樹突狀細(xì)胞在胃癌中的研究進(jìn)展

續(xù)文婷，楊 楨，呂農(nóng)華

(南昌大學(xué)第一附屬醫(yī)院消化內(nèi)科，江西南昌330006)

胃癌作為消化道最常見的惡性腫瘤之一，是全球癌癥相關(guān)性死亡的第二大常見原因。近年來，隨著對(duì)腫瘤研究的深入，人們逐漸從免疫角度來認(rèn)識(shí)腫瘤。樹突狀細(xì)胞(dendritic cells，DCs)可以隨時(shí)捕獲抗原，從而有效地誘導(dǎo)免疫應(yīng)答。其在腫瘤免疫方面的作用引起了很多的關(guān)注，尤其與胃癌的關(guān)系突出［1］。

1 DCs 的生物特性

DCs 可以誘導(dǎo)、維持和調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答。根據(jù)其發(fā)展階段的不同，大致可分為以下3 類:1)前體DCs。其又可分為兩種類型，即CD8α-的骨髓單核細(xì)胞和CD8α + 的漿細(xì)胞樣前體DCs。CD40 配體(CD40L)激活骨髓單核細(xì)胞后，產(chǎn)生大量的T 細(xì)胞分化因子白細(xì)胞介素12(IL-12)，從而誘導(dǎo)Th1 型T細(xì)胞反應(yīng)的發(fā)生;而CD40L 激活后者后，更傾向于誘導(dǎo)Th2 型T 細(xì)胞反應(yīng)［2-3］。2)未成熟的DCs。其特點(diǎn)是能高效攝取抗原，并具有較強(qiáng)的內(nèi)吞作用和吞噬能力，但對(duì)T 細(xì)胞的刺激能力較弱。3)成熟DCs。一方面其可上調(diào)共刺激分子的表達(dá)，從而與T細(xì)胞上的受體相互作用，以增強(qiáng)自身的黏附性和共刺激性［4］;另一方面又可分泌IL-12，增強(qiáng)先天性和獲得性免疫力［5］。與未成熟的DCs 相比，成熟DCs內(nèi)主要組織相容性復(fù)合體(major histocompatibility complex，MHC)。類分子和MHC II 類分子表型穩(wěn)定性更高并且半衰期延長(zhǎng)，從而有利于抗原遞呈的高效完成。而且在成熟過程中，DCs 可下調(diào)未成熟DCs 產(chǎn)生的炎性趨化因子及其受體的表達(dá)，并上調(diào)結(jié)構(gòu)趨化因子復(fù)合體以及CCR7 受體的表達(dá)，從而促進(jìn)活化T 細(xì)胞來識(shí)別呈遞的抗原。

2 DCs 與胃癌免疫逃避

有研究發(fā)現(xiàn)，DCs 含量的多少與胃癌組織的分化程度、浸潤(rùn)深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期密切相關(guān)，低分化、深度浸潤(rùn)、高臨床分期的胃癌組織中，DCs 的含量更低，而且成熟DCs 與總DCs 相比，前者在不同胃癌組織中的變化更明顯［6-7］。DCs 在胃癌患者免疫反應(yīng)中的功能是否得到正常發(fā)揮是造成上述差異發(fā)生的基礎(chǔ)。當(dāng)細(xì)胞發(fā)生癌變時(shí)，DCs 可刺激機(jī)體發(fā)生細(xì)胞免疫反應(yīng)和體液免疫反應(yīng)，來識(shí)別并破壞表達(dá)此抗原的癌細(xì)胞。DCs 所參與的這些免疫反應(yīng)的正常有效的進(jìn)行是抑制胃癌細(xì)胞持續(xù)生長(zhǎng)的根本。而DCs 功能的非正常行使會(huì)導(dǎo)致胃癌細(xì)胞對(duì)這種免疫監(jiān)視的逃避。其中非功能性DCs 在免疫逃避機(jī)制中占主導(dǎo)地位，而調(diào)節(jié)性T 細(xì)胞(T regulatory cells，Tregs)、C-型凝集素受體DC-SIGN 能更好的輔助前者，共同促進(jìn)一個(gè)免疫耐受微環(huán)境的形成。

2.1 非功能性DCs 的作用

越來越多的證據(jù)表明，免疫原性差的DCs 可通過誘導(dǎo)機(jī)體無變應(yīng)性或自身反應(yīng)性T 細(xì)胞的缺失等來啟動(dòng)和維持免疫耐受性［8］。在穩(wěn)定條件下，組織中未成熟DCs 表達(dá)低水平的MHC II 類分子、共刺激分子和炎性細(xì)胞因子。在應(yīng)激狀態(tài)下，細(xì)胞會(huì)釋放“病原體相關(guān)分子模型”(pathogen-associated molecular patterns，PAMPs)或“危險(xiǎn)相關(guān)分子模型”(danger-associated molecular patterns，DAMPs)的信號(hào)［9］。這些危險(xiǎn)信號(hào)可被Toll 樣受體(toll-like receptors，TLRs)或Nod 樣受體(nod-like receptors，NLRs)識(shí)別，從而觸發(fā)DCs 內(nèi)的瀑布效應(yīng)，使未成熟DCs 的表型和功能得以改變，進(jìn)而轉(zhuǎn)變?yōu)槌墒霥Cs。在此過程中，DCs 可誘導(dǎo)MHC II，CD40，CD80 和CD86 分子的表達(dá)，且伴隨一些促炎性細(xì)胞因子和T細(xì)胞活化因子的表達(dá)升高，如IL-1β、IL-6 和IL-12等［9］。但是，如果未成熟DCs 攝取抗原時(shí)，不能同時(shí)暴露TLRs 或NLRs 的配體位點(diǎn)，則受體不會(huì)發(fā)揮識(shí)別作用，就會(huì)導(dǎo)致DCs 最終處于一個(gè)高表達(dá)MHC II 類分子，低表達(dá)或不表達(dá)共刺激分子或促炎性細(xì)胞因子的半成熟狀態(tài)，這種狀態(tài)的DCs 會(huì)表現(xiàn)出免疫耐受性［10］。此外，也并非所有的成熟DCs 都具有免疫刺激性?！昂慕逥Cs”(exhausted DCs，exDCs)，即成熟DCs 失去了其本身具有的誘導(dǎo)幼稚型T 細(xì)胞向Th-1 細(xì)胞分化的能力，但可分泌免疫抑制分子IL-10 并引起非極化的記憶細(xì)胞反應(yīng)和/或Th2 型細(xì)胞反應(yīng)。“exDCs”由于不能發(fā)揮正常的免疫功能，也表現(xiàn)出免疫耐受性［8］。由此可以看出，“半成熟DCs”以及“exDCs”作為非功能性DCs，在胃癌免疫逃避中發(fā)揮重要作用。

2.2 Tregs 的作用

Tregs 是獲得性免疫反應(yīng)的主要調(diào)節(jié)成分。Tregs 通過細(xì)胞接觸、劑量依賴和/或分泌可溶性因子，如IL-10 或TGF-β，來有效抑制CD4 +CD25-T細(xì)胞、CD8 +毒性T 細(xì)胞、Th 細(xì)胞、自然殺傷細(xì)胞、自然殺傷淋巴細(xì)胞以及B 細(xì)胞。DCs 和Tregs 互相有效地調(diào)節(jié)，促進(jìn)了一個(gè)免疫耐受環(huán)境的形成［11-12］。一方面半成熟DCs 可將幼稚T 細(xì)胞轉(zhuǎn)化為FoxP3 +的Tregs 并誘導(dǎo)和加強(qiáng)Tregs 免疫抑制的的功能;另一方面FoxP3 +Tregs 在DCs 上形成聚集體，從而積極下調(diào)DCs 的共刺激分子和成熟標(biāo)志物，并損害DCs 激活抗原特異性幼稚T 細(xì)胞的能力，致使胃癌細(xì)胞不能被宿主識(shí)別而得以持續(xù)生長(zhǎng)［8，12］。

2.3 DC-SIGN 的作用

C-型凝集素受體DC-SIGN，為DCs 的模式識(shí)別受體和黏附受體，存在于所有的黏膜表面和淋巴器官中。DC-SIGN 在調(diào)節(jié)DCs 的黏附、遷移及炎性反應(yīng)，觸發(fā)免疫反應(yīng)以及參與病原體與腫瘤的免疫逃避方面都具有十分重要的作用。胃癌可通過DCSIGN 的作用抑制DCs 的成熟和逃避宿主免疫監(jiān)督［13］。DC-SIGN 還可通過p38-MAPK 信號(hào)通路以及組蛋白修飾來調(diào)節(jié)IL-10 的含量［14］。而IL-10 在促進(jìn)Tregs 變異、增殖以及維持抑制性Tregs 細(xì)胞表型的穩(wěn)定方面具有重要作用［15］。

3 DCs 在胃癌治療中的應(yīng)用

現(xiàn)已表明免疫療法與傳統(tǒng)療法相結(jié)合有利于達(dá)到最大的治療效應(yīng)。所以開展以DC 為基礎(chǔ)的腫瘤疫苗可以有希望成為胃癌治療的一種新的有效的免疫佐劑，來降低胃癌的發(fā)病率和復(fù)發(fā)率［16-17］。目前已得到應(yīng)用的抗原負(fù)載型DCs 疫苗主要有以下來兩種:其一即通過各種途徑將胃癌相關(guān)性抗原呈遞給DCs，以產(chǎn)生強(qiáng)而有效的細(xì)胞毒性T 細(xì)胞反應(yīng);另外即是采用來源于DCs 和整個(gè)胃癌細(xì)胞的融合細(xì)胞，來刺激胃癌特異性免疫應(yīng)答［18］。前者可通過使用來自于已知的胃癌相關(guān)性抗原、胃癌細(xì)胞裂解物、凋亡的胃癌細(xì)胞或胃癌細(xì)胞RNA 的合成多肽來對(duì)DCs 進(jìn)行脈沖。而后者在融合過程可促進(jìn)已知或未知的胃癌相關(guān)性抗原進(jìn)入到內(nèi)源性抗原加工過程中，并通過MHC I 和MHC II 類途徑呈遞抗原肽［18］。

最近，隨著人們對(duì)新的腫瘤相關(guān)肽、RNA、裂解物或凋亡小體的不斷認(rèn)識(shí)，在DCs 疫苗方面又有了新的研究。有研究指出可以采用以磷酸酶和張力蛋白同源基因(PTEN)為靶向的小干擾RNA(siRNA)來增加DCs 疫苗的效力［19］。一方面DCs 中PTEN的下調(diào)可間接引起共刺激分子和趨化因子受體CCR7 表達(dá)的明顯上調(diào)，前者可導(dǎo)致淋巴細(xì)胞活性的提高，后者可促進(jìn)淋巴細(xì)胞向淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移;另一方面DCs/siPTEN 可產(chǎn)生更多的胃癌抗原特異性細(xì)胞毒性T 細(xì)胞，因此具有更強(qiáng)的抗腫瘤效應(yīng)［19］。此外，溶解產(chǎn)物FG-CC-siRNA 也可顯著的增強(qiáng)DCs 的抗腫瘤免疫活性:其可阻斷FG-CC'循環(huán)，影響Tim-1和Tim-4 的相互作用，從而抑制Th2 型細(xì)胞增殖，有利于調(diào)節(jié)Th1/Th2 的平衡，使胃癌生長(zhǎng)得到抑制［20］。

4 結(jié)語(yǔ)

DCs 在胃癌的發(fā)生、發(fā)展、治療中的作用已逐漸得到認(rèn)識(shí)，而DCs 與其他致癌因素間又是如何相互作用來共同影響胃癌的進(jìn)程還有待進(jìn)一步研究。此外，雖然在DCs 疫苗方面已有大量研究，但能否研發(fā)出性價(jià)比更高的DCs 疫苗，從而提高大多數(shù)胃癌患者的治療效果，改善其預(yù)后是目前迫切需要解決的問題。

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