普洱茶調(diào)節(jié)高脂血癥大鼠血脂水平的研究

江新鳳 邵宛芳 劉彩霞

(1.江西省蠶桑茶葉研究所 330202; 2.云南農(nóng)業(yè)大學(xué)龍潤普洱茶學(xué)院 650201)

普洱茶是我國歷史悠久的特種茶，民間飲用普洱茶的人認(rèn)為普洱茶具有消食、去膩、減肥、降血脂等功效，先人的茶藥總結(jié)，往往是憑感官、經(jīng)驗(yàn)而得，多數(shù)是知其然而不知其所以然。而如今隨著科學(xué)技術(shù)的進(jìn)步，普洱茶藥效引起了國內(nèi)外專家、學(xué)者們的特別關(guān)注，到目前為止，研究者們已對茶葉的降血脂、抗氧化、抗癌及防治心腦血管疾病、減肥、消炎、健齒護(hù)牙等功效開展了一系列的研究，但用普洱茶茶湯灌胃的研究報(bào)道較少。本研究旨在初步探討普洱茶調(diào)節(jié)血脂和預(yù)防脂肪肝作用，為進(jìn)一步研究和探討普洱茶的保健作用提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

1)茶葉原料:普洱茶(生茶)、普洱茶(熟茶):由云縣天龍生態(tài)茶葉有限責(zé)任公司生產(chǎn);生產(chǎn)時(shí)間:2007年6月。經(jīng)檢測:普洱生茶的水分含量9.08%＜13%，總灰分4.98% ＜7.5%，水浸出物質(zhì)48.83%＞35.0% ，茶多酚33.7% ＞20%;普洱熟茶的水分含量9.97 % ＜14.0%，總灰分8.12% ＜8.5%，水浸出物質(zhì)30.82% ＞28.0%，茶多酚11.8% ＜15%，成分符合《地理標(biāo)志產(chǎn)品普洱茶》國家標(biāo)準(zhǔn)(GB/T22111 －2008)的規(guī)定，說明受試茶樣品質(zhì)合格，并具有一定的代表性。

2)對照藥品:調(diào)節(jié)血脂中藥(XZK)，藥店購買。

3)實(shí)驗(yàn)動物:SD 雄性大鼠100 只，購于昆明醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動物中心，許可證號:SYXK(滇)2005 －0008，飼養(yǎng)于昆明醫(yī)學(xué)院天然藥物研究所SPF 級重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室。

1.2 實(shí)驗(yàn)試劑

總膽固醇(TCHO)、甘油三脂(TG)購于北京中生生物工程技術(shù)公司;低密度脂蛋白膽固醇(LDL －C)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL－C)。

1.3 主要儀器

RE－52AA 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，上海亞榮生化儀器廠;TMS－1024 全自動生化分析儀，日本京都;Leica RM－2145 石蠟包埋切片機(jī)，德國制造;Leica EG1160包埋機(jī):德國制造;Leica APS200 組織脫水機(jī)，德國制造。

1.4 茶湯及藥的制備

1.4.1 茶湯制備方法［1］

普洱茶100g→沸水浸提三次(各次茶水比為1:20;1 :20;1:10;浸提時(shí)間分別為20min、20min、10min)→脫脂棉過濾→合并三次浸提茶湯→濾液減壓濃縮至100mL(濃縮溫度60℃)→裝瓶滅菌備用。(其茶湯濃度為1 g 茶/mL)。茶湯一周濃縮一次，濃縮后的茶湯低溫冷藏(4℃)，灌胃前充分搖勻，現(xiàn)配現(xiàn)用。

1.4.2 藥的制備

準(zhǔn)確稱取2g 市售降脂藥研缽內(nèi)研細(xì)，放入燒杯中，加入蒸餾水?dāng)嚢枞芙夂蠖ㄈ葜?0mL，即為4%市售對照藥溶液，現(xiàn)配現(xiàn)用。

1.5 動物飼料的制備

鼠用營養(yǎng)顆粒飼料，高壓滅菌，常溫貯存。自制高脂飼料其比例為:基礎(chǔ)飼料788 g/kg，豬油100g/kg，蛋黃粉100g/kg，膽固醇10g/kg，膽鹽2g/kg［2］。

1.6 動物分組及試驗(yàn)方法

SD 大鼠100 只適應(yīng)性飼養(yǎng)一周后，10 只飼喂基礎(chǔ)飼料，其余飼喂高脂飼料，飼喂28 天，高脂模型建成后，挑選80 只高脂血癥大鼠按血清TC 水平和體重隨機(jī)分為8 組，10 只/組。試驗(yàn)處理9 個:空白對照組，高脂模型組，藥物對照組，生茶低劑量組，生茶中劑量組，生茶高劑量組，熟茶低劑量組，熟茶中劑量組，熟茶高劑量組。低、中、高劑量分別為0.5g/kg·bw，1.0g/kg·bw，2.0g/kg·bw，經(jīng)口灌胃，空白對照組、高脂模型組灌胃蒸餾水。灌胃量為10mL/kg·bw。受試物30 天后，SD 大鼠禁食12h，股動脈采血，收集血樣，分離血清，分裝待測。參照試劑盒說明書進(jìn)行TCHO、TG、LDL －C、HDL －C 含量測定，同時(shí)觀察腹腔各臟器外觀并摘取肝組織進(jìn)行常規(guī)HE 染色，以觀察其病理變化。

1.7 肝臟病理診斷標(biāo)準(zhǔn)

根據(jù)2006年2月中華醫(yī)學(xué)會肝病學(xué)分會脂肪肝和酒精性肝病學(xué)組制定的《非酒精性脂肪性肝病診療指南》［3］，依據(jù)肝細(xì)胞脂肪變性占據(jù)所獲取肝組織標(biāo)本量的范圍，可將肝細(xì)胞脂肪變性程度分為4 度(F0 －F4):F0 ＜5%肝細(xì)胞脂肪變性;Fl 為5%～30%肝細(xì)胞脂肪變性;F2 為31% ～50%肝細(xì)胞脂肪變性;F3 為51% ～75%肝細(xì)胞脂肪變性;F4 為75%以上肝細(xì)胞脂肪變性。炎癥程度可分3 級(G0－G3);GO 為無炎癥;G1 灶狀肝細(xì)胞炎癥或點(diǎn)狀肝細(xì)胞壞死;G2 小片狀肝細(xì)胞炎癥或壞死;G3 為大片狀肝細(xì)胞炎癥或壞死。

1.8 統(tǒng)計(jì)分析方法

2 結(jié)果與分析

2.1 對大鼠體重的影響

表1 普洱茶對高脂血癥SD 大鼠體重的影響(X ±SE)

給藥前(T0)，各給藥組體重明顯高于陰性對照組，與模型組相當(dāng)。表明造模結(jié)束后根據(jù)TC 隨機(jī)分組，體重間無明顯差異，給藥前的分組科學(xué)。從統(tǒng)計(jì)表1 中可以看出高脂模型組體重增長最為迅速，而灌胃普洱茶生茶和熟茶的各劑量組大鼠體重均有一定程度的抑制。

2.2 普洱茶對SD 大鼠血脂水平的影響

由表2 可見大鼠血清中總膽固醇(TC)普洱茶熟茶各劑量組與正常大鼠組水平接近，其余各組與高脂模型組相近;甘油三脂(TG)含量各給茶組明顯低于高脂模型組，其中XZK 對照組與模型組相當(dāng);高密度脂蛋白(HDL－C)各給茶組均高于模型組和XZK 對照組;低密度脂蛋白(LDL －C)均低于高脂模型組。

2.3 普洱茶對SD 大鼠AI 值的影響

如圖1，普洱茶茶組AI 值與高脂模型組AI 值(為0.64 ±0.07)相比，茶組的動脈粥硬化指數(shù)(AI值)明顯偏低，且具有顯著性差異。與陰性對照組相比，給茶組稍高于陰性對照組;其中XZK 對照組AI 系數(shù)明顯高于其他各組。說明普洱茶能很好的抑制動脈粥樣硬化的產(chǎn)生，其中熟茶作用更明顯，其作用明顯優(yōu)于XZK 降脂藥。

表2 大鼠血清TC、TG 、HDL－C 及LDL－C 水平(mmol/L)的影響( ±SE)

表2 大鼠血清TC、TG 、HDL－C 及LDL－C 水平(mmol/L)的影響( ±SE)

組別TCTGHDL－CLDL－C陰性對照1.61 ±0.05BC0.31 ±0.03BC1.41 ±0.01BC0.15 ±0.06 BC高脂模型2.42 ±0.08A0.83 ±0.09A1.30 ±0.08A1.05 ±0.21A XZK 對照組2.36 ±0.16A0.80 ±0.14A1.33 ±0.14A0.85 ±0.41A生茶低劑量2.40 ±0.16A0.24 ±0.04BC1.60 ±0.12ABC0.96 ±0.33A生茶中劑量2.29 ±0.15bA0.24 ±0.36BC1.69 ±0.13ABC0.78 ±0.36A生茶高劑量2.32 ±0.15bA0.28 ±0.05BC1.70 ±0.16ABC0.42 ±0.34BC熟茶低劑量1.92 ±0.07bA0.11 ±0.02aBC1.42 ±0.08bc0.63 ±0.43AB熟茶中劑量1.96 ±0.07Bc0.20 ±0.04BC1.45 ±0.07bC0.32 ±0.19BC熟茶高劑量1.84 ±0.05BC0.22 ±0.03BC1.49 ±0.04bC0.33 ±0.12 BC

圖1 普洱茶對高脂血癥大鼠AI 值的影響

2.4 普洱茶對大鼠肝臟脂肪變性的影響

除陰性對照組外(見表3)，所有動物可見肝細(xì)胞脂肪空泡增多，有的泡被擠至一側(cè)，病變程度組間有明顯差別:普洱生茶、熟茶6 個劑量組肝臟脂肪變性明顯輕于模型組及XZK 對照組。熟茶3 個劑量組組間病變程度無明顯差異。普洱茶生茶高劑量組與普洱茶熟茶三個劑量組病變程度基本相當(dāng)，變性程度輕于生茶中、低劑量組。表明普洱茶生茶、熟茶均有明顯防治高脂飲食引起的SD 大鼠肝臟脂肪變性的作用，其作用優(yōu)于XZK 對照組，熟茶作用優(yōu)于生茶。

表3 及圖1 結(jié)果顯示，肝臟脂肪病變程度和血脂指標(biāo)一致，即普洱茶熟茶效果優(yōu)于普洱茶生茶，且與劑量成正相關(guān)。

表3 普洱茶對高脂血癥大鼠肝臟脂肪病變程度

3 結(jié)論

普洱茶能很好地抑制大鼠體重增長，延緩大鼠肥胖的發(fā)生。［4］

普洱茶能改善高脂血癥大鼠的血脂水平。血清生化檢測結(jié)果表明，普洱茶生茶和普洱茶熟茶可降低大鼠血清TC、TG、LDL － C 水平，升高大鼠血清HDL－C 水平。降低LDL －C 效果普洱茶熟茶優(yōu)于普洱茶生茶;升高大鼠血清HDL －C 水平普洱茶生茶優(yōu)于普洱茶熟茶，普洱茶熟茶低、中、高劑量組分別升高7.74%、7.74%、6.43%。其原因可能是普洱茶生茶和普洱茶熟茶的內(nèi)含成分差異導(dǎo)致。［5～6］

普洱茶能預(yù)防大鼠脂肪肝變性。試驗(yàn)結(jié)果表明:普洱茶生茶中、高劑量組和普洱茶熟茶低、中、高劑量組極顯著降低AI 值(P ＜0.01，)，說明普洱茶能改善血管內(nèi)皮功能，可減少機(jī)體對AS 和CHD 的易患性，而且具有明顯的抗AS 和預(yù)防心血管疾病作用，從而達(dá)到治療高脂血癥和動脈硬化的作用，普洱茶組能很好地抑制SD 大鼠脂肪肝的變性。

［1］劉勤晉，陳文品，白文祥.普洱茶急性毒性安全性評價(jià)研究報(bào)告［J］.茶葉科學(xué)，2003，23(2):141 ～145.

［2］Yeh CW，Chen WJ，Chiang CT，et a1. Suppression of fatty acid synthase in MCF－7 breast cancer cells by tea and tea polyphenols:a possible mechanism for their hypolipidemic efects. J Pharmacogenomics，2003，3(5):267 ～276.

［3］中華醫(yī)學(xué)會肝臟學(xué)分會脂肪肝和酒精肝病學(xué)組.非酒精性脂肪性肝病診療指南［J］.中華肝臟病雜志，2006，14(03):161 ～162.

［4］Y. Hou ，Wf. Shao，R. Xiao，et al. Pu －erh tea aqueous extracts lower atherosclerotic risk factors in a rat hyperlipidemia model［J］. Experimental Gerontology，2009 ，44:434 ～439.

［5］江新鳳，邵宛芳，侯艷.普洱茶預(yù)防高脂血癥及抗氧化的研究［J］. 云南農(nóng)業(yè)大學(xué)校報(bào)(自然科學(xué)版)，2009，24(5):705 ～712

［6］江新鳳，邵宛芳.普洱茶對高脂血癥大鼠血脂、血漿中血栓B2、6 －酮前列腺素F1α 水平影響［J］.食品科學(xué)，2011，32(7):317 ～320