn),純度為99.7%,批號(hào):20050212;Leica-RM2235型切片機(jī)(德國(guó)萊卡公司); Axiostar plus數(shù)碼顯微鏡(德國(guó)Zeiss公司)。

    1.2 試驗(yàn)動(dòng)物分組

    試驗(yàn)于2010年在河南科技學(xué)院動(dòng)物科學(xué)學(xué)院實(shí)訓(xùn)中心進(jìn)行。將152只4日齡雄性AA+肉雞(購(gòu)自內(nèi)黃縣牛召鄉(xiāng)碾子頭村種雞場(chǎng))稱重后隨機(jī)分為4組,每組38只,按甲砜霉素添加量分為0(對(duì)照組)、500(試驗(yàn)Ⅰ組)、1 000(試驗(yàn)Ⅱ組)、1 500 mg/kg (試驗(yàn)Ⅲ組)。自由采食與飲水,采用3層半重疊肉雞一次育成籠舍飼,飼養(yǎng)過(guò)程嚴(yán)格遵循《AA+肉雞飼養(yǎng)管理手冊(cè)》。

    1.3 檢測(cè)指標(biāo)

    肉雞飼養(yǎng)2周。每日觀察并記錄臨床癥狀,對(duì)發(fā)病死亡雞即時(shí)進(jìn)行剖檢。每周稱重1次,記錄各組平均體重。于受試驗(yàn)后2周從各組隨機(jī)抽取6只雞,分別稱體重和采血后,放血致死,剖檢并肉眼觀察睪丸的一般病變后稱重,根據(jù)臟器系數(shù)=臟器濕重/體重,計(jì)算其臟器系數(shù)。采取定期撲殺或采集死亡雞的睪丸,用10%中性甲醛固定,石蠟包埋,切片及H.E常規(guī)染色,在普通光學(xué)顯微鏡下觀察病理組織學(xué)變化。每張切片選取30個(gè)近圓形的曲精細(xì)管,由尼康NIS-Elements D圖像處理軟件測(cè)量曲精細(xì)管面積。

    1.4 數(shù)據(jù)處理

    所有數(shù)據(jù)采用SPSS 10.0統(tǒng)計(jì)軟件統(tǒng)計(jì)。各組數(shù)據(jù)均以平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示,用單因子方差分析檢驗(yàn)各組的差異顯著性。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 甲砜霉素對(duì)肉雞性狀及曲精細(xì)管面積的影響

    由表1可以看出,不同劑量甲砜霉素均能抑制肉雞體重增長(zhǎng),降低睪丸曲精細(xì)管面積;各試驗(yàn)組與對(duì)照組之間,試驗(yàn)Ⅰ組與試驗(yàn)Ⅱ、Ⅲ組之間差異極顯著。500 mg/kg的甲砜霉素對(duì)睪丸重量和睪丸臟器系數(shù)有促進(jìn)作用,顯著大于對(duì)照組;1 000 mg/kg和1 500 mg/kg的甲砜霉素對(duì)睪丸重量和睪丸臟器系數(shù)具有一定抑制作用,睪丸重量極顯著低于對(duì)照組,睪丸臟器系數(shù)與對(duì)照組之間差異不顯著,組間差異不顯著。

    2.2 甲砜霉素對(duì)肉雞睪丸形態(tài)結(jié)構(gòu)的影響

    由圖1可知,對(duì)照組曲精細(xì)管形成完整的管腔,曲精細(xì)管上皮由支持細(xì)胞、精原細(xì)胞和少量初級(jí)精母細(xì)胞構(gòu)成,上皮呈多層排列,部分細(xì)胞處于分裂狀態(tài),支持細(xì)胞數(shù)量較多(圖1-A)。與對(duì)照組相比,試驗(yàn)Ⅲ組雞睪丸的曲精小管管壁完整,但小管直徑較小,曲精細(xì)管內(nèi)細(xì)胞多呈單層排列,且排列松散,生殖細(xì)胞數(shù)量較少,多為支持細(xì)胞、精原細(xì)胞、極少量的初級(jí)精母細(xì)胞;大部分生殖細(xì)胞呈現(xiàn)空泡變性,部分支持細(xì)胞核濃縮深染。曲精細(xì)管間結(jié)締組織大量增生(圖1-B)。試驗(yàn)Ⅱ組睪丸的大部分曲精細(xì)管管壁完整,但管腔直徑較小,生精細(xì)胞多為單層排列,數(shù)量極少,僅見(jiàn)少量的精原細(xì)胞,且部分精原細(xì)胞從基膜脫落到管腔內(nèi),支持細(xì)胞多呈濃縮深染。間質(zhì)結(jié)締組織輕度增生(圖1-C)。試驗(yàn)Ⅰ組睪丸的曲精細(xì)管管壁完整,但管腔直徑較小,生精細(xì)胞排列為2或多層,部分支持細(xì)胞輕度空泡變性,局部可見(jiàn)核濃縮(圖1-D)。另外,各試驗(yàn)組均罕見(jiàn)核分裂相。

    3 小結(jié)與討論

    研究表明,甲砜霉素可影響動(dòng)物食欲,引起胃腸炎癥,阻礙動(dòng)物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)攝入、消化和吸收[6-9]。本試驗(yàn)中,各試驗(yàn)組肉雞的體重極顯著低于對(duì)照組,試驗(yàn)Ⅲ組顯著低于試驗(yàn)Ⅰ組,試驗(yàn)Ⅱ組極顯著低于試驗(yàn)Ⅰ組,試驗(yàn)Ⅱ、Ⅲ組間差異不顯著。結(jié)果表明,500 mg/kg及以上的甲砜霉素劑量長(zhǎng)時(shí)間持續(xù)混飼,將顯著降低肉雞的生長(zhǎng)性能,延緩體重增長(zhǎng),且在一定范圍內(nèi)存在劑量效應(yīng)關(guān)系。這與Maita等[6]關(guān)于甲砜霉素對(duì)大鼠和筆者關(guān)于甲砜霉素對(duì)鯉魚[7]的體質(zhì)量影響的報(bào)道一致。

    睪丸臟器系數(shù)在一定程度上可反映睪丸的功能情況。當(dāng)睪丸功能受損時(shí),睪丸通過(guò)自身組織學(xué)形態(tài)的改變進(jìn)行功能代償,以滿足機(jī)體的需要。本試驗(yàn)中, 試驗(yàn)Ⅰ組的睪丸明顯腫脹,臟器系數(shù)顯著大于對(duì)照組,表明日糧中500 mg/kg的甲砜霉素添加量可造成睪丸功能的下降。而試驗(yàn)Ⅱ、Ⅲ組劑量較大,導(dǎo)致睪丸重量與體重下降。病理組織學(xué)檢查結(jié)果也表明, 試驗(yàn)Ⅱ、Ⅲ組試驗(yàn)雞的睪丸曲精細(xì)管面積顯著減小,生精細(xì)胞數(shù)量減少,精原細(xì)胞和睪丸支持細(xì)胞發(fā)生水皰變性,甚至壞死,結(jié)締組織增生,試驗(yàn)Ⅰ組病變程度較輕。

    綜上所述,營(yíng)養(yǎng)缺乏可能是引起試驗(yàn)組肉雞體重降低、睪丸重量改變、組織結(jié)構(gòu)損傷的原因之一。同時(shí),甲砜霉素可顯著損傷腎臟,使血清蛋白隨尿液流失;顯著損傷肝臟,使肝臟合成蛋白質(zhì)減少,從而導(dǎo)致試驗(yàn)組肉雞出現(xiàn)水腫或細(xì)胞水皰變性[8]。另外,由于甲砜霉素能阻斷造血干細(xì)胞的線粒體合成,導(dǎo)致造血干細(xì)胞的增生分裂停止,引起細(xì)胞的呼吸鏈電子傳遞障礙[9],使ATP合成減少,從而使精原細(xì)胞和睪丸支持細(xì)胞發(fā)生水皰變性,甚至壞死。由于精原細(xì)胞具有增值分化為精母細(xì)胞的潛能;睪丸支持細(xì)胞具有營(yíng)養(yǎng)生精細(xì)胞,合成雄激素蛋白、促進(jìn)精子發(fā)生等功能,且同神經(jīng)細(xì)胞一樣沒(méi)有增殖分裂的潛力,因此一旦受損甚至死亡,所有生殖細(xì)胞都會(huì)死亡,因此上述兩種細(xì)胞的變性死亡必然導(dǎo)致精原細(xì)胞分裂受阻,曲精小管中生精細(xì)胞的數(shù)量減少,曲精小管變小,結(jié)締組織增生。本試驗(yàn)結(jié)果與Maita等[6]關(guān)于甲砜霉素能影響生精細(xì)胞發(fā)育的研究結(jié)果一致,但與其關(guān)于睪丸支持細(xì)胞未受損傷的結(jié)果相反,可能與試驗(yàn)周期和藥物劑量大小不同有一定關(guān)系。

    本試驗(yàn)中,甲砜霉素對(duì)肉雞睪丸的影響與其對(duì)肉雞生產(chǎn)性能的影響基本一致。有報(bào)道顯示,血清中雄激素的水平與肉雞的生長(zhǎng)發(fā)育有密切聯(lián)系[12],甲砜霉素是否對(duì)睪酮的分泌有顯著的影響還需進(jìn)一步試驗(yàn)來(lái)證實(shí)。

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