不同濃度啤酒廢酵母酶解蛋白與硼砂組合對(duì)橘小實(shí)蠅的捕殺效果

劉建民　董美華　杜迎剛等

摘要：于陽(yáng)桃園和番石榴園，田間測(cè)定了不同濃度啤酒廢酵母酶解蛋白與硼砂組合對(duì)橘小實(shí)蠅的誘捕和誘殺效果。結(jié)果表明：在誘捕和誘殺試驗(yàn)中，隨著蛋白濃度和硼砂濃度的增加，酶解蛋白硼砂組合對(duì)橘小實(shí)蠅的捕殺數(shù)量呈逐漸增加趨勢(shì)，以25 g/L蛋白、0.09 mol/L硼砂組合最高。通過(guò)誘捕和誘殺試驗(yàn)確定啤酒廢酵母酶解蛋白的最佳田間使用濃度為20～25 g/L，硼砂的添加量為0.06～0.12 mol/L。

關(guān)鍵詞：啤酒廢酵母；硼砂；蛋白誘劑；增效作用；橘小實(shí)蠅

中圖分類號(hào)：Q965.9：Q969.456.8 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)號(hào)：A 文章編號(hào)：1001-4942（2013）08-0110-03

橘小實(shí)蠅（Bactrocera dorsalis Hendel），屬雙翅目（Diptera）實(shí)蠅科（Tetriphitidae），是柑橘、陽(yáng)桃、芒果、番石榴等250余種果樹的毀滅性害蟲_[1～3]，蛋白誘殺是一項(xiàng)非常有效的防治措施。杜迎剛等用啤酒廢酵母酶解制備出了在pH 8.5條件下對(duì)橘小實(shí)蠅具有很好引誘活性的蛋白誘劑_[4，5]。本文對(duì)不同濃度啤酒廢酵母酶解蛋白與硼砂組合后對(duì)橘小實(shí)蠅的田間誘捕和誘殺情況進(jìn)行了研究，旨在為此蛋白的田間使用濃度范圍及增效物質(zhì)的研究提供依據(jù)。

1材料與方法

1.1試驗(yàn)材料

1.1.1主要試劑木瓜蛋白酶（BR）：98萬(wàn)單位（北京雙旋微生物培養(yǎng)基制品廠）；硼砂（AR）：安徽蕭縣化學(xué)試劑廠；蛋白誘劑：參照杜迎剛（2007）_[4]方法自制；殺蟲介質(zhì)：48%的Spinosad（多殺霉素）懸浮劑（美國(guó)陶氏益農(nóng)公司）。

1.1.2儀器設(shè)備酸度計(jì)：PHS-3B（上海虹益儀器儀表有限公司）；電子天平：BS 124S（德國(guó)Sartorius）；移液器：德產(chǎn)Tripette；誘捕器：江蘇常州禾豐生化研究所生產(chǎn)的橘小實(shí)蠅專用誘捕器。

1.2試驗(yàn)方法

1.2.1誘捕試驗(yàn)于福州武警福建總隊(duì)食品生產(chǎn)基地及漳州熱作所分別選擇陽(yáng)桃和番石榴園作為試驗(yàn)點(diǎn)。取新制備的啤酒廢酵母酶解蛋白母液，稀釋成不同濃度后加入不同濃度的硼砂溶液制成蛋白誘劑組合（具體組合見表1），以不加硼砂的20 g/L_[1]啤酒廢酵母酶解液為對(duì)照。每種誘劑組合重復(fù)12次，兩地陽(yáng)桃園、番石榴園各3次。每個(gè)誘捕器加一種供試溶液200 ml，掛于田間樹上高1.5 m陰涼處。隔天統(tǒng)計(jì)引誘的雌雄實(shí)蠅數(shù)量并補(bǔ)水至200 ml，連續(xù)觀察記錄2周。

1.2.2誘殺試驗(yàn)棋盤式取樣，選擇周圍環(huán)境和長(zhǎng)勢(shì)基本一致的株距20 m以上的番石榴28株，分7組。在樹體離地面1.5 m處于葉背面噴硼砂與酶解蛋白誘劑組合50 ml（內(nèi)加Spinosad 80 mg/L_[1，6]；組合選擇是在1.2.1試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，具體見表2），以不加硼砂的20 g/L蛋白誘劑為對(duì)照。每組4株分別噴4個(gè)方位，噴灑樹體面積約1.5 m2，每株地面鋪白色布，早晚各觀察清理死蟲1次，記錄1周內(nèi)引誘的雌雄橘小實(shí)蠅數(shù)量。

1.2.3數(shù)據(jù)分析方法數(shù)據(jù)處理用DPS v3.01統(tǒng)計(jì)分析軟件，采用單因子方差分析對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，方差檢驗(yàn)用Duncans新復(fù)極差法進(jìn)行。

2結(jié)果與分析

2.1誘捕試驗(yàn)從表1可以看出，隨著蛋白濃度和硼砂濃度的增加，酶解蛋白硼砂組合對(duì)橘小實(shí)蠅的誘捕數(shù)量逐漸增加，以25 g/L蛋白/0.09 mol/L硼砂組合最高，對(duì)雌蟲、雄蟲和雌雄總數(shù)的誘捕數(shù)量分別為3854.0、3805.7、7659.7只，對(duì)雌蟲的誘捕數(shù)量，與20 g/L蛋白/0.03、0.06、0.09、0.12 mol/L硼砂組合和25 g/L蛋白/0.03、0.06、0.12mol/L硼砂組合之間差異不顯著，極顯著高于20 g/L蛋白不加硼砂對(duì)照和10、15 g/L蛋白硼砂各組合；對(duì)雄蟲和雌雄總數(shù)，與20 g/L蛋白/0.06、0.09、0.12 mol/L硼砂組合和25 g/L蛋白/0.03、0.06、0.09 mol/L硼砂組合之間差異不顯著，與20 g/L蛋白/0.03 mol/L硼砂組合差異顯著，與10、15 g/L蛋白硼砂各組合及對(duì)照之間差異極顯著。

2.2誘殺試驗(yàn)從表2可以看出，隨著蛋白濃度和硼砂濃度的增加，酶解蛋白硼砂組合對(duì)橘小實(shí)蠅的誘殺數(shù)量逐漸增加，以25 g/L蛋白/0.12 mol/L硼砂組合最高，對(duì)雌蟲、雄蟲和雌雄總數(shù)的誘殺數(shù)量分別為401.8000、387.4000、789.2000只，對(duì)雌蟲，與20 g/L蛋白/0.09、0.12 mol/L硼砂組合和25 g/L蛋白/0.06、0.09 mol/L硼砂組合差異不顯著，與20 g/L蛋白/0.06 mol/L硼砂組合間差異顯著，與對(duì)照間差異極顯著；對(duì)雄蟲和雌雄總數(shù)，與20 g/L蛋白/0.12 mol/L硼砂組合和25 g/L蛋白/0.09、0.12 mol/L硼砂組合之間差異不顯著，與20 g/L蛋白/0.09 mol/L硼砂組合之間差異顯著，與20 g/L蛋白0.06 mol/L硼砂組合及對(duì)照之間差異極顯著。

3結(jié)論與討論

杜迎剛等_[4，5]研究表明，啤酒廢酵母酶解蛋白在濃度為20 g/L時(shí)引誘活性最強(qiáng)，所以本研究以不加硼砂的20 g/L啤酒廢酵母酶解蛋白液為對(duì)照，比較不同濃度的酶解蛋白液加硼砂后對(duì)橘小實(shí)蠅的誘捕和誘殺效果。從表1可以看出，因?yàn)榕鹕暗募尤胧沟?5 g/L甚至更低濃度蛋白對(duì)橘小實(shí)蠅的誘捕效果與20 g/L的相當(dāng)，這與單獨(dú)施用蛋白誘劑相比節(jié)省了蛋白資源，但15 g/L劑量組與25 g/L劑量組間存在極顯著差異，這說(shuō)明要達(dá)到更好的田間誘捕效果，蛋白濃度最好高于15 g/L。試驗(yàn)過(guò)程中，所有組合均是對(duì)雌性的引誘數(shù)量高于雄性，但無(wú)顯著差異，雌雄引誘數(shù)量的差異與田間橘小實(shí)蠅的生態(tài)狀態(tài)也有很大關(guān)系_[1，10]。在橘小實(shí)蠅誘捕試驗(yàn)中，25 g/L蛋白劑量組第1周引誘效果稍差，這與劑量太高導(dǎo)致?lián)]發(fā)性物質(zhì)濃度較高不利于橘小實(shí)蠅感應(yīng)有關(guān)，此結(jié)果與杜迎剛_[4，5]研究結(jié)果一致，第2周開始引誘數(shù)量增加；與此相反，10 g/L蛋白劑量組第1周引誘效果較好，第2周開始較差；15 、20 g/L劑量組在試驗(yàn)周期內(nèi)引誘效果較平穩(wěn)。誘殺試驗(yàn)中，各組合都是隨著蛋白濃度和硼砂濃度的增加誘殺效果增強(qiáng)，這與誘殺是在相對(duì)開放的環(huán)境中及福州雨季有關(guān)，這也是本試驗(yàn)只觀察1周的原因。通過(guò)本研究，進(jìn)一步精確了啤酒廢酵母酶解蛋白的最佳田間使用濃度范圍（20～25 g/L）和硼砂的添加量（0.06～0.12 mol/L），為該蛋白誘劑產(chǎn)品的開發(fā)及施用提供了理論依據(jù)。

啤酒廢酵母酶解蛋白誘劑富含氨基酸、多肽、糖類等_[7～9]，是夏季高溫下極易腐敗的物質(zhì)，此外引誘的實(shí)蠅蟲體因分離不及時(shí)也會(huì)很快腐爛，這些勢(shì)必影響到蛋白誘劑的引誘效果。硼砂對(duì)啤酒廢酵母酶解蛋白的增效作用可能與硼砂對(duì)引起蛋白酶解物及蟲體腐敗變質(zhì)的微生物的殺滅抑制作用有關(guān)，具體機(jī)理有待進(jìn)一步研究。

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