金鐵鎖化學成分和藥理活性研究進展

王 微，袁 琳，康文藝＊

（1.河南大學中藥研究所，河南 開封 475004；2.昆明學院 化學科學與技術系，云南 昆明 650214）

金鐵鎖（Psammosilene tunicoides W.C.Wu et C.Y.Wu）為石竹科金鐵鎖屬單屬單種多年生草本，別名昆明沙參、獨釘子、土人參等，產于我國四川、云南、貴州、西藏，金沙江和雅魯藏布江沿岸，海拔2000～3800m的礫石山或石灰質巖石縫中［1］。根入藥，屬于國家二級保護植物，是云南白藥的重要成分之一［2］。具有散瘀定痛、止血、消癰排膿之功，用于跌打損傷、風濕痛、胃痛、創(chuàng)傷出血等的治療［3］。近些年對金鐵鎖的研究主要集中在國內，研究方向主要為金鐵鎖化學成分、藥理作用、生物學特性、組織培養(yǎng)、栽培技術等。為了對金鐵鎖進行系統(tǒng)研究，我們對金鐵鎖的化學成分和藥理活性進行了綜述。

1 化學成分研究

1.1 三萜類

鐘惠民等［4－5］從金鐵鎖中分離得到9個五環(huán)三萜類化合物，經過波譜和化學方法鑒別分別為3－O－β－D－galactopyranosyl－（1→2）－β－D－6－O－methylglucuronopyranosyl－quillaic acid，3－O－β－D－galactopyranosyl－（1→2）－［β－D－xylopyranosyl－（1→3）］－β－Dglucuronopyranosyl－quillaic acid，3－O－β－D－galactopyranosyl－（1→2）－［β－D－xylopyranosyl－（1→3）］－β－D－6－O－methylglucuronopyranosyl－quillaic acid－，3－O－β－D－galactopyranosyl－（1→2）－［β－D－xylopyranosyl－（1→3）］－β－D－6－O－ethylglucuronopyranosyl－quillaic acid，3－O－β－D－galactopyranosyl－（1→2）－β－Dglucuronopyranosyl－gypsogenin，3－O－β－D－galactopyranosyl－（1→2）－［β－D－xylopyranosyl－（1→3）］－β－D－glucuronopyranosyl－gypsogenin，3－O－β－D－galactopyranosyl－（1→2）－β－D－glucuronopyranosyl－gypsogenin－28－O－β－D－xylopyranosyl－（1→4）－［β－D－glucopyranosyl－（1→3）］－α－L－rhamnopyranosyl（1→2）－β－D fucopyranoside，3－O－β－D－galactopyranosyl－（1→2）－［β－D－xylopyranosyl－（1→3）］－β－D－glucuro－nopyranosyl－gypsogenin－28－O－β－D－xylopyranosyl－（1→4）－［β－D－glucopyranosyl－（1→3）］－α－L－rhamnopyranosyl（1→2）－β－D－fucopyranoside，3－O－β－Dgalactopyranosyl－（1→2）－β－D－glucuronopyranosylgypsogenin－28－O－β－D－xylopyranosyl－（1→4）－［β－D－6－O－acetylglucopyranosyl－（1→3）］－α－L－rhamnopyranosyl（1→2）－β－D－fucopyranoside。

浦湘渝等［6］將金鐵鎖總皂苷用酸水解后過硅膠柱色譜得到6個皂苷元，經結構鑒定均為齊墩果烷型五環(huán)三萜類化合物：絲石竹酸，絲石竹苷元，表絲石竹苷元，16－異皂樹酸，16－異皂樹酸甲酯，3β－羥基－12、17－二烯－28－失碳齊墩果烷－23－醛。繼續(xù)進行研究，又從中分離鑒定出三萜化合物3－h(huán)ydrohxy－12，14－dienc－27－nordeane－28－nicacid［6］。

鄧雪濤等［7］運用硅膠柱色譜、sephadexLH－20凝膠柱色譜和反相C18柱色譜，從金鐵鎖中分離得到2個三萜類化合物，經過質譜與核磁鑒定為2－h(huán)ydroxyursolic acid和tormentic acid。

1.2 三萜皂苷類

鄧雪濤等［8］采用硅膠柱色譜、反相C18 柱色譜和sephadexLH－20凝膠柱色譜從金鐵鎖中分離得到1個三萜皂苷類化合物，經過質譜與核磁鑒定為3－O－β－D－galactopyranosyl－（1→2）－［β－D－xylopyranosyl－（1→3）］－β－D－6－O－methylglucuronopyranosylgypsogenin。

浦湘渝等［9］從金鐵鎖根中分離鑒定了2個齊墩果烷五環(huán)三萜皂苷齊墩果烷－3a，16a－二羥基－12烯－23酸－28－O－β－D－葡萄吡喃糖基（1→3）－β－D－葡萄吡喃糖基（l→6）－β－D－葡萄吡喃糖苷和齊墩果烷－3a，16a－二羥基－12烯－23酸－28－O－β－D－葡萄吡喃糖基（1→6）－β－D－葡萄吡喃糖基（l→3）－β－D－葡萄吡喃糖苷。

1.3 環(huán)肽類

丁中濤等［10－13］利用柱色譜的方法從金鐵鎖中分離得到2個環(huán)八肽和7個環(huán)二肽，經過各種方法鑒定為環(huán)（脯－苯丙－脯－苯丙－苯丙－丙－脯－亮）、環(huán)（脯－甘－苯丙－纈－脯－苯丙－蘇－異亮）、環(huán)（脯－纈）、環(huán)（脯－丙）、環(huán)（脯－脯）、環(huán)（丙－丙）、環(huán)（丙－纈）、環(huán)（丙－亮）、環(huán)（丙－異亮）。

1.4 糖類

孫曉燕等［14］利用間接高效液相色譜法分析測定了金鐵鎖多糖的單糖組成，多糖樣品加硫酸水解后，加1－苯基－3－甲基－5－吡唑啉酮（PMP）衍生化，用HPLC－DAD進行分析測定，結果是金鐵鎖中多糖的單糖組成摩爾比為半乳糖∶葡萄糖∶木糖∶鼠李糖＝15∶7∶4∶1。

1.5 揮發(fā)油

曹桂紅等［15］采用水蒸氣蒸餾法提取金鐵鎖根中的揮發(fā)油，利用毛細管柱氣相色譜－質譜聯(lián)用法測定了金鐵鎖根揮發(fā)油的化學成分。其中主要為脂肪酸類化合物占總揮發(fā)油含量的42.75%，萜類化合物占總揮發(fā)油含量的21.22%，烷烴類化合物占總揮發(fā)油含量的18.72%，其余還有酯類、脂肪醛類、脂肪醇類和少量烯烴類。

1.6 生物堿

采用硅膠柱色譜和sephadexLH－20凝膠柱色譜分離，運用各種波譜鑒定技術對分離得到的化合物進行結構鑒定，從金鐵鎖的正丁醇部位分離得到2個β－咔啉類生物堿，分別為l－乙酰基－3－甲酯基－β－咔啉、l－乙酰基－3－甲酯基－4－羥基－β－咔啉［16］。

1.7 其他類

除了以上類別的化合物，還有劉瀟瀟［17］、陳華國［18］等學者以及我們［19］從金鐵鎖中提取分離出植物甾醇類（豆甾醇、α－菠甾醇、α－菠甾醇－3－O－β－D－葡萄糖苷、β－谷甾醇、胡蘿卜苷），脂肪酸和脂肪醇類（二十三烷酸、正二十五烷酸、正十八烷酸、正二十六烷醇、杜鵑花酸、琥珀酸），以及尿囊素、D－3－O－甲基肌醇、羥基苯甲酸甲酯、N－methylsaccharin、Methyl 4－h(huán)ydroxybenzoate、stellarines A、goyaprosaponin、大豆腦苷Ⅰ、鳶尾苷等。

2 藥理活性研究

2.1 鎮(zhèn)痛抗炎作用

許建陽等［20－21］在弗氏完全佐劑（FCA）為類風濕性關節(jié)炎（RA）疼痛模型的基礎上，用金鐵鎖的水煎浸膏和中、西藥對照組分別進行治療。金鐵鎖水煎浸膏對實驗性類風濕關節(jié)炎小鼠的關節(jié)痛有顯著的鎮(zhèn)痛作用，并且治療7d時金鐵鎖大劑量組鎮(zhèn)痛作用優(yōu)于西藥陽性對照消炎痛組，其鎮(zhèn)痛作用主要表現(xiàn)在顯著提高痛閾、降低血清NO／NOS 等。除此以外，金鐵鎖水煎浸膏可以顯著消除實驗性類風濕關節(jié)炎大鼠足趾腫脹度，減輕疼痛級別，用藥5、7d時優(yōu)于西藥陽性對照吲哚美辛組。

王美娥等［22］在弗氏完全佐劑（FCA）為類風濕性關節(jié)炎（RA）疼痛模型的基礎上，用金鐵鎖的水煎浸膏和中、西藥對照組分別進行治療，并檢測其痛閾和腦組織神經遞質變化。發(fā)現(xiàn)金鐵鎖水煎浸膏對實驗性（RA）關節(jié)痛具有顯著的鎮(zhèn)痛效應，明顯提高痛閾并顯著提高大鼠腦中5－羥色胺、5－羥吲哚乙酸和5－羥色氨酸的含量，降低多巴胺和去甲腎上腺素含量腦組織神經遞質。

楊蓮等［23］用熱板法和扭體法觀察金鐵鎖乙醇總浸膏、總皂苷部分和去總皂苷部分對昆明種小鼠的鎮(zhèn)痛作用，結果總浸膏和總皂苷部分各劑量對扭體法動物模型有較明顯的鎮(zhèn)痛作用，去總皂苷部分無作用，提示金鐵鎖皂苷具有外周鎮(zhèn)痛藥的作用。

王學勇等［24－27］對金鐵鎖總皂苷抗類風濕性關節(jié)炎作用及機制的研究表明：金鐵鎖總皂苷能有效抑制佐劑性關節(jié)炎大鼠踝關節(jié)的急性炎癥反應，對足腫脹顯示出明顯的抑制作用，作用強度大于風濕寧注射液，接近地塞米松；能明顯改善多發(fā)性關節(jié)炎四肢足爪的腫脹程度，抑制佐劑性關節(jié)炎大鼠繼發(fā)性病變的惡化趨勢；大劑量組對大鼠醋酸扭體法實驗顯示出鎮(zhèn)痛作用，鎮(zhèn)痛效果高于風濕寧組。金鐵鎖總皂苷的抗炎機制表現(xiàn)在以下幾個方面：①與抑制炎性組織液中促炎細胞因子IL－1β，TNF－α的產生有關，并且存在劑量依賴性；②能降低炎性組織液中丙二醇的含量并雙向調節(jié)大鼠血中皮質醇的水平；③能有效抑制模型大鼠c－fos基因蛋白在下丘腦、脊髓、心肌等器官的炎性疼痛中樞及外周各組織中的表達，從分子蛋白水平部分提示了金鐵鎖總皂苷的抗炎鎮(zhèn)痛作用機制。

宋烈昌［28］等以巴豆油致炎劑對小鼠進行腹腔注射，錘取小鼠左右耳片，以其重量之差作為腫脹度指標。結果顯示，金鐵鎖總皂苷對巴豆油所致鼠耳腫脹度的抑制率達60%以上。對小鼠棉球肉芽腫實驗表明，金鐵鎖總皂苷對慢性增殖性炎癥也有一定的抑制作用。

2.2 抗氧化

袁琳等［29］采用清除二苯代苦味?；―PPH）自由基、清除［2，2＇－連氨－（3－乙基苯并噻唑啉－6－磺酸）二氨鹽］（ABTS）自由基和鐵離子還原／抗氧化能力（FRAP）3種測定方法，對金鐵鎖各部位進行體外抗氧化活性進行研究。3種方法結果均表明，金鐵鎖各部位存在體外抗氧化活性，清除自由基能力順序為乙酸乙酯部位＞正丁醇部位＞石油醚部位。

2.3 免疫調節(jié)

鄭維發(fā)等［30］研究了金鐵鎖總皂苷對小鼠免疫功能的影響。通過研究發(fā)現(xiàn)，金鐵鎖總皂苷能顯著地下調免疫增強組小鼠的遲發(fā)性超敏反應和提高免疫抑制組的遲發(fā)性超敏，在濃度為1～3μg／mL 時能促進小鼠巨噬細胞生成白介素－1，當濃度為4μg／mL 時促進作用開始減弱，能促進小鼠脾淋巴細胞增殖反應，在一定劑量范圍內能促進小鼠脾淋巴細胞產生白介素－2，隨著劑量增大作用減弱直至消失。說明了金鐵鎖總皂苷對小鼠的細胞免疫具有增強和調節(jié)作用。

2.4 抑菌

宋烈昌［28］等采用平皿法在瓊脂培養(yǎng)基上進行抑菌實驗發(fā)現(xiàn)，金鐵鎖總皂苷對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、綠膿桿菌和白色念珠菌均有一定的抑制作用，在Sabouraud培養(yǎng)基上的抑菌實驗表明，金鐵鎖總皂苷對石羔樣毛癬菌、斷發(fā)毛癬菌和孢子絲菌具有一定的抑制作用。

2.5 其他生物活性

小鼠頸背皮下注射金鐵鎖總皂苷生理鹽水溶液，發(fā)現(xiàn)小鼠出現(xiàn)活動減少，四肢無力、閉目嗜睡、呼吸急促、毛豎立，最后呼吸衰竭而死，表明金鐵鎖具有急性毒性。在試管內進行溶血實驗，結果表明，金鐵鎖總皂苷有強溶血作用，對家兔、狗、羊、豚鼠的血的溶血指數(shù)均為1∶33200。在家兔眼內滴入0.05%金鐵鎖總皂苷2 滴，30min后結膜充血紅腫，提示金鐵鎖總皂苷對黏膜具有強刺激性［28］。

3 結語

金鐵鎖不僅是云南白藥的重要成分之一，同時還是許多中成藥的有效成分之一，如貴州金骨蓮膠囊、福建痛血康膠囊、雪上一枝蒿速效止痛搽劑、杜仲壯骨丸和杜仲壯骨膠囊等。目前，利用分子生物學手段建立了金鐵鎖DNA 指紋圖譜和化學成分指紋圖譜，對金鐵鎖進行深入研究，為其鑒別和質量評價提供科學依據(jù)。

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