交叉配血不合原因分析及處理

胡飄萍

(南昌大學(xué)第一附屬醫(yī)院輸血科，江西南昌330006)

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交叉配血不合原因分析及處理

胡飄萍

(南昌大學(xué)第一附屬醫(yī)院輸血科，江西南昌330006)

交叉配血；不合；輸血；紅細(xì)胞凝集

輸血治療是一項(xiàng)重要的臨床治療手段，在病員救治的過程中發(fā)揮著不可替代的作用。隨著醫(yī)療水平的發(fā)展，輸血安全成為日益關(guān)注的問題。臨床輸注全血或含紅細(xì)胞成分血液前需要做交叉配血試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)供血者和受血者的紅細(xì)胞和血漿間是否存在抗原抗體反應(yīng)，以保證臨床用血安全。實(shí)際工作中，往往會(huì)發(fā)生交叉配血不相合的情況，即主側(cè)或次側(cè)出現(xiàn)紅細(xì)胞凝集?；诨颊哐丸b定無誤前提下，本文就可能引起配血困難的情況進(jìn)行總結(jié)并提出相應(yīng)的處理方法。

1 紅細(xì)胞假凝集

部分交叉配血實(shí)驗(yàn)是由于血液標(biāo)本的原因?qū)е录訇栃越Y(jié)果，干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果。其中可以是患者的血液中含有某些物質(zhì)、抽取患者血液時(shí)未與抗凝劑充分混勻或供血者血辮抗凝不充分。

1.1 患者高免疫球蛋白血癥或靜脈輸入高分子藥物多發(fā)性骨髓瘤，巨球蛋白血癥、霍奇金病、嚴(yán)重肝臟疾病等，由于血清蛋白分泌增加，白蛋白/球蛋白比例失調(diào)，血漿黏稠度增加。交叉配血時(shí)，主側(cè)交叉中供者紅細(xì)胞表面Zeta電位降低，形成緡錢狀假凝集。靜脈輸入高分子藥物如甘露醇、羥乙基淀粉或右旋糖酐等亦可導(dǎo)致紅細(xì)胞呈緡錢狀改變。

消除方法：采用試管法配血(聚凝胺法和鹽水法)，在配血的主管離心后去血漿，加3滴生理鹽水觀察結(jié)果。

1.2 患者血液中白細(xì)胞或血小板數(shù)量增高慢性粒細(xì)胞性白血病患者白細(xì)胞計(jì)數(shù)明顯增高時(shí)，血液標(biāo)本經(jīng)1000g離心1min處理，血漿中混有大量的白細(xì)胞。由于白細(xì)胞平均體積大于紅細(xì)胞并且其變形能力僅為紅細(xì)胞的1/1000，微柱凝膠卡配血離心時(shí)，交叉配血反應(yīng)體系中的細(xì)胞在微柱凝膠中下移，白細(xì)胞不能全部通過微孔進(jìn)而將微孔堵塞導(dǎo)致游離的紅細(xì)胞不能順利通過微孔到達(dá)底部，導(dǎo)致假陽性[1]。EDTA抗凝標(biāo)本中的血小板計(jì)數(shù)較高時(shí)，大量血小板聚集成團(tuán)塊狀。交叉配血前，標(biāo)本離心速度、時(shí)間不夠會(huì)導(dǎo)致血小板懸浮于血漿中，對(duì)結(jié)果產(chǎn)生影響[2]。

消除方法:將患者EDTA抗凝血液經(jīng)2000g離心5~10 min處理，將血漿中的白細(xì)胞或血小板充分沉淀，可消除血液細(xì)胞成分對(duì)交叉配血結(jié)果的影響。

1.3 血漿中纖維蛋白原增高患者血漿存在大量的纖維蛋白原，或供血者血辮呈部分抗凝時(shí)，交叉配血試驗(yàn)過程中纖維蛋白原有可能被激活轉(zhuǎn)變成纖維蛋白，夾帶紅細(xì)胞形成凝塊，干擾交叉配血結(jié)果的判斷。

消除方法:①加溫孵育法去除交叉配血過程中纖維蛋白原干擾，將標(biāo)本在37~42℃孵育10~ 30min，離心后再進(jìn)行交叉配血試驗(yàn)。②可采用細(xì)玻璃棒碾壓進(jìn)行鑒別。用細(xì)玻璃棒對(duì)凝集塊輕輕碾壓，在顯微鏡下觀察碾壓前后，紅細(xì)胞是否由凝集現(xiàn)象轉(zhuǎn)變成分散狀態(tài)，且紅細(xì)胞形態(tài)改變，出現(xiàn)該現(xiàn)象為假凝集[3]。③為排除纖維蛋白原的干擾，可考慮使用血清進(jìn)行交叉配血試驗(yàn)。

1.4 標(biāo)本溶血溶血性貧血患者或是燒傷科患者，由于存在大量的紅細(xì)胞碎片，微柱凝膠法時(shí)，紅細(xì)胞碎片容易堵塞凝膠微孔而使紅細(xì)胞不能完全到達(dá)底部，導(dǎo)致假陽性。

消除方法:改用凝聚胺法交叉配血[4，5]，在顯微鏡下仔細(xì)觀察紅細(xì)胞是否真凝集。

2 紅細(xì)胞真凝集

2.1 不規(guī)則抗體紅細(xì)胞血型不規(guī)則抗體是ABO系統(tǒng)的以外的同種抗體，可經(jīng)譜細(xì)胞鑒定抗體特異性。不規(guī)則抗體多因同種異體輸血、妊娠產(chǎn)生，新生兒可從母體被動(dòng)獲得IgG類抗體，李雪英等[6]

對(duì)無償獻(xiàn)血人群紅細(xì)胞血型不規(guī)則抗體篩查，共檢出0.3%的人存在不規(guī)則抗體，其中女性抗體檢出率明顯高于男性。如果供血者的紅細(xì)胞含有與受血者的不規(guī)則抗體相對(duì)應(yīng)的抗原，交叉配血時(shí)，可出現(xiàn)凝集。配血時(shí)，選擇不含有與不規(guī)則抗體對(duì)應(yīng)的紅細(xì)胞抗原的血液交叉配血。

2.2 藥物致敏臨床上，部分患者既無輸血史，又無自身免疫性疾病病史且血漿總蛋白正常，無白球蛋白比例倒置和纖維蛋白原增高，出現(xiàn)直接抗人球蛋白實(shí)驗(yàn)(DAT)陽性[7]，如果患者有明確的相關(guān)藥物使用史，應(yīng)考慮為藥物致敏。患者紅細(xì)胞膜受某些藥物(以頭孢菌素類最多見)而改變，導(dǎo)致非特異性地吸附蛋白，造成DAT陽性。由藥物影響造成的DAT陽性[8]，導(dǎo)致的配血困難的比例越來越大。懷疑藥物致敏時(shí)可進(jìn)行藥物抗體檢測，若確定某種藥物所致，應(yīng)避免使用，在停藥一段時(shí)間后，DAT結(jié)果可轉(zhuǎn)為陰性。

2.3 自身抗體

2.3.1 冷凝集冷凝集是指由自身抗體引起的，紅細(xì)胞在冷環(huán)境中的凝集成團(tuán)的現(xiàn)象。紅細(xì)胞膜表面物質(zhì)的構(gòu)型會(huì)隨環(huán)境溫度的變化而發(fā)生改變。在較低溫度時(shí)，紅細(xì)胞膜表面物質(zhì)的構(gòu)型發(fā)生改變，暴露出某些抗原決定簇，能與相應(yīng)抗體結(jié)合。而在體溫條件下，紅細(xì)胞膜物質(zhì)的構(gòu)型阻礙了冷凝集素與相應(yīng)的抗原決定簇結(jié)合。冷凝集反應(yīng)在0～4℃時(shí)最強(qiáng)，紅細(xì)胞凝集最明顯；隨溫度的升高，抗原抗體復(fù)合物逐漸解離，凝塊消失。

患者含有較高效價(jià)的冷凝集素時(shí)，血樣采取以下方法處理：采集血樣后，立即離心，獲得壓積紅細(xì)胞；用37℃溫生理鹽水洗滌紅細(xì)胞；如仍有凝集現(xiàn)象，將洗滌后的紅細(xì)胞45℃水浴放散3min或巰基試劑處理以破壞IgM；交叉配血在37℃進(jìn)行。

2.3.2 溫自身抗體部分免疫性疾病患者，血清和紅細(xì)胞中均具有高效的病理性自身抗體，可與供血者紅細(xì)胞及自身紅細(xì)胞發(fā)生凝集，造成交叉配血主次側(cè)均發(fā)生凝集。在交叉配血時(shí)可采取如下措施：(1)將患者紅細(xì)胞與自身血漿吸收，用吸收后的血漿交叉配血；(2)與多人份ABO血型相同的血液做配血試驗(yàn)，選擇主側(cè)凝集最弱的供血者血液，制成洗滌紅細(xì)胞后輸注；(3)如果自身抗體干擾ABO血型鑒定，而患者的病情危急，需緊急輸血搶救生命時(shí)，可立即給與O型洗滌紅細(xì)胞輸注。

2.4 移植患者接受ABO血型不同的造血干細(xì)胞移植后，受者原有血型的紅細(xì)胞不斷衰亡，相應(yīng)的抗體逐漸消失，最終ABO血型轉(zhuǎn)為供者血型。在受者完全轉(zhuǎn)變?yōu)楣┱哐椭?，患者血型及抗體會(huì)發(fā)生變化，輸血前應(yīng)根據(jù)患者病情變化及血型改變的情況，制訂合理的輸血策略，選擇相應(yīng)的血液成分[9]。

ABO血型主要不合的移植(受者體內(nèi)存在抗供者ABO血型抗原的抗體)，選擇紅細(xì)胞血液制品的血型與受者相同。為了減少同種抗體的輸入，以利于受者紅細(xì)胞血型轉(zhuǎn)變?yōu)楣┱哐?，可以考慮輸注洗滌紅細(xì)胞，而血小板和血漿制品的血型與供者相同。

ABO血型次要不合的移植(供者體內(nèi)存在抗受者ABO血型抗原的抗體)，在移植后3周內(nèi)應(yīng)監(jiān)測受者血型抗體效價(jià)并做抗人球蛋白試驗(yàn)，如果DAT反應(yīng)呈陽性，應(yīng)給患者輸注O型洗滌紅細(xì)胞，如果抗人球蛋白試驗(yàn)陰性，可以輸注與供者血型相同的紅細(xì)胞或普通O型紅細(xì)胞；血小板和血漿的血型與受者相同。

ABO血型主要不合及次要不合同時(shí)存在(受者體內(nèi)存在抗供者ABO血型抗原的抗體，同時(shí)供者體內(nèi)也存在抗受者ABO血型抗原的抗體)，在受者血型完全轉(zhuǎn)變?yōu)楣┱哐颓皯?yīng)輸注O型紅細(xì)胞，AB型血小板、血漿。

2.5 紅細(xì)胞多凝集或全凝集紅細(xì)胞多凝集或全凝集可有基因變異，也可因血中紅細(xì)胞被細(xì)菌或細(xì)菌酶污染，引起紅細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)改變，暴露出T抗原，T抗原具有免疫原性。大多數(shù)成人血清中含抗T抗體，因此，交叉配血時(shí)，T活化紅細(xì)胞幾乎與所有供血者的血清發(fā)生凝集反應(yīng)。鑒定交叉配血是否由紅細(xì)胞全凝集引起，可將患者紅細(xì)胞與臍帶血清或6個(gè)月以內(nèi)嬰兒血清作用，因6個(gè)月以內(nèi)嬰兒血清中不存在抗T抗體，不能與T抗原反應(yīng)，故紅細(xì)胞不凝集。將患者紅細(xì)胞分別與10人份AB血清反應(yīng)，部分凝集則稱為多凝集，如果全部凝集則是全凝集。

由疾病導(dǎo)致的全凝集現(xiàn)象是暫時(shí)的，一般病愈或控制感染后即自行消失，輸血時(shí)選用同型洗滌紅細(xì)胞制品，而避免輸全血或單獨(dú)輸血漿。

2.6 供血者DAT陽性正常人群約有1‰的供血者有DAT陽性，其紅細(xì)胞應(yīng)避免輸入患者體內(nèi)。同種異體輸血有傳播疾病和發(fā)生輸血反應(yīng)等風(fēng)險(xiǎn)，應(yīng)盡量避免或減少輸注，提倡自身輸血和成分輸血。用以交叉配血的患者血樣必需是3天之內(nèi)的、最能反映患者輸血前的免疫狀態(tài)的標(biāo)本。嚴(yán)把輸血前交叉配血關(guān)，規(guī)范操作規(guī)程并嚴(yán)格執(zhí)行，是減少輸血反應(yīng)、保障輸血安全的重要手段。

[1]夏兵,戴書萍,裴寶芹.慢性粒細(xì)胞白血病致微柱凝膠法交叉配血假陽性1例[J].中國輸血雜志,2011,24(2):152-153.

[2]鄒海虹,甘福生.凝聚胺法在交叉配血試驗(yàn)中的應(yīng)用價(jià)值[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床,2012,9(22):2889-2891.

[3]王晶吉.交叉配血試驗(yàn)中纖維蛋白原的干擾原因分析和去除方法的探討[J].中國醫(yī)藥指南,2011,9(10):96-97.

[4]楊瑩,譚雅玲,蔣永青.卡式配血在臨床輸血中的應(yīng)用價(jià)值[J].實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué),2011,29(3):332.

[5]陳燕萍,王長奇,朱芳,等.微柱凝膠技術(shù)鑒定血型和篩檢不規(guī)則抗體的臨床應(yīng)用[J].實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué),2008,26(6):719.

[6]李雪英,張國平,邱玉霞,等.35 751例健康獻(xiàn)血者紅細(xì)胞不規(guī)則抗體的分布及特點(diǎn)[J].山東醫(yī)藥,2011,51(15):94-95.

[7]雷國華,鐘清蘭,熊永萍,等.微柱凝膠免疫檢測法在配血及血型鑒定中的應(yīng)用[J].實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué),2010,28(2):202.

[8]梁潔玲,黃美群,王發(fā)雄,等.抗人球蛋白試驗(yàn)陽性患者分布特征探討[J].國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2012,33(17):2161-2162.

[9]高志勇,謝毅.血型不合造血干細(xì)胞移植前后的輸血支持[J].中國輸血雜志,2010,23(6):417-419.

457.4.1+1

A

1674-1129(2013)01-0059-02

10.3969/j.issn.1674-1129.2013.01.020

江西省衛(wèi)生廳科技計(jì)劃(編號(hào)20133048)

胡飄萍,女,1981年7月生,武漢大學(xué)碩士學(xué)位學(xué)歷,主要從事臨床輸血研究。